ЭПИФИТНАЯ МИКРОФЛОРА ЗЕРНА И ЕЕ ИЗМЕНЕНИЕ ПРИ ХРАНЕНИИ КОРМА
На поверхности зерна обитает разнообразная микрофлора. Часть микроорганизмов попадает из ризосферы, часть заносится с пылью и насекомыми. Однако на зерне, как и на всей поверхности растений, развиваются лишь некоторые микроорганизмы так называемые эпифиты. Эпифитные микроорганизмы, размножающиеся на поверхности стеблей, листьев и семян растений, получили название микроорганизмов филло-с ф е р ы. Эпифиты питаются продуктами экзосмоса растений. Условия жизни эпифитных бактерий своеобразны. Они довольствуются небольшими запасами питательных веществ на поверхности растений, устойчивы к высоким концентрациям фитонцидов, выдерживают периодические колебания влажности. Поэтому численность их невелика и видовой состав довольно постоянный. Более 90% эпифитных микроорганизмов составляют гнилостные бактерии. В основном эпифит- ная микрофлора представлена неспороносными бактериями. Большую часть бактериального населения зерна составляют неспороносные палочки рода Pseudomonas.активно развивающиеся на поверхности растений. Особенно часто встречается Pseudomonas herbicola (Erwinia herbicola),образующая на плотных средах золотисто-желтые колонии. Встречаются также Pseudomonas fluorescens,микрококки, молочнокислые бактерии, дрожжи. Бациллы и микроскопические грибы составляют небольшой процент.
В определенных условиях эпифитные микроорганизмы могут быть полезны для растений, так как препятствуют проникновению паразитов в ткани растения.
При хранении зерна эпифитные микроорганизмы могут играть отрицательную роль. В зрелом зерне вода находится в связанном состоянии и недоступна микро-организмам. На таком зерне они находятся в состоянии анабиоза (покоя). На развитие микроорганизмов на зерне, а следовательно, на сохранность последнего решающее влияние оказывают: влажность, температура, степень аэрации, целостность зерна и состояние его покровных тканей. На зерне с повышенной влажностью микроорганизмы размножаются тем быстрее, чем выше температура.
Развитие микробиологических процессов в хранящемся зерне с повышенной влажностью приводит к заметному, а иногда и к очень значительному повышению температуры. Это явление получило название термогенеза.
Самосогревание зерна ведет к смене микрофлоры. Свойственная зерну эпифитная микрофлора исчезает. Сначала обильно размножаются непигментированные неспороносные палочки, вытесняющие Erwinia herbicola.Позднее появляются термостойкие (термотолерантные) микрококки, образующие на плотных средах чаще всего мелкие белые плоские колонии, плесневые грибы, актнномицеты. Дальнейшее развитие процесса самосогревания (свыше 40-50°С) способствует развитию спорообразующих и термофильных бактерий.
По мере самосогревания изменяется и видовой состав плесневых грибов. Виды Penicillium,которые преоб-ладали вначале, заменяются видами Aspergillus.
Таким образом, по видовому составу микрофлоры можно судить не только о том, подвергалось ли зерно самосогреванию, но и насколько далеко зашел этот процесс. Преобладание Ertioinia herbicolaв микробном ценозе зерна служит показателем его хороших качеств. Большое количество спорообразующих бактерий и грибов указывает на потерю всхожести семян.
Благоприятные условия для развития на зерне микроорганизмов приводят к накапливанию выделяемых ими токсинов. В результате при сщрмливашш такого зерна скоту и домашней птице часто возникают кормовые отравления.
Таким образом, правильное хранение зерна должно сводиться к тому, чтобы не допускать развития на нем микроорганизмов.
Для количественного учета микроорганизмов на зерне навеску массой 5 г помещают в колбу с 50 мл стерильной водопроводной воды и 2-3 г песка. Колбу взбалтывают круговыми вращательными движениями в течение 10 мин. Из полученной.вытяжки готовят последующие разведения (10~2; 10_3; 10-4). Отдельными стерильными пипетками Мора берут по 10 мл суспензии и переносят в колбы, содержащие по 90 мл стерильной водопроводной воды. Затем из каждой колбы берут по 1 мл суспензии соответствующего разведения в стерильные чашки Петри в двух повторностях. В каждую чашку Петри выливают по 1 пробирке расплавленного, но предварительно охлажденного до 50°С МПА. Чашки инкубируют при температуре 30° С. Наряду с МПА используют элективные среды, описанные в разделе «Анализ силоса».
Через 3-5 дней инкубации подсчитывают общее число колоний, выросших на МПА в чашках, и рассчитывают количество микроорганизмов на 1 г зерна.
Для определения качественного состава микрофлоры зерна колонии группируют по культуральным признакам, из каждой группы колоний готовят препараты, выявляют принадлежность микроорганизмов к роду или семейству и определяют численность бактерий каждой группы в процентах от общего количества микроорганизмов.
Для идентификации выделенные культуры микроорганизмов очищают.
На основании микробиологического анализа, дела-ют заключение о качестве зерна.
На свежем доброкачественном зерне преобладает Erwinia herbicola(до 80%), образующая блестящие оранжевые колонии. Встречаются Pseudomonas fluores- cens,формирующая желтовато-зеленоватые флуоресцирующие колонии, непигментированные неспорообразую-щие палочки, дрожжи (колонии блестящие, выпуклые, часто окрашенные в розовые тона). При учете на сусло- агаре с мелом выявляются молочнокислые бактерии, образующие чечевицеобразные мелкие колонии с зонами растворения мела.
На несвежем зерне, хранившемся в условиях повышенной влажности, Erwinia herbicola, Pseudomas fluo- rescensне выявляются. Обнаруживаются микрококки, образующие мелкие белые блестящие плоские колонии, спорообразующие палочки, актиномицеты, а также неспороносные палочки. При учете на сусло-агаре выявляется значительное количество грибов, главным образом относящихся к роду Penicillium,а также Aspergillus.
Материалы и оборудование. Зерно в колбах свежее и несвежее, хранившееся в условиях повышенной влажности. Весы и разновесы. Часовые стекла. Колбы со стерильной водой (по 90 мл), колбы со стерильной водой (по 50 мл) и песком. Стерильные пипеткн Мора на 10 мл и на 1 мл. Стерильные чашки Петри. МПА в пробирках и колбах. Водяная баня, треножник. Микроскопы и все необходимое для микроскопирсвания.
АНАЛИЗ СИЛОСА
Молочнокислые бактерии, обитающие на растениях, играют большую роль при силосовании кормов. В основе силосования лежит молочнокислое брожение. Молочнокислые бактерии сбраживают сахара силосующихся растений в молочную и частично уксусную кислоту, которые подавляют развитие гнилостных, маслянокислых и других нежелательных бактерий, портящих корм. Молочнокислые бактерии снижают pH корма до 4,2-
Если кислотность силоса по тем или иным причинам уменьшается (pH становится выше 4,5-4,7), то создаются условия, благоприятствующие жизнедеятельности вредных для сохранности кЬрма микроорганизмов.
В нем накапливаются дурно пахнущая масляная кислота, амины, аммиак и другие продукты.
Для того чтобы обеспечить нормальное развитие молочнокислых бактерий в процессе силосования, необ-ходимо достаточное содержание сахара в силосующихся растениях и изоляция корма от доступа воздуха, т. е. создание анаэробных условий.
Плесневые грибы переносят сильное подкисление, но являются строгими аэробами, поэтому в хорошо спрессованном, укрытом, заквашенном корме размножаться не могут.
Если проследить за распадом сахара и образованием органических кислот в процессе силосования, то можно заметить, что с уменьшением сахара увеличивается количество органических кислот. Однако снижение pH зависит не только от количества молочной и уксусной кислот, но и от буферности растительного материала, которая, в свою очередь, зависит от белка, солей. Чем больше буферность растительной массы, тем больше нужно кислот, чтобы снизить pH корма, т. е. более буферный материал связывает, нейтрализует часть молочной кислоты (ионы водорода). Поэтому, несмотря на накопление кислоты, pH среды почти ие снижается до тех пор, пока не израсходован весь материал, обеспечивающий буферность. Связанные буферным материалом кислоты образуют в силосе-запас так называемых связанных кислот. Более буферное исходное сырье для получения силоса хорошего качества должно иметь больше сахаров, чем менее буферное. Таким образом, силосуемость растений определяется также специфическими буферными свойствами.
Буферность растительной массы определяют титро-" ванием растертой растительной массы 0,1 н. раствором молочной кислоты до pH 4,0. Выясняют, сколько потре-буется молочной кислоты для смещения pH до 4,0. Поскольку для образования молочной кислоты затрачивается примерно 60% сахаров корма, то, рассчитав 100%, определяют так называемый сахарный минимум для данного растительного сырья, т. е. наименьшее количество сахара, необходимое для образования такого количества молочной и уксусной кислот, чтобы сместить pHДо 4,0.
Растения хорошо силосуются, если в них много са-хара, а сахарный минимум небольшой. Если фактичес-
кое содержание сахара в растениях примерно равняет і ся сахарному минимуму, то они силосуются плохо и малейшее оФклонение в процессе силосования приведет к порче силоса. Если фактическое содержание сахара меньше- сахарного минимума, то такие растения ие силосуются.
При силосовании сохраняются цветки и листья, содержащие наибольшее количество питательных веществ. Потери сухих веществ при правильном силосовании не превышают 10-15%. Хороший силос характеризуется следующими показателями: цвет - оливково-зеленый
(лишь несколько изменяется), запах - приятный (моченых яблок, печеного хлеба), pH 4-4,2, общая кислотность 2-2,5% (в переводе на молочную кислоту), влажность- 70%. Микрофлора хорошего силоса представлена молочнокислыми палочками и молочнокислыми стрептококками, часто в небольших количествах встречаются дрожжи. Последние образуют эфиры, придающие силосу приятный запах и обогащающие корм белком и витаминами. Однако в больших количествах дрожжи ухудшают качество силоса - они снижают его кислотность, так как являются конкурентами с молочнокислыми бактериями в потреблении сахара.
В первый период после закладки силоса бурно развивается микрофлора смешанной фазы брожения, обычно представленная на поверхности здоровых растений: гнилостные бактерии (в основном неспорообразующие палочки), бактерии группы кишечной палочки, маслянокислые бактерии и др. При подкисЛении корма их сменяют молочнокислые стрептококки, а затем более кислотоустойчивые молочнокислые палочки. Через две недели (при снижении pH до 4,0 и ниже) микробиологические процессы в силосе в основном заканчиваются.
Для анализа из торцовой части траншеи, ям или наземных буртов берут среднюю пробу силоса. Для этого, сняв стерильным ножом верхний слой, вырезают кубики по средней линии бурта, с интервалом в 1 м. Их складывают в стерильную стеклянную банку емкостью 1-2 л с притертой пробкой так, чтобы силос был уложен плотно и доверху. Пробы перемешивают в стерильном кристаллизаторе, измельчают стерильными ножницами и берут навески для анализов.
Исследование рекомендуется проводить не позднее суток после взятия пробы.
Микроскопическое исследование микрофлоры силоса
Для знакомства с микрофлорой силоса из него гото> вят препарат следующим образом. Берут пинцетом силос и плотно прижимают его к предметному стеклу без добавления воды, стараясь, чтобы на стекле остался отпечаток. Препарат сушат на воздухе, фиксируют на пламени и окрашивают метиленовым синим (2-3 мин). Смыв краситель водопроводной водой и высушив вдали от пламени, микроскопируют с иммерсионной системой.
На препарате выявляются тонкие неспорообразующие палочки, варьирующие в размере (молочнокислые бактерии) и молочнокислые стрептококки. Среди них обычно преобладают Lactobacterium plantarum- го- моферментативные мезофильные" короткие палочки, часто располагающиеся параллельными рядами. Иногда встречаются клетки почкующихся дрожжей. Споровые формы бактерий наблюдаются редко. В плохом силосе выявляются спорообразующие палочки (маслянокислые бактерии, аэробные гнилостные бактерии), а также плесневые грибы.
Количественный учет микроорганизмов в силосе
Навеску силоса 5 г помещают в колбу с 50 мл стерильной водопроводной воды и 2-3 г песка. Колбу взбалтывают круговыми вращательными движениями в течение 10 мин. Из полученной вытяжки готовят последующие разведения (10-2; 10+ 10+ 10+ 10~6), а затем высевают из соответствующих разведений на элективные среды по 1 мл суспензии при глубинном посеве, по 0,05 мл суспензии при поверхностном посеве. Посевы выдерживают при температуре 28°С.
Определение количества молочнокислых бактерий проводят на сусло-агаре с мелом или капустном агаре с мелом (среды 1, 1а), а также на капустном агаре со спиртом и мелом (среда 2) - глубинный посев. Вокруг колоний молочнокислых бактерий вследствие накопления молочной кислоты образуются зоны растворения мела (рис. 37).
Подсчет колоний молочнокислых бактерий на сусло- агаре с мелом и капустном агаре с мелом проводят на
6-й день, а на капустном "агаре со спиртом и мелом- на 7-10-й день. Среда 2 необходима для выявления молочнокислых бактерий в составе эпифитной микрофлоры исходной растительной массы, так как спирт тормозит рост посторонней микрофлоры. Количество посторонней микрофлоры (аэробных гнилостных микроорганизмов) определяют глубинным посевом на пеп- тонном агаре (среда 3). Подсчет колоний ведется на 5-

Рис. 37. Зоны растворения мела вокруг колоний молочнокислых бактерий силоса.
7-й день.
Количество микроскопических грибов и дрожжей определяется на сусло-агаре со стрептомицином (среда 4) поверхностным посевом. Подсчет колоний ведется на 3-4-й день (при необходимости повторно на 7-8-й день).
Титр маслянокислых бактерий устанавливают на жидкой среде Емцева (среда 5а) и картофельной среде (среда 5). Для определения количества спор мясляно- кислых бактерий ведется посев из суспензии, после пастеризации в течение 10 мин при 75°С. Учет результатов анализа ведется по интенсивности выделения газа (кусочки картофеля всплывают на поверхность жидкости), и титр маслянокислых бактерий и их спор устанавливают методом предельных разведений по Мак- Креди.
Аэробные протеолитические бактерии учитывают на мясо-пептонном бульоне (среда 6) по накоплению газа в поплавках. Посевы выдерживают при 28°С в течение двух недель.
При анализе силосов из трав, выращенных по фону высоких доз азотных удобрений, проводится также учет денитрифицирующих бактерий на среде Гильтая (среда 7). Посевы выдерживают в течение 10-12 дней при 28°С. Подсчет денитрификаторов ведется по интенсивности выделения газа и изменению цвета индикатора.
При анализе силоса ведется также учет спор аэробных гнилостных бацилл. На плотной среде (среда 8)
делают поверхностный посев. Чашки инкубируют при 28°С, подсчет колоний проводят на 4-й день.
Бактерии группы кишечной палочки учитывают на среде Кесслера или Булира по выделению газа и накоплению его в поплавках. Пробирки выдерживают 48 ч при 40-42°С.
Состав элективных сред
Среда 1. Сусло-агар с мелом. Сусло, разбавленное до 3% по Еаллингу,- 1 л, агар - 20-25 г, стерильный мел - 30 г. Стерилизуют при 0,5 атм в течение 30 мин.
Среда 1а. Капустный агар с мелом. Капустный бульон - 900 мл, дрожжевой экстракт-100 мл, пептон-10 г, глюкоза - 20 г, ацетат натрия - 3,35 г, марганец сернокислый - 0,025 г, агар - 15-20 г.
Стерильный мел добавляют в колбы из расчета 5 г на 200 мл среды. Стерилизуют при 0,5 атм в течение 30 мин.
Среда 2. Капустный агар со спиртом и мелом. В расплавленную н охлажденную до 50° С среду прибавляют 20 мл этилового спирта (96%-ного) на 200 мл среды, тщательно взбалтывают и заливают в чашки Петри с посевным материалом.
Среда 3. Пептонный агар. . Пептон - 5 г, К2НРО4 - 1 г, . КН2РО4 - 0,5 г, MgSOi - 0,5 г, NaCl - следы, водопроводная вода - 1 л, агар, хорошо промытый, - 15-20 г. Стерилизуют при 1 атм в течение 20 мин.
Среда 4. Сусло-агар со стрептомицином. Сусло, разбавленное до 3% по Баллингу,- 1 л, агар - 25 г. Стерилизуют при 0,5 атм в течение 30 мин. Перед разливкой среды в чашки Петри в сусло-агао добавляют 80-100 ед. стрептомицина на каждый миллилитр среды.
Среда 4а. Подкисленный сусло-агар. Сусло, разбавленное до 3% по Баллингу,- 1 л, агар - 20-25 г. Стерилизуют при 0,5 атм в течение 30 мин. Перед разливом среды в чашки Петри в расплавленный сусло-агар добавляют 2 мл молочной кислоты (на 1 л среды), прокипяченной в течение 10 мин иа водяной бане.
Среда 5. Картофельная среда с мелом. В пробирки вносят стерильный мел (на кончике скальпеля), 8-10 картофельных кубиков величиной 2-3 мм заливают водопроводной водой до s/4объема- пробирок. Стерилизуют при 1 атм в течение 30 мин.
Среда 5а. Картофельный крахмал - 20 г, пептон - 5 г, дрожжевой автолизат - 0,2 мг/л, КН2Р04- 0,5 г, К2НРО4 - 0,5 г, MgSC>4- 0,5 г, NaCl - 0,5 г, FeS04- 0,01 г, MnS04- 0;01 г, СаС03- 10 г, смесь микроэлементов no М. В. Федорову-1 мл, дистиллированная вода--1 л, тногликолевая кислота - 0,05%, нейтральрот - 0,004%) pH 7,4-7,5. Стерилизация среды осуществляется при- 0,5 атм в течение 30 мин. Температура инкубации посевов 30-35° С.
Среда 6. Мясо-пептонный бульон. Пептон - 10 г, NaCl - 4 г, мясной бульон - 1л. Наливают в пробирки с поплавками до 3/« объема. Стерилизуют при 1 атм в течение 20 мин.
Среда 7. Среда Гильтая (видоизмененная). Лимоннокислый нат-рий-2 г, KNO3- 1 г, КН2Р04- 1 г, К2НР04- 1 г, MgS04 -
1 г, СаС12 - 0,2 г, FeCl3- следы, дистиллированная вода - 1 л,
1 %-йьгй раствор бромтимолблау (pH 6,8-7,0). Стерилизуют прн 1 атм в течение 20 мин.
Среда 8. Мясо-пептонный агар и сусло-агар 1: 1. Стерилизуют при. 0,5 атм в течение 30 мин.
Среда 9. Среда Кесслера. К 1 л водопроводной воды прибавляют 50 мл свежей бычьей желчи и 10 г пептона. Смесь кипятят 15 мин на водяной баие, взбалтывают. Когда пептои растворится, фильтруют через вату, затем прибавляют 10 г лактозы. После растворения лактозы устанавливают слабощелочную реакцию (pH 7,6) и добавляют 4 мл 1%-ного водного раствора генциана фиолетового из расчета 1 г сухой краски на 25 л среды. Жидкость разливают в пробирки с поплавками"и стерилизуют при 1 атм в течение 15 мии.
Среда 10. Среда Булира. Кіл мясо-пептонного бульона добавляют 12,5 г маннита и 6 мл 1%-ного раствора нейтральрота. Среду разливают в пробирки с поплавками и стерилизуют при 0,5 атм в течение 30 мин. Среда имеет вишневый цвет, при развитии кишечной палочки становится оранжевой и в поплавке скапливается газ.
Доминирующие на плотных средах колонии микроскопируют. Для обнаружения маслянокислых бактерий из пробирок с картофелем готовят препарат в раздавленной капле с добавлением раствора Люголя.
Определение кислотности
Определение общей кислотности в силосе. Берут навеску силоса 20 г и помещают в коническую колбу с обратным холодильником емкостью 500 мл. Содержимое колбы заливают 200 мл дистиллированной воды, тща-тельно перемешивают и нагревают в течение 1 ч. После охлаждения содержимое колбы фильтруют через бумажный фильтр и 10 мл фильтрата (с двойным количеством дистиллированной воды) оттитровывают 0,1 н. раствором едкого натра в присутствии фенолфталеина до появления устойчивой слабо-розовой окраски.
Общее содержание кислоты в силосе в переводе на молочную выражают в процентах. 1 мл 0,1 н. раствора NaOH соответствует 0,009 г молочной кислоты. Умножив количество 0,1 н. NaOH, израсходованного на титрование экстракта из 100-г силоса, на 0,009, находят количество кислоты в силосе(%).
Пример расчета. На титрование 10 мл вытяжки израсходовано 1,7 мл 0,1 н. NaOH, следовательно, на 200 мл пойдет 34 мл 0,1 н. NaOH.
200 мл вытяжки получены из 20 г силоса, а для нейтрализации 100 г силоса будет израсходовано X мл 0,1 н. NaOH:
100.34
Х= --¦ =170 мл 0,1 и. NaOH.
Умножив 170 на 0,009, получим содержание молочной кислоты в процентах:
170 X0,009=1,53%
Достаточно точные результаты получаются и в том случае, если определение кислотности ведут следующим образом. Берут навеску силоса 5 г, растирают в ступке и помещают в широкую пробирку (диаметром 2-
см). Содержимое заливают 50 мл дистиллированной воды, закрывают резиновой пробкой и тщательно перемешивают. Навеску силоса настаивают при 10-12°С в:‘ течение 30 мин, а затем определяют кислотность вытяжки титрованием. 10 мл вытяжки (с двойным количеством дистиллированной воды) оттитровывают 0,1 и. раствором едкого натра в присутствии фенолфталеина до появления устойчивой слабо-розовой окраски.
Пример расчета. На титрование 10 мл вытяжки израсходовано 1,7 мл 0,1 н. NaOH, следовательно, на 50 мл вытяжки-
мл; 50 мл вытяжки получены из 5 г силоса, а для нейтрализации 100 г силоса будет израсходовано X мл 0,1 н. NaOH:
100.8,5
Х=L = 170 мл 0,1 н. NaOH;
5
170 X0,009 = 1,53% молочной кислоты.
Определение pH в силосе. Приготовление вытяжки силоса для определения в нем pH проводят так же, как для определения общей кислотности в силосе. pH нахо-дят с помощью индикаторов или электрометрического определения. При использовании индикаторов поступают следующим образом. В фарфоровую чашку берут 2 мл вытяжки силоса и добавляют 2 капли индикатора (смесь равных объемов бромтимолблау и метилрота). Сравнивая цвет содержимого чашки с данными, приведенными ниже, определяют концентрацию водородных ионов. Цвет индикатора pH Красный 4,2 и ниже Красно-оранжевый 4,2-4,6 Оранжевый 4,6-5,2 Желтый 5,2-6,1 Желто-зеленый 6,1-6,4 Зеленый 6,4-7,2 Зелено-синий 7,2-7,6 Материалы и оборудование. Весы и разновесы, конические колбы емкостью 500 мл с обратным холодильником, широкие пробирки, треножник с асбестовыми сетками, колбы емкостью 100 мл и 250 мл, воронки, бумажные фильтры, пипетки на 10 мл и 2 мл, фарфоровые чашки, пинцеты; индикаторы: смесь равных объемов бромтимолблау и метилрота, фенолфталеин, метиленовый синий, раствор Люголя (1:2).
Питательные среды, стерильные чашки Петри, стерильные пипетки на 1 мл, стерильная водопроводная вода в пробирках по 9 мл и в колбах - по 50 мл. Чашки и пробирки с посевами. Микроскоп и все необходимое для микроскопирования.
ДРОЖЖЕВАНИЕ КОРМА
Дрожжи содержат много легкопереваримого белка, богаты эргостерином, легко переходящим в витамин D, витаминами А, В, Е; энергично размножаются, неприхотливы к среде обитания, их можно легко выращивать на отходах сельского хозяйства и промышленности. Кормовые дрожжи в настоящее время готовят в больших количествах, размножая их на производственных отходах, в том числе растительных гидролизатах (солома, древесные отходы и т. д.). Сейчас найдены дрожжи (Candida),хорошо размножающиеся на углеводородах. Это дает возможность готовить дешевые кормовые дрожжи на отходах нефтяной промышленности. Помимо добавления в кормовой рацион сухих дрожжей, применяют дрожжевание корма. Для этого в измельченную и увлажненную растительную массу вносят культуру дрожжей. Периодически перемешивают. Дрожжи обильно размножаются в корме, что обычно совпадает с его подкислением. Однако накопление кислот объяс-няется развитием молочнокислых бактерий, всегда обитающих на растительной массе. Для активного размножения дрожжей в кормах необходим ряд условий: хорошо подготовленная питательная среда (измельчен- ность, влажность, температура 25-27°С, достаточная аэрация, pH среды 3,8-4,2). Дрожжевать можно лишь корма, богатые моно- и дисахаридами. В противном случае дрожжи и молочнокислые бактерии развиваться не будут. Помимо концентратов, дрожжеванию подвергают сочные корма, к которым примешивают грубые корма.
При дрожжевании концентрированных кормов теряется 5-6% сухих веществ. Эти потери падают главным образом на углеводы, сбраживаемые дрожжами.
При дрожжевании кормов представляет интерес воз-можность обогащения корма белком за счет вносимого минерального азота. Дрожжи, потребляя соли аммония, обогащают субстрат белком на 13-17% (в расчете на сухое вещество). Дрожжевание делает корм приятнокислым, обогащает его витаминами, возбуждает у животных аппетит, устраняет многие заболевания (паратифозные инфекции, рахит молодняка, поражения кожи и другие болезни), благоприятно влияет на продукцию молока у коров, яйценоскость птицы, увеличение приве- са у животных. |
В лабораторной практике дрожжевание корма мож- * но провести на свекле, которую предварительно наре- зают мелкими кусочками, или на отрубях. Корм вносят в тарированный химический стакан емкостью 100 мл со стеклянной палочкой, увлажняют в случае отрубей до консистенции густой сметаны. Стаканы с кормом взвешивают. Масса увлажненного корма должна быть около 100 г. В качестве закваски используют однодневную разводку пекарских дрожжей на сусле в количест-¦ ве 5% (на 100 г корма вносят 5 мл суспензии дрожжей).
Корм тщательно перемешивают стеклянной палочкой, стакан накрывают бумажной этикеткой, на которой записывают тару стакана и массу увлажненного корма" (без закваски).
Дрожжеванные корма оставляют при комнатной тем-пературе, перемешивая содержимое стакана несколько раз в день.
Через 1-2 дня определяют количество дрожжевых ‘ клеток в корме.
Учет дрожжевых клеток в суспензии дрожжей (закваске)
" методом прямого их счета под микроскопом
Берут петлей определенное количество дрожжевой закваски (1 петля захватывает 0,01 мл), наносят на предметное стекло, добавляют столько же молока и размазывают на определенной площади (4 см2). Препарат сушат на воздухе, осторожно фиксируют на пламени и окрашивают метиленовым синим в течение 10 мин.
Под микроскопом с иммерсионной системой подсчитывают количество дрожжевых клеток (в 10 ПОЛЯХ
зрения). Количество дрожжевых клеток в 1 мл закваски определяют по формуле:
S
-А. 100,
Si
гдеА - среднее количество дрожжевых клеток в одном поле зрения;
S- площадь квадрата (4 с.м2);
Si- площадь поля зрения,
Si=jrr2,
где г - радиус объектива, определяемый с помощью объектного микрометра. На объектный микрометр наносят каплю кедрового масла н с иммерсионной системой определяют иа линейке объектного микрометра радиус объектива.
Если г объектива « 0,08 мм, то
S,=3,14.0,0064=0,02 мм2,
S 400 мм2
=20000.
Si 0,02 мм2
Учет дрожжевых клеток в дрсжжеванном корме
Через 1-2 дня стаканы с дрожжеванным кормом взвешивают. Вследствие сбраживания сахара и испарения воды масса корма становится меньше. Берут среднюю пробу в количестве 10 г, вносят в колбу, содержащую 100 мл стерильной водопроводной воды, и взбалтывают в течение 5 мин. Затем на определенной площади предметного стекла (4 см2) размазывают определенный объем суспензии (0,01" мл-1 петля) и добавляют 0,01 мл молока. Препарат подсушивают на воздухе, фиксируют осторожно на пламени, красят метиленовым синим в течение 10 мин. Подсчитывают количество дрожжевых клеток в одном поле зрения (10 полей зрения).
Среднее количество клеток в одном поле зрения умножают на 20 000, на 100 и 10, получают количество клеток в 1 г корма. Затем эту цифру умножают на массу корма и определяют число дрожжей во всем корме.
Чтобы узнать, во сколько раз увеличилось количество дрожжей в процессе дрожжевания корма, надо разделить их число на первоначальное количество дрожжевых клеток, содержащихся в закваске. Корм считается хорошим, если в одном поле зрения встречается не более 10 посторонних бактериальных клеток (не дрожжей).
Материалы и оборудование. Весы н разновесы, стаканы на 100 мл со стеклянными палочками, свекла, отруби, суспензия дрожжей, градуированные пипетки на 5-10 мл, петли, молоко в пробирках, предметные стекла с квадратом 4 см2 из миллиметровой бумаги, объектный микрометр, индикатор метиленовый синий, стаканы с дрожжеванным кормом. Микроскоп и все необходимое для микроско- пирования.

Занятие 4 МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ КОРМОВ

Цель занятия. Ознакомиться с методами санитарно-микробиологического анализа кормов.

Материалы и оборудование. Лабораторные весы; термостат; шуттель-аппарат; эксикатор; стерильные пробирки; пипетки; чашки Петри; фарфоровые ступки; ватно-марлевые фильтры; питательные среды (мясо-пептонные бульон, агар, желатин, лептонная вода, висмут-сульфит-агар, селенитовый бульон, магниевая среда, среды с мочевиной, глюкозой и сернокислым железом, углеводами и индикатором Андраде в сочетании с тимоловым синим, цитратноаммонийная среда, мясо-пептонный желатин, среды Вильсона- Блера, Киллиана, Китта-Тароцци, Кларка, Левина, Плоскирева, Ресселя, Эндо, Эйкмана, кровяной агар по Цейслеру, бульон Хот- тингера, молоко, печеночный бульон); физиологический раствор; индикаторные бумажки; лабораторные животные (белые мыши, морские свинки).

Общие сведения. От каждой партии корма отбирают две средние пробы массой не менее 500 г. Одну направляют в лабораторию, другую сохраняют в хозяйстве до окончания исследования. Для упаковки проб используют стерильную пластмассовую или стеклянную тару.

В пробах корма определяют общую микробную обсемененность, содержание сальмонелл, энтеропатогенных типов кишечной палочки, анаэробов.

Содержание занятия. Определение микробной обсемененности. В стерильную пробирку помещают 1 г корма, взятого из средней пробы, добавляют 9 мл физиологического раствора и тщательно встряхивают (получают разведение 1: 10). Из взвеси готовят последующие разведения (1: 100, 1: 1000, 1: 10 000 и т. д.). После осаждения взвешенных частиц для посевов берут жидкость из верхнего слоя.

Для количественного учета микробов в стерильные чашки Петри вносят по 1 мл из пробирок с разным разведением и доливают 10- 15 мл стерильного, расплавленного и охлажденного до температуры 44-45 °С мясо-пептонного агара (МПА). Осторожно покачивая чашки, засеянный материал равномерно распределяют в агаре. После застывания среды чашки помещают (вверх дном) в термостат при температуре 37 "С на 24-48 ч. После этого подсчитывают выросшие колонии. Полученные результаты умножают на степень разведения, суммируют и определяют количество микробов в 1 г корма.

Пример расчета. В первой чашке обнаружено 200 колоний, во второй - 21, в третьей - 1. В эти чашки посевной материал брали из пробирок с разведениями соответственно 1: 10 000,1:100 000,1:1000 000. Следовательно, в 1 г корма будет содержаться

Микробную обремененность мясо-костной муки можно определить экспресс-методом с применением резазурина. Для этого в одну стерильную пробирку помещают 1 г средней пробы мясо-костной муки, добавляют 10 мл мясо-пептонного бульона (МПБ) и встряхивают, а вдругую пробирку (для контроля) вносят только 10 мл МПБ. Пробирки помещают в термостат при 40 "С на 3 ч. После этого в них добавляют по 1 мл 0,01%-ного раствора резазурина и вновь выдерживают в термостате в течение 2 ч.

Результаты реакций учитывают через каждые 30 мин. По восстановлению резазурина (изменению окраски из синей в розовую) определяют общую микробную обсемененность мясо-костной муки. Если в пробирке с мясо-костной мукой розовое окрашивание наступает позднее чем через 2 ч, то это говорит о том, что в 1 г продукта содержится до 500 тыс. микробов, а при окрашивании в розовый цвет до 2ч - более 500 тыс. микробов.

Контролем служит пробирка с 10 мл МПБ и 1 мл 0,01 %-ного раствора резазурина, выдержанная в термостате при том же температурном режиме и экспозиции и без изменения цвета содержимого.

Исследование на сальмонелл ы. Для анализа берут 50- 200 г исследуемого корма, измельчают его в стерильной фарфоровой ступке и переносят в колбу со средой предварительного обогащения (пептонная вода, МПБ с содержанием 5 % маннита) при соотношении материала и среды 1:5. Содержимое колбы тщательно перемешивают и помещают в термостат при температуре 37 °С. Через 16-18 ч материал высевают в чашки Петри на твердые дифференциально-диагностические среды (висмут-сульфит-агар, среда Плоскирева или Левина) и на две основные среды обогащения (селенитовый бульон, среда Киллиана в соотношении 1:1).

После 16-18 ч выдержки в термостате при 37 °С из сред обогащения делают вторично посевы в чашки с висмут-сульфит-агаром и в чашки со средами Плоскирева и Левина (по выбору) и ставят их в термостат при 37 °С.

Чашки просматривают через 16-24 и 48 ч.

На висмут-сульфит-агаре S. typhi и S.paratyphi А растут в виде мелких, нежных, серовато-зеленых колоний с черным центром, S. cholerae suis - в виде зеленых колоний. Колонии всех других сальмонелл значительно крупнее, темно-коричневого цвета, с металлическим блеском, окруженные светлым ореолом, участок среды под колонией черный. На среде Плоскирева вырастают прозрачные или нежно-розовые колонии, на среде Левина - прозрачные, бледные, нежно-розовые или розовато-фиолетовые.

В случае обнаружения колоний, похожих на сальмонеллы, 3-5 из них высевают на комбинированную среду Ресселя или скошенный агар с мочевиной и бульон Хотгингера для определения индола и сероводорода (под пробирки с бульоном подкладывают специальные индикаторные бумажки). Для определения подвижности культуры делают посев уколом в полужидкий агар (0,3-0,5%-ный).

На среду Ресселя и скошенный агар посевы делают сначала штрихом на скошенной поверхности, а затем уколом в глубину столбика. Если разлагается мочевина в скошенном агаре, то окраска среды меняется на оранжевую при индикаторе BP и на коричнево-фиолетовую при индикаторе тимоловый синий в сочетании с индикато-ром Андраде.

Морфологию культуры изучают в мазках, окрашенных по Граму, и подвижность - в висячей или раздавленной капле или полужидком агаре. Культуры, представляющие грамотрицательные подвижные палочки, ферментирующие глюкозу с образованием газа, не ферментирующие лактозу и сахарозу, не разлагающие мочевину и не образующие индол, исследуют серологически - испытывают в реакции агглютинации (РА) на предметном стекле с набором агглютинирующей адсорбированной поливалентной сальмонеллезной О-сыворотки (группы, А, В, С, D, Е).

Для РА с О-сыворотками культуру следует брать из верхней части скошенного агара, а для агглютинации с Н-сыворотками - из нижней части (конденсационной воды), где микробы наиболее подвижны. По групповой О-сыворотке устанавливают принадлежность культур к той или иной серологической группе.

Исследования на энтеропатогенные типы кишечной палочки. 50 г корма помещают в колбу, содержащую 500 мл стерильного физиологического раствора, встряхивают на шуггель-аппарате в течение 20 мин. Из полученной взвеси стерильными пипетками готовят разведения 1: 100, 1: 1000, 1: 10 000, 1: 100 000, 1: 1 000 000. По 1 мл каждого разведения вносят в пробирки со средой Эйкмана. Посевы помешают в термостат при температуре 43 °С. Через 24 ч учитывают рост по помутнению среды и образованию газа. Титр кишечной палочки устанавливают по наи-большему разведению, в котором еще наблюдался ее рост.

Из пробирок, где наблюдается рост микробов, производят посев на плотные дифференциальные среды (Эндо, Левина, Плоскирева), разделенные на секторы для каждого разведения.

Типичные колонии Е. coli круглой формы, гладкие, выпуклые или слегка приподнятые в центре с ровными краями розового, красного или малинового цвета, с металлическим блеском или без него на среде Эндо или черного цвета на среде Левина.

Выросшие изолированные колонии S-формы (не менее 4) пересевают на МПБ, выдерживают в термостате при температуре 37 °С в течение 16-24 ч. После этого одну часть пробирок используют для приготовления мазков, посевов на дифференциальные диагностические среды, заражения мышей; вторую - для приготовления автоклавированного антигена, если кипяченый антиген не будет агглютинироваться поливалентными (комплексными) коли-сыворотками.

У выделенных культур определяют морфологические и культу-рально-биохимические свойства для установления их родовой принадлежности. Морфологию бактерий изучают в мазках, окрашенных по Граму, их подвижность определяют по характеру роста в 0,3%-ном полужидком МПА.

Для определения культурально-биохимических свойств бактерий используют набор питательных сред (с углеводами и индикатором Андраде, цитратно-аммонийную, мясо-пептонный желатин, МПБ или бульон Хоттингера и агар с глюкозой и сернокислым железом).

Патогенные свойства кишечной палочки определяют путем постановки биологической пробы на белых мышах. Для этого трем мышам массой 14-16 г внутрибрюшинно вводят смывы с суточных агаровых культур в дозе 500 млн микробов. Культуру признают патогенной в случае гибели одной или более мышей в первые 4 сут после заражения.

Исследования на анаэ р об ы. 50 г корма растирают в стерильной ступке, разводят физиологическим раствором и засевают в несколько пробирок со средой Китга-Тароцци, Вильсона-Блера, молоком и в две чашки со средами и кровяным агаром по Цейслеру. Для уничтожения вегетативных форм микробов по одной пробирке с жидкими средами нагревают при температуре 80 °С в течение 20 мин. Посевы помещают в термостат при температуре 37 °С. Чашки должны находиться в специальных аппаратах для анаэробных культур или в эксикаторе, куда заранее вносят тот или иной погло-титель кислорода.

Результаты посевов регистрируют в тот же день. Почернение среды Вильсона-Блера в течение 1 -3 ч после посева, свертывание молока с образованием ноздревато-губчатого сгустка и прозрачной сыворотки в течение 6 ч, а также быстрое начало роста на среде Китта-Тароцци (через 4-5 ч) при обильном газообразовании - характерные признаки присутствия возбудителей Cl. perfringens.

Рост CI. botulinum, наблюдаемый обычно на 2-3 сут, характеризуется помутнением среды Китта-Тароцци, образованием осадка и появлением запаха прогорклого масла.

При обнаружении роста на среде Китта-Тароцци проводят микроскопическое исследование и выделение чистой культуры посевом в 2-3 чашки с кровяным агаром по Цейслеру. Последние выдерживают в анаэробных условиях при температуре 37 °С в течение 24- 48 ч, после чего просматривают рост в чашках и отбирают культуры, которые классифицируют по морфологическим и биохимическим свойствам.

Биологическую пробу ставят на морских свинках или белых мышах, вводя внутрибрюшинно бульонную культуру. При положительном результате подопытные животные погибают через 12-48 ч.

Для идентификации отдельных возбудителей или типов одного вида проводят опыт нейтрализации токсина со специальной сывороткой. Для этого минимальную смертельную дозу культуры в смеси с 0,2-0,5 мл соответствующей типоспецифической сыворотки выдер-живают в термостате 45 мин и вводят мышам внутрибрюшинно. Для контроля испытуемую культуру или фильтрат применяют без сыворотки. Вид и тип микроба определяют по выживаемости мышей.

При исследовании кормов на ботулизм (наличие токсинов) в качестве подопытных животных используют белых мышей. При этом могут быть применены два способа:

а) нейтрализация токсина противоботулиновой сывороткой (антитоксином). Корм предварительно растирают в стерильной ступке, добавляют физиологический раствор (1: 4) и настаивают в течение 1 -2 ч при комнатной температуре. После этого настой центрифугируют и фильтруют через ватно-марлевый фильтр. КО,5 мл фильтрата добавляют 0,2 мл поливалентной противоботулиновой сыворотки. Смесь выдерживают 1 ч при комнатной температуре, затем одному животному вводят подкожно 0,5 мл фильтрата, другому - смесь фильтрата с сывороткой в той же дозе.

Аналогичные испытания могут быть проведены чистой культурой, выращенной (в течение 6-7сут) на печеночном бульоне. В этом случае пастеровской пипеткой отсасывают верхний слой культуры и пропускают через ватно-марлевый фильтр. Далее поступают, как указано выше;

б) разрушение токсина кипячением фильтрата. Фильтрат готовят, как указано в подпункте «а». Одну половину фильтрата кипятят в течение 30 мин. Затем одному животному внутрибрюшинно вводят 0,5-1 мл некипяченого фильтрата, другому - такую же дозу кипяченого.

Положительным результатом биологической пробы по первому и второму способам считают гибель мышей, наступившую как от фильтрата, не обработанного противоботулиновой сывороткой, так и от некипяченого фильтрата.

Введение

Широкое распространение микроорганизмов свидетельствует об их огромной роли в природе. При их участии происходит разложение различных органических веществ в почве, водоемах, они обуславливают круговорот веществ и энергии в природе. От их деятельности зависит плодородие почв, формирование каменного угля, нефти, других полезных ископаемых. При их активном участии постоянно осуществляется два противоположных процесса: синтез из минеральных веществ сложных органических соединений, и, наоборот, разложение органических веществ до минеральных. Единство этих противоположных процессов лежит в основе биологической роли микроорганизмов в круговороте веществ в природе. Многие микроорганизмы используются в промышленности и сельскохозяйственном производстве.

Особенно важно использование микроорганизмов в растениеводстве и животноводстве. От них зависит правильное приготовление и хранение кормов, создание кормового белка.

Микробиология приготовления обыкновенного сена.

Наиболее распространенный способ консервирования зеленой массы и других кормов — сушка. Сено готовят из скошенных трав, имеющих влажность 70-80%. Сушку сена проводят по-разному — в прокосах, валках, в копнах, на вешалах и т. д. Даже при сухой погоде и быстро протекающей сушке некоторые потери питательных веществ в корме неизбежны, так как в растительной массе продолжают идти дыхание и другие ферментативные процессы. В случае более или менее затяжной сушки роль отмеченных процессов сильно возрастает, и это, в свою очередь, ведет к увеличению потерь, которые во многом связаны с размножающимися на влажной растительной массе микроорганизмами. Для ограничения потерь питательных веществ стремятся использовать искусственную досушку сена, применяя принудительное вентилирование атмосферным или подогретым воздухом.

При сушке кормов количество жизнедеятельных микроорганизмов в них постепенно уменьшается. Тем не менее, на доброкачественном корме растительного происхождения всегда можно найти большее или меньшее количество микробных клеток, свойственных эпифитной микрофлоре, а также других микроорганизмов, попадающих сюда из почвы и воздуха. Они находятся в анабиотическом состоянии, так как в такой среде нет условий для их размножения.

При увлажнении хранящегося корма в нем бурно начинают протекать микробиологические процессы и одновременно повышается температура. Этот процесс характеризуется повышением температуры сначала до 40-50%, и через 4-5 дней она повышается до 70-80%. Это явление, получившее название саморазогревания (термогенез), связано с жизнедеятельностью микрофлоры.

Микроорганизмы используют для синтетических целей не более 5—10% энергии потребленных ими питательных веществ. Остальная энергия выделяется в окружающую среду главным образом в виде тепла. Таким образом, термогенез зависит в основном от неполной утилизации микроорганизмами энергии, выделяющейся при осуществлении ими биохимических процессов.

Явление термогенеза становится осязаемым лишь в условиях затрудненной теплоотдачи. В противном случае тепло рассеивается из среды, где размножаются микроорганизмы, без заметного разогревания субстрата. Поэтому в практике отмечается разогревание лишь значительных скоплений различных материалов, то есть таких масс, в которых может происходить аккумуляция тепла.

При самонагревании растительной массы наблюдается четко выраженная смена микрофлоры. Сначала в разогревающейся массе размножаются мезофильные микроорганизмы. С повышением температуры на смену им приходят термофилы, которые способствуют повышению температуры органических веществ, так как обладают исключительной скоростью размножения.

Сильное разогревание достаточно сухой и пористой массы может вызвать ее обугливание и образование горючих газов — метана и водорода, которые адсорбируются на пористой поверхности обуглившихся растительных частиц, вследствие чего может произойти самовоспламенение. Весьма вероятно, что роль катализатора при воспламенении играют соединения железа. Воспламенение происходит лишь в присутствии воздуха и только если масса недостаточно уплотнена. В ветреную погоду случаи самовоспламенения учащаются.

Термогенез причиняет существенный вред. Он вызывает порчу сена. Однако при умеренном развитии самонагревания термогенез может быть желательным. Например, «самопрелая» солома в результате разогревания лучше поедается скотом. Явление термогенеза используют для приготовления, так называемого, бурого сена. Его готовят в местностях, где вследствие климатических условий затруднена сушка сена. При этом для просушивания корма используют не солнечную энергию, а тепло, выделяющееся в результате жизнедеятельности микроорганизмов, обитающих в растительной массе.

В высушенных кормах микроорганизмы находятся в анабиотическом состоянии. При увлажнении корма они начинают размножаться и вызывают его порчу.

Силосование кормов

Силосование (заквашивание) — способ консервирования зеленого корма, при котором растительная масса сохраняется во влажном состоянии в ямах, траншеях или специальных сооружениях — силосных башнях. Корм, более или менее спрессованный и изолированный от доступа воздуха, подвергается брожению. Он приобретает кислый вкус, становится мягче, несколько изменяет цвет (приобретает бурую окраску), но остается сочным.

Силосование имеет ряд преимуществ по сравнению с другими способами консервирования корма: можно силосовать в любую погоду, такой корм можно хранить длительное время (иногда десятилетиями).

существует два способа силосования кормов: холодный и горячий.

Холодный способ силосования назван так потому, что во время созревания силоса в нем происходит умеренное повышение температуры, доходящее в некоторых слоях корма до 40°С, оптимальной температурой считается 25—35°С.

При таком силосовании скошенную растительную массу, если нужно, измельчают, укладывают до отказа в кормовместилище, утрамбовывают, а сверху как можно плотнее укрывают для изоляции от воздействия воздуха.

При горячем способе силосное сооружение наполняют по частям. Зеленую массу на 1—2 дня рыхло укладывают слоем около 1 —1,5 м. При большом количестве воздуха в ней развиваются энергичные микробиологические и ферментативные процессы, в результате чего температура корма поднимается до 45—50°С. Затем укладывают второй слой такой же толщины, как и первый, и он, в свою очередь, подвергается разогреванию. Растения же, находящиеся внизу и размягченные под влиянием высокой температуры, спрессовываются под тяжестью нового слоя корма. Это вызывает удаление воздуха из нижнего слоя силоса, отчего аэробные процессы в нем прекращаются, и температура начинает снижаться. Так слой за слоем заполняют все силосохранилище. Самый верхний слой корма утрамбовывают и плотно прикрывают для защиты от воздуха. В связи с тем, что силосохранилище при горячем способе силосования обычно делают небольших размеров, на верхний слой силосуемого корма помещают определенный груз.

Разогревание растительной массы связано с потерей (иногда значительной) части питательных веществ корма. В частности, резко уменьшается переваримость его белков. Поэтому горячее силосование не может считаться рациональным способом сохранения растительной массы.

Холодный способ силосования наиболее распространен. Это объясняется как сравнительной его простотой, так и хорошим качеством получающегося корма. Горячий способ силосования признан допустимым лишь для квашений грубостебельных, малоценных кормов, так как разогревание улучшает их поедаемость.

Силосование связано с накоплением в корме кислот, образующихся в результате сбраживания микробами - кислотообразователями содержащихся в растениях сахаристых веществ. Основную роль в процессе силосования играют молочнокислые бактерии, продуцирующие из углеводов (в основном из моно- и дисахаридов) молочную и частично уксусную кислоты. Эти кислоты имеют приятные вкусовые свойства, хорошо усваиваются организмом животного и возбуждают у него аппетит. Молочнокислые бактерии снижают рН корма до 4,2—4 и ниже.

Накопление молочной и уксусной кислот в силосе обусловливает его сохранность потому, что гнилостные и прочие нежелательные для силосования бактерии не могут размножаться в среде с кислой реакцией (ниже 4,5—4,7). Сами же молочнокислые бактерии относительно устойчивы к кислотам. Переносящие сильное подкисление плесневые грибы относятся к строгим аэробам и в хорошо укрытом заквашиваемом корме размножаться не могут.

Таким образом, герметизация и кислотность силоса — главнейшие факторы, определяющие его стойкость при хранении. Если по тем или иным причинам кислотность корма уменьшается, то это неминуемо ведет к его порче, так как создаются условия, благоприятные для вредных микробов.

Для нормального силосования различных кормов требуется неодинаковое подкисление. Иногда 0,5% молочной кислоты снижает значение рН корма до 4,2, то есть до показателя, свойственного хорошему силосу. В других случаях для этого требуется 2% той же кислоты. Такое колебание зависит от различного проявления буферных свойств у некоторых составных частей растительного сока. Механизм действия буферов заключается в том, что в их присутствии значительная часть ионов водорода нейтрализуется. Поэтому, несмотря на накопление кислоты, рН среды почти не снижается до тех пор, пока не израсходован весь буфер. В силосе образуется запас так называемых связанных буферами кислот. Роль буферов могут играть различные соли и некоторые органические вещества (например, протеины), входящие в состав растительного сока. Более буферный корм для получения хорошего силоса должен иметь больше сахаров, чем менее буферный. Следовательно, силосуемость растений определяется не только богатством их сахарами, но и специфическими буферными свойствами. Основываясь на буферности сока растений, можно теоретически вычислить нормы сахара, необходимые для успешного силосования различного растительного сырья.

Буферность сока растений находится в прямой зависимости от количества в них белков. Поэтому большинство бобовых растений трудно силосуется, так как в них относительно мало сахара (3—6%) и много белка (20—40%). Прекрасная силосная культура— кукуруза. В стеблях и початках ее содержится 8—10% белка и около 12% сахара. Хорошо силосуется подсолнечник, в котором хотя и много белка (около 20%), но содержится достаточно углеводов (более 20%). Приведенные показатели рассчитаны на сухое вещество.

Зная буферность корма и его химический состав, можно решить вопрос о силосуемости того или иного растения. В основном силосуемость связывают с запасом моно- и дисахаридов, дающих необходимое подкисление определенного корма. Минимальное их содержание для доведения значения рН корма до 4,2 может быть названо сахарным минимумом. По данным А. А. Зубрилина, если корм содержит больше сахара, чем показывает вычисленный сахарный минимум, то он будет хорошо силосоваться.

Технически определить сахарный минимум несложно. Титрованием устанавливают необходимое количество кислот для подкисления пробы исследуемого корма до рН = 4,2. Затем определяют количество простых сахаров в корме. Допуская, что около 60% сахаров корма превращается в молочную кислоту, нетрудно рассчитать, хватает ли имеющегося сахара для должного подкисления корма.

Для улучшения силосуемости кормов, в которых мало углеводов, их смешивают с кормами, содержащими много сахара. Можно также улучшить состав силосуемого корма, добавив к нему по определенному расчету патоку-мелассу.

В некоторых кормах бывает слишком много углеводов. При силосовании таких кормов возникает избыточная кислотность (явление перекисления силоса). Слишком кислый корм животные неохотно поедают. Для борьбы с перекислением силоса корма, содержащие много сахара, смешивают с кормами, в которых мало углеводов. Кислый корм может быть нейтрализован добавкой СаСО 3 .

В процессе квашения некоторая часть белка превращается в аминокислоты. На основании экспериментальных данных в настоящее время считают, что подобная трансформация в основном связана с деятельностью ферментов растительных тканей, а не бактерий.

Поскольку аминокислоты хорошо усваиваются организмом животных, частичный перевод протеинов в аминокислоты не должен сказываться на уменьшении кормовых достоинств силосуемой массы. Глубокого распада белка с образованием аммиака в хорошем силосе не бывает.

Во время силосования происходит частичная потеря витаминов в заквашиваемой массе, но, как правило, значительно меньшая, чем при сушке сена.

Общие потери сухих веществ корма при холодном силосовании значительно меньше, чем при горячем. В первом случае они не должны превышать 10—15%, во втором достигают 30% и более.

Среди молочнокислых бактерий имеются кокки и неспорообразующие палочки. Некоторые из этих бактерий из сахара образуют в основном молочную кислоту, и лишь следы других органических кислот. Другие же, помимо молочной кислоты, накапливают заметные количества уксусной кислоты.

Из типичных представителей первой группы бактерий можно назвать Streptococcus lactis, Str. thermophilus, Streptobacterium plantarum, а из представителей второй — Lactobacillus brevis и Betabacterium breve. Эти микробы факультативные анаэробы.

На характере продуктов, образуемых молочнокислыми бактериями, сказываются не только биохимические особенности той или иной культуры, но и состав питательной среды. Например, если сбраживается не гексоза, а пентоза, то один продукт брожения имеет три атома углерода, а другой только два (первое вещество — молочная кислота, второе — уксусная). В таком случае процесс брожения может быть выражен примерно следующим уравнением:

В растительном сырье имеются пентозаны, дающие при гидролизе пентозы. Поэтому даже при нормально идущем созревании силоса в нем обычно накапливается некоторое количество уксусной кислоты, которая также образуется гетероферментативными молочнокислыми бактериями из гексоз.

Большинство молочнокислых бактерий живет при температуре 7—42° С (оптимум около 25—30°С). Отдельные культуры проявляют активность при низких температурах (около 5°С). Отмечено, что при разогревании силоса до 60—65° С в нем накапливается молочная кислота, которую продуцируют некоторые термотолерантные бактерии, например Вас. subtilis.

В силосе могут размножаться кислотоустойчивые дрожжи, не оказывающие вредного влияния на качество корма. В правильно заложенной заквашиваемой массе дрожжи сильно не размножаются.

Это объясняется тем, что они не могут расти при низком уровне окислительно-восстановительного потенциала, создаваемого в силосе молочнокислыми бактериями.

Развитие маслянокислых бактерий связано со следующими их особенностями: они более строгие анаэробы, чем дрожжи, но неустойчивы к высокой кислотности и прекращают расти при рН, близком к 4,7—5, как и большинство гнилостных бактерий. Накопление масляной кислоты нежелательно, так как она имеет неприятный запах, и корм, содержащий ее, плохо поедается скотом.
В растительной массе, заложенной в силос, могут быть бактерии кишечной группы. Они вызывают гнилостный распад белка, а сахар превращается в малоценные для консервирования продукты.

При нормально протекающем процессе силосования бактерии кишечной группы быстро отмирают, так как они не кислотоустойчивы.

Рассмотрим динамику созревания силоса. Процесс квашения можно условно разбить на три фазы. Первая фаза созревания заквашиваемого корма характеризуется развитием смешанной микрофлоры. На растительной массе начинается бурное развитие разнообразных групп микроорганизмов, внесенных с кормом в силосное помещение. Обычно первая фаза брожения бывает кратковременной. Окончание первой, или предварительной, фазы брожения связано с подкислением среды, что угнетает деятельность большей части микрофлоры корма. К этому времени в силосе устанавливаются анаэробные условия, так как потребляется кислород.

Во вторую фазу — фазу главного брожения — основную роль играют молочнокислые бактерии, продолжающие подкислять корм. Большинство неспороносных бактерий погибает, но бациллярные формы в виде спор могут длительное время сохраняться в заквашенном корме. В начале второй фазы брожения в силосе обычно преобладают кокки, которые позднее сменяются палочковидными молочнокислыми бактериями, отличающимися большой кислотоустойчивостью.

Третья фаза брожения корма связана с постепенным отмиранием в созревающем силосе возбудителей молочнокислого процесса. К этому времени силосование подходит к естественному завершению.

Быстрота подкисления корма зависит не только от количества углеводов в нем, но и от структуры растительных тканей. Чем быстрее отдают растения сок, тем скорее идет процесс квашения при одних и тех же условиях. Быстроте заквашивания способствует измельчение массы, облегчающее отделение сока.
О качестве силосованного корма свидетельствует состав органических кислот, накопившихся в нем при брожении.
Для регулирования процесса силосования рекомендуется несколько приемов. Среди них широко используют закваски молочнокислых бактерий. Эти микроорганизмы находятся на поверхности растений, но в небольшом количестве. Поэтому требуется определенный срок, в течение которого молочнокислые бактерии усиленно размножаются, и только тогда заметно проявляется их полезная деятельность. Этот срок можно сократить искусственно, обогащая корм молочнокислыми бактериями. Особенно целесообразно внесение заквасок при работе с трудносилосуемым материалом.

Предложена технология приготовления и использования бактериальных заквасок, улучшающих качество корма. В большинстве случаев рекомендуют использовать молочнокислую бактерию Lactobacillus plantarum. Иногда к этому микроорганизму добавляют другой возбудитель молочнокислого брожения. Готовят как жидкие, так и сухие закваски.

Для кормов, имеющих малый запас моносахаридов, готовят препарат с Streptococcus lactis diastaticus. Этот микроорганизм, в отличие от других молочнокислых бактерий, может сбраживать не только простые углеводы, но и крахмал.
Имеются предложения о добавке в силосуемую массу, бедную моносахаридами, ферментных препаратов (мальтазы, целлюлазы), разлагающих полисахариды и обогащающих корм сахарами, доступными молочнокислым бактериям.

При силосовании кормов с большим запасом углеводов (например, кукуруза), дающих слишком кислый корм, что нежелательно, готовят закваску из пропионовокислых бактерий. При ее использовании часть молочной кислоты превращается в пропионовую и уксусную, которые слабо диссоциируют, и корм становится менее кислым.

К тому же пропионовокислые бактерии вырабатывают значительное количество витамина Bi2.
Для улучшения силосуемости труднозаквашиваемых кормов предложено использовать препарат амилазы. Этот фермент превращает крахмал корма в мальтозу, что увеличивает резерв Сахаров, доступных молочнокислым бактериям, и усиливает подкисление корма.
Д ля трудно заквашиваемых кормов применяют кислотные препараты. Их введение в силосуемый корм подавляет развитие сапрофитной микрофлоры первой фазы брожения. Создаваемый в растительной массе кислотными смесями рН (около 4) не препятствует развитию молочнокислых бактерий, которые поддерживают рН корма на низком уровне.

Для консервирования плохо заквашиваемых кормов рекомендуют также препараты, содержащие формиат кальция, метабисульфит, пиросульфит натрия, сульфаминовую, бензойную, муравьиную кислоты и другие вещества, подавляющие микробиологические процессы в силосуемом корме и сохраняющие его.

Сенажирование кормов

Сенажирование – способ консервирования провяленных трав, в основном из семейства бобовых, убранных в начале бутанизации при влажности 40-50%

При этом рН корма может быть довольно высоким — около 5, так как гнилостные бактерии обладают меньшим осмотическим давлением, чем молочнокислые. При подсушивании корма в нем приостанавливаются гнилостные процессы, но продолжают действовать возбудители молочнокислого брожения. На этом основано приготовление сенажа, когда несколько подсушенную массу закладывают для консервирования, как при холодном силосовании.
В клевере, влажность которого составляет 50% и ниже, развиваются микробиологические процессы. Они протекают тем слабее, чем суше корм. Доминирующей микрофлорой в консервируемом корме очень быстро становятся молочнокислые бактерии. Эта группа довольно специфичных микроорганизмов близка к Lactobacillus plantarum, но отличается способностью расти в условиях значительно более сухой среды и сбраживать крахмал. Их развитие в корме приводит к накоплению в нем некоторого количества молочной и уксусной кислот.
По типу сенажирования хорошо сохраняются предназначенные на корм измельченные початки кукурузы с влажностью 26—50% (оптимум 30—40%).

В последнее время Куйбышевским сельхоз институтом рекомендовано обрабатывать недосушенное сено (влажностью около 35%) жидким аммиаком, который действует как консервант.

При введении аммиака в корме создается щелочная реакция, блокирующая микробиологические и ферментативные процессы. Обработанный аммиаком корм должен быть покрыт каким-либо изоляционным материалом.

Некоторые технологические приемы консервирования кормов основаны на принципах, исключающих развитие в корме микробиологических и ферментативных процессов. Это производство травяной муки, гранулирование, брикетирование и изготовление смесей с применением высоких температур, а иногда и высокого давления.

Список использованной литературы

  1. А. В. Воробьев, Микробиология, 2003;
  2. И. Б. Котова, Микробиология, 2008;
  3. http://ru.wikipedia.org ;
  4. Работнова И.Л., Общая микробиология, Микробиология, 1966;

Силосование (заквашивание) - способ консервирования зеленого корма, при котором растительная масса сохраняется во влажном состоянии в ямах, траншеях или специальных сооружениях - силосных башнях. Корм, более или менее спрессованный и изолированный от доступа воздуха, подвергается брожению. Он приобретает кислый вкус, становится мягче, несколько изменяет цвет (приобретает бурую окраску), но остается сочным.

Силосование имеет ряд преимуществ по сравнению с другими способами консервирования корма. Известны два способа силосования: холодный и горячий.

Холодный способ силосования назван так потому, что во время созревания силоса в нем происходит умеренное повышение температуры, доходящее в некоторых слоях корма до 40°С, оптимальной температурой считается 25-30°С.

При таком силосовании скошенную растительную массу, если нужно, измельчают, укладывают до отказа в кормовместилище, утрамбовывают, а сверху как можно плотнее укрывают для изоляции от воздействия воздуха.

При горячем способе силосное сооружение наполняют по частям. Зеленую массу на 1-2 дня рыхло укладывают слоем около 1 - 1,5 м. При большом количестве воздуха в ней развиваются энергичные микробиологические и ферментативные процессы, в результате чего температура корма поднимается до 45-50°С. Затем укладывают второй слой такой же толщины, как и первый, и он, в свою очередь, подвергается разогреванию. Растения же, находящиеся внизу и размягченные под влиянием высокой температуры, спрессовываются под тяжестью нового слоя корма. Это вызывает удаление воздуха из нижнего слоя силоса, отчего аэробные процессы в нем прекращаются, и температура начинает снижаться. Так слой за слоем заполняют все силосохранилище. Самый верхний слой корма утрамбовывают и плотно прикрывают для защиты от воздуха. В связи с тем, что силосохранилище при горячем способе силосования обычно делают небольших размеров, на верхний слой силосуемого корма помещают определенный груз.

Разогревание растительной массы связано с потерей (иногда значительной) части питательных веществ корма. В частности, резко уменьшается переваримость его белков. Поэтому горячее силосование не может считаться рациональным способом сохранения растительной массы.

Холодный способ силосования наиболее распространен. Это объясняется как сравнительной его простотой, так и хорошим качеством получающегося корма. Горячий способ силосования признан допустимым лишь для квашений грубостебельных, малоценных кормов, так как разогревание улучшает их поедаемость.

Силосование связано с накоплением в корме кислот, образующихся в результате сбраживания микробами - кислотообразователями содержащихся в растениях сахаристых веществ. Основную роль в процессе силосования играют молочнокислые бактерии, продуцирующие из углеводов (в основном из моно - и дисахаридов) молочную и частично уксусную кислоты. Эти кислоты имеют приятные вкусовые свойства, хорошо усваиваются организмом животного и возбуждают у него аппетит. Молочнокислые бактерии снижают pH корма до 4,2-4 и ниже.

Накопление молочной и уксусной кислот в силосе обусловливает его сохранность потому, что гнилостные и прочие нежелательные для силосования бактерии не могут размножаться в среде с кислой реакцией (ниже 4,5-4,7). Сами же молочнокислые бактерии относительно устойчивы к кислотам. Переносящие сильное подкисление плесневые грибы относятся к строгим аэробам и в хорошо укрытом заквашиваемом корме размножаться не могут.

Таким образом, герметизация и кислотность силоса - главнейшие факторы, определяющие его стойкость при хранении. Если по тем или иным причинам кислотность корма уменьшается, то это неминуемо ведет к его порче, так как создаются условия, благоприятные для вредных микробов.

Для нормального силосования различных кормов требуется неодинаковое подкисление. Иногда 0,5% молочной кислоты снижает значение pH корма до 4,2, то есть до показателя, свойственного хорошему силосу. В других случаях для этого требуется 2% той же кислоты. Такое колебание зависит от различного проявления буферных свойств у некоторых составных частей растительного сока. Механизм действия буферов заключается в том, что в их присутствии значительная часть ионов водорода нейтрализуется. Поэтому, несмотря на накопление кислоты, pH среды почти не снижается до тех пор, пока не израсходован весь буфер. В силосе образуется запас так называемых связанных буферами кислот. Роль буферов могут играть различные соли и некоторые органические вещества (например, протеины), входящие в состав растительного сока. Более буферный корм для получения хорошего силоса должен иметь больше сахаров, чем менее буферный. Следовательно, силосуемость растений определяется не только богатством их сахарами, но и специфическими буферными свойствами. Основываясь на буферности сока растений, можно теоретически вычислить нормы сахара, необходимые для успешного силосования различного растительного сырья.

Буферность сока растений находится в прямой зависимости от количества в них белков. Поэтому большинство бобовых растений трудно силосуется, так как в них относительно мало сахара (8-6%) н много белка (20-40%). Прекрасная силосная культура-кукуруза. В стеблях и початках ее содержится 8-10% белка и около 12% сахара. Хорошо силосуется подсолнечник, в котором хотя и много белка (около 20%), но содержится достаточно углеводов (более 20%). Приведенные показатели рассчитаны на сухое вещество.

Зная буферность корма и его химический состав, можно решить вопрос о силосуемости того или иного растения. В основном силосуемость связывают с запасом моно - и дисахаридов, дающих необходимое подкисление определенного корма. Минимальное их содержание для доведения значения pH корма до 4,2 может быть названо сахарным минимумом. По данным А. А. Зубрилина, если корм содержит больше сахара, чем показывает вычисленный сахарный минимум, то он будет хорошо силосоваться.

Технически определить сахарный минимум несложно. Титрованием устанавливают необходимое количество кислот для подкисления пробы исследуемого корма до pH 4,2. Затем определяют количество простых сахаров в корме. Допуская, что около 60% сахаров корма превращается в молочную кислоту, нетрудно рассчитать, хватает ли имеющегося сахара для должного подкисления корма.

Для улучшения силосуемости кормов, в которых мало углеводов, их смешивают с кормами, содержащими много сахара. Можно также улучшить состав силосуемого корма, добавив к нему по определенному расчету патоку-мелассу.

В некоторых кормах бывает слишком много углеводов. При силосовании таких кормов возникает избыточная кислотность (явление перекисления силоса). Слишком кислый корм животные неохотно поедают. Для борьбы с перекислением силоса корма, содержащие много сахара, смешивают с кормами, в которых мало углеводов. Кислый корм может быть нейтрализован добавкой СаСОз.

В процессе квашения некоторая часть белка превращается в аминокислоты. На основании экспериментальных данных в настоящее время считают, что подобная трансформация в основном связана с деятельностью ферментов растительных тканей, а не бактерий.

Поскольку аминокислоты хорошо усваиваются организмом животных, частичный перевод протеинов в аминокислоты не должен сказываться на уменьшении кормовых достоинств силосуемой массы. Глубокого распада белка с образованием аммиака в хорошем силосе не бывает.

Во время силосования происходит частичная потеря витаминов в заквашиваемой массе, но, как правило, значительно меньшая, чем при сушке сена.

Общие потери сухих веществ корма при холодном силосовани значительно меньше, чем при горячем. В первом случае они и - должны превышать 10-15%, во втором достигают 30% и более.

Среди молочнокислых бактерий имеются кокки и неспороооразующие палочки. Некоторые из этих бактерий из сахара образуют в основном молочную кислоту, и лишь следы других органических кислот (гомоферментативные формы). Другие же, помимо молочной кислоты, накапливают заметные количества уксусной кислоты (гетероферментативные формы).

Из типичных представителей первой группы бактерий можно назвать Streptococcus lactis, Str. thermophilus, Streptobacterium plantarum, а из представителей второй - Lactobacillus brevis и Betabacterium breve. Эти микробы факультативные анаэробы.

На характере продуктов, образуемых молочнокислыми бактериями, сказываются не только биохимические особенности той ил и иной культуры, но и состав питательной среды. Например, если сбраживается не гексоза, а пентоза, то один продукт брожения имеет три атома углерода, а другой только два (первое вещество молочная кислота, второе - уксусная). В таком случае процесс брожения может быть выражен примерно следующим уравнением;

6С5Н10О 5 →8С3Н6О3 + ЗС2Н4О2

В растительном сырье имеются пентозаны, дающие при гидролизе пентозы. Поэтому даже при нормально идущем созревании силоса в нем обычно накапливается некоторое количество уксусной кислоты, которая также образуется гетероферментативными молочнокислыми бактериями из гексоз.

Большинство молочнокислых бактерий живет при температуре 7-42°С (оптимум около 25-30°С). Отдельные культуры проявляют активность при низких температурах (около 5°С). Отмечено, что при разогревании силоса до 60-65°С в нем накапливается молочная кислота, которую продуцируют некоторые термотолерантные бактерии, например Вас. subtilis.

В силосе могут размножаться кислотоустойчивые дрожжи, не оказывающие вредного влияния на качество корма. В правильно заложенной заквашиваемой массе дрожжи сильно не размножаются. Это объясняется тем, что они не могут расти при низком уровне окислительно - восстановительного потенциала, создаваемого в силосе молочнокислыми бактериями. Критические точки Н2 для маслянокислых бактерий - около 3, для молочнокислых бактерий - 6-9, для дрожжей - 12-14.

Развитие маслянокислых бактерий связано со следующими их особенностями. Они более строгие анаэробы, чем дрожжи, но неустойчивы к высокой кислотности и прекращают расти при pH, близком к 4,7-5, как и большинство гнилостных бактерий. Накопление масляной кислоты нежелательно, так как она имеет неприятный запах, и корм, содержащий ее, плохо поедается скотом. При порочном брожении корма, кроме масляной кислоты, в нем накапливаются такие вредные продукты, как амины, аммиак и т. д.

В растительной массе, заложенной в силос, могут быть бактерии кишечной группы. Они вызывают гнилостный распад белка, а сахар превращается в малоценные для консервирования продукты.

При нормально протекающем процессе силосования бактерии кишечной группы быстро отмирают, так как они не кислотоустойчивы.

Рассмотрим динамику созревания силоса. Процесс квашения можно условно разбить на три фазы. Первая фаза созревания заквашиваемого корма характеризуется развитием смешанной микрофлоры. На растительной массе начинается бурное развитие разнообразных групп микроорганизмов, внесенных с кормом в силосное помещение. Обычно первая фаза брожения бывает кратковременной. Окончание первой, или предварительной, фазы брожения связано с подкислением среды, что угнетает деятельность большей части микрофлоры корма. К этому времени в силосе устанавливаются анаэробные условия, так как потребляется кислород.

Во вторую фазу - фазу главного брожения - основную роль играют молочнокислые бактерии, продолжающие подкислять корм. Большинство неспороносных бактерий погибает, но бациллярные формы в виде спор могут длительное время сохраняться в заквашенном корме. В начале второй фазы брожения в силосе обычно преобладают кокки, которые позднее сменяются палочковидными молочнокислыми бактериями, отличающимися большой кислотоустойчивостью.

Третья фаза брожения корма (конечная) связана с постепенным отмиранием в созревающем силосе возбудителей молочнокислого процесса. К этому времени силосование подходит к естественному завершению. Быстрота подкисления корма зависит не только от количества углеводов в нем, но и от структуры растительных тканей. Чем быстрее отдают растения сок, тем скорее идет процесс квашения при одних и тех же условиях. Быстроте заквашивания способствует измельчение массы, облегчающее отделение сока.

Для регулирования процесса силосования рекомендуется несколько приемов. Среди них отметим использование заквасок молочнокислых бактерий. Эти микроорганизмы находятся на поверхности растений, но в небольшом количестве. Поэтому требуется определенный срок, в течение которого молочнокислые бактерии усиленно размножаются, и только тогда заметно проявляется их полезная деятельность. Этот срок можно сократить искусственно, обогащая корм молочнокислыми бактериями. Особенно целесообразно внесение заквасок при работе с трудносилосуемым материалом.

Предложена технология приготовления и использования бактериальных заквасок, улучшающих качество корма. В большинстве случаев рекомендуют использовать молочнокислую бактерию Lactobacillus plantarum. Иногда к этому микроорганизму добавляют другой возбудитель молочнокислого брожения. Готовят как жидкие, так и сухие закваски.

Для кормов, имеющих малый запас моносахаридов, готовят препарат с Streptococcus lactis diastaticus. Этот микроорганизм, в отличие от других молочнокислых бактерий, может сбраживать не только простые углеводы, но и крахмал.

Имеются предложения о добавке в силосуемую массу, бедную моносахаридами, ферментных препаратов (мальтазы, целлюлазы), разлагающих полисахариды и обогащающих корм сахарами, доступными молочнокислым бактериям.

При силосовании кормов с большим запасом углеводов (например, кукуруза), дающих слишком кислый корм, что нежелательно, готовят закваску из пропионовокислых бактерий. При ее использовании часть молочной кислоты превращается в пропионовую и уксусную, которые слабо диссоциируют, и корм становится менее кислым. К тому же пропионовокислые бактерии вырабатывают значительное количество витамина В12.

Для улучшения силосуемости труднозаквашиваемых кормов предложено использовать препарат амилазы. Этот фермент превращает крахмал корма в мальтозу, что увеличивает резерв сахаров, доступных молочнокислым бактериям, и усиливает подкисление корма.

Рекомендованы также буферные кислотные смеси, в состав которых входят разные минеральные кислоты. В СНГ предложены препараты ААЗ, ВИК и др. За рубежом применяют AIV, Penrhesta и др. С успехом используют органические кислоты (например, муравьиную).

Кислотные препараты применяют для трудно заквашиваемых кормов. Их введение в силосуемый корм подавляет развитие сапрофитной микрофлоры первой фазы брожения. Создаваемый в растительной массе кислотными смесями pH (около 4) не препятствует развитию молочнокислых бактерий, которые поддерживают pH корма на низком уровне.

Для консервирования плохо заквашиваемых кормов рекомендуют также препараты, содержащие формиат кальция, метабисульфит, пиросульфит натрия, сульфаминовую, бензойную, муравьиную кислоты и другие вещества, подавляющие микробиологические процессы в силосуемом корме и сохраняющие его.

Изложенные сведения относятся к консервированию кормов, имеющих нормальную влажность (около 75%). Если влажность консервируемой массы значительно ниже (50-65%), то происходит хорошая ферментация даже при дефиците углеводов и получается корм высокого качества - сенаж. При этом pH корма может быть довольно высоким - около 5, так как гнилостные бактерии обладают меньшим осмотическим давлением, чем молочнокислые. При подсушивании корма в нем приостанавливаются гнилостные процессы, но продолжают действовать возбудители молочнокислого брожения. На этом основано приготовление сенажа, когда несколько подсушенную массу закладывают для консервирования, как при холодном силосовании.

Исследованиями авторов было показано, что в клевере, влажность которого составляла 50% и ниже, развиваются микробиологические процессы. Они протекают тем слабее, чем суше корм. Доминирующей микрофлорой в консервируемом корме очень быстро становятся молочнокислые бактерии. Эта группа довольно специфичных микроорганизмов близка к Lactobacillus plantarum, но отличается способностью расти в условиях значительно более сухой среды и сбраживать крахмал. Их развитие в корме приводит к накоплению в нем некоторого количества молочной и уксусной кислот.

По типу сенажирования хорошо сохраняются предназначенные на корм измельченные початки кукурузы с влажностью 26-50% (оптимум 30-40 %).

В последнее время Куйбышевским сельскохозяйственным институтом рекомендовано обрабатывать недосушенное сено (влажностью около 35%) жидким аммиаком, который действует как консервант.

При введении аммиака в корме создается щелочная реакция, блокирующая микробиологические и ферментативные процессы. Обработанный аммиаком корм должен быть покрыт каким-либо изоляционным материалом.

Некоторые технологические приемы консервирования кормов основаны на принципах, исключающих развитие в корме микробиологических и ферментативных процессов. Это производство травяной муки, гранулирование, брикетирование и изготовление смесей с применением высоких температур, а иногда и высокого давления.



Микробиология приготовления обыкновенного сена.

«Т. В. Соляник, М. А. Гласкович МИКРОБИОЛОГИЯ МИКРОБИОЛОГИЯ КОРМОВ ЖИВОТНОГО И РАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ Рекомендовано...»

-- [ Страница 1 ] --

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА

И ПРОДОВОЛЬСТВИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ

ГЛАВНОЕ УПРАВЛЕНИЕ ОБРАЗОВАНИЯ, НАУКИ И КАДРОВ

Учреждение образования

«БЕЛОРУССКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ

СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ»

Т. В. Соляник, М. А. Гласкович

МИКРОБИОЛОГИЯ

МИКРОБИОЛОГИЯ КОРМОВ

ЖИВОТНОГО И РАСТИТЕЛЬНОГО

ПРОИСХОЖДЕНИЯ

Рекомендовано учебно-методическим объединением по образованию в области сельского хозяйства в качестве курса лекций для студентов учреждений высшего образования, обучающихся по специальности 1-74 03 01 Зоотехния Горки БГСХА УДК 636.085:579.67(075.8) ББК 36-1Я73 С60 Одобрено методической комиссией зооинженерного факультета 25.03.2014 (протокол № 7) и Научно-методическим советом БГСХА 03.12.2014 (протокол № 3)

кандидат сельскохозяйственных наук, доцент Т. В. Соляник;

кандидат сельскохозяйственных наук, доцент М. А. Гласкович

Рецензенты:

кандидат ветеринарных наук, доцент кафедры микробиологии и вирусологии УО «ВГАВМ» П. П. Красочко;

кандидат сельскохозяйственных наук, доцент кафедры свиноводства и мелкого животноводства УО «БГСХА» Н. М. Былицкий Соляник, Т. В.



С60 Микробиология. Микробиология кормов животного и растительного происхождения: курс лекций / Т. В. Соляник, М. А. Гласкович. – Горки: БГСХА, 2014. – 76 с. : ил.

ISBN 978-985-467-536-7.

В соответствии с программой дисциплины курс лекций составлен для студентов высших учебных заведений. В лекциях подробно рассмотрен химический состав кормов, характеристика микроорганизмов, масштабы потерь в консервированных кормах, вызванных деятельностью микроорганизмов. В доступной форме представлен микробиологический анализ кормов, микрофлора силосованной и зеленой массы, аэробное разложение корма, методы изучения возбудителей вторичной ферментации.

Для студентов учреждений высшего образования, обучающихся по специальности 1-74 03 01 Зоотехния.

УДК 636.085:579.67(075.8) ББК 36-1Я73 ISBN 978-985-467-536-7 © УО «Белорусская государственная сельскохозяйственная академия», 2014

ВВЕДЕНИЕ

На корма в животноводстве или птицеводстве приходится около 70 % себестоимости готовой продукции, поэтому каждый хозяин, заинтересованный в высокорентабельном ведении хозяйства, заботится о них в первую очередь. Ни для кого не является новью тот факт, что корма не только нужно вырастить исвоевременно собрать с поля, а еще и правильно заготовить их.

Сено (солому) хранят в скирдах, тюках или сенохранилищах. Для некоторых сочных кормов (корнеплоды) нужны теплые хранилища или хорошо утеплены кагаты (бурты). Для концентрированных кормов требуются составы или элеваторы. Самой сложной является проблема приготовления и хранения сочных кормов – силоса и сенажа.

Следует учитывать, что эти два вида корма составляют свыше 50 % питательности зимнего рациона жвачных животных. А в интенсивном животноводстве, при переходе на текущее кормление животных однотипным рационом, эти корма становятся главной составляющей рациона круглый год. Поэтому качество силоса и сенажа – это качество и эффективность кормления животных в целом.

Консервирование кормов в настоящее время сопровождается большими потерями. Если силосование выполняется надлежащим образом, к примеру, в горизонтальных силосохранилищах, потери составляют в среднем около 20 %. При неквалифицированной работе они значительно возрастают. На основании многочисленных исследований можно констатировать, что величину потерь, вызванных деятельностью микроорганизмов кормов, часто недооценивают. При составлении кормового баланса предусматриваются только «неизбежные» потери в результате «угара». Однако следует иметь в виду, что силос, находившийся под испорченным в результате вторичного брожения слоем (верхний и боковые слои), характеризуется высоким рН и непригоден для скармливания животным. Сенаж, подвергнувшийся самосогреванию в результате аэробных процессов, теряет свое кормовое достоинство наполовину. Плесневелое сено, зерно, кислый силос являются причиной многих болезней сельскохозяйственных животных.

Даже при благоприятных условиях естественного брожения при консервировании зеленых растений теряется немало питательных веществ. Ликвидация этих потерь равноценна повышению урожайности кормовых культур на 20–25 %. Кроме того, обычный традиционный метод силосования непригоден для трав с высоким содержанием протеина (более 17 % в сухом веществе).

Согласно современным представлениям, успех консервирования определяется суммарным действием основных консервирующих факторов: активной кислотностью, токсическим действием молекулы молочной кислоты и специфическими антибиотическими веществами молочнокислых бактерий. Молочнокислые бактерии полезны еще и тем, что являются продуцентами, помимо молочной кислоты и антибиотиков, других биологически активных веществ (витаминов, аминокислот и т. д.). Все это обусловливает поиск новых экологически чистых биопрепаратов на основе молочнокислых бактерий, регулирующих и направляющих микробиологический процесс по пути желательного гомоферментативного молочнокислого брожения.

Производственно-ценные штаммы молочнокислых бактерий должны обладать способностью активно размножаться, характеризоваться высокой энергией кислотообразования, т. е. образовывать большое количество молочной кислоты, достаточное для быстрого стабильного повышения кислотности консервируемого корма.

Знание физиолого-биохимических особенностей отдельных групп микроорганизмов, встречающихся в консервированных кормах, и факторов, ограничивающих или стимулирующих их развитие, необходимо для того, чтобы исключить ошибки при заготовке, хранении и скармливании консервированных кормов.

1. ОЗНАКОМЛЕНИЕ С ОСОБЕННОСТЯМИ ХИМИЧЕСКОГО

СОСТАВА И ПИТАТЕЛЬНОСТИ КОРМОВ

–  –  –

Сено – высушенные стебли и листья травянистых растений, скошенных в зеленом виде, до достижения ими полной естественной зрелости. Применяется в качестве продукта питания для сельскохозяйственных животных в тех районах, где климатические условия не позволяют круглогодичное использование свежих кормов. Скашивание сена называется сенокосом.

Сено – один из основных кормов для крупного рогатого скота, овец, лошадей в стойловый период. Высококачественное сено служит источником протеина, клетчатки, сахаров, минеральных веществ, витаминов D и группы В. Для заготовки сена используют посевы многолетних и однолетних бобовых и злаковых трав, их смеси, а также травостои естественных кормовых угодий.

Питательность сена в значительной степени зависит от его качества. Основное условие получения высококачественного сена – своевременное скашивание трав. Способы и продолжительность сушки трав оказывают существенное влияние на качество сена. Методом полевой сушки заготавливают рассыпное и прессованное сено. Применение плющения трав и досушивания провяленных трав методом активного вентилирования позволяет сократить продолжительность сушки трав. Активное вентилирование (при заготовке рассыпного измельченного и неизмельченного, а также прессованного сена) дает возможность увеличить на 10–15 % общий сбор питательных веществ, на 20 % повысить питательность сена и в 2 раза снизить потери каротина.

Применяется консервация влажного сена жидким аммиаком, позволяющая на 10–25 % повысить питательность сена.

Общая оценка сена и его классификация производится согласно ГОСТ 4808–87. В основу общей оценки сена приняты следующие показатели: фаза вегетации трав в момент уборки, цвет, запах, содержание в сене сухого вещества, вредных и ядовитых растений, минеральной примеси. Оценка качества сена определяется на основании органолептических показателей и лабораторных анализов.

Органолептические показатели устанавливают общее состояние сена: внешний вид, запах, признаки порчи, которые характеризуют качество его уборки и хранения. Качество сена должно соответствовать требованиям ГОСТ 4808–87. Согласно ГОСТу производят общую оценку сена и его классификацию.

В зависимости от ботанического состава сено подразделяют на следующие виды:

1) сеяное бобовое (бобовых более 60 %);

2) сеяное злаковое (злаковых более 60 % и бобовых не менее 20 %);

3) сеяное бобово-злаковое (бобовых от 20 до 60 %);

4) естественных кормовых угодий (злаковые, бобовые и пр.).

На сено сеяные травы и травы естественных кормовых угодий должны быть скошены:

1) бобовые – в фазе бутонизации, но не позднее фазы полного цветения;

2) злаковые – в фазе колошения, но не позднее фазы начала цветения.

Цвет сена должен быть:

1) сеяного бобового (бобово-злакового) – от зеленого и зеленоватожелтого до светло-бурого;

2) сеяного злакового и сена естественных кормовых сенокосов – от зеленого до желто-зеленого.

Сено, приготовленное из сеяных трав и трав естественных кормовых угодий, не должно иметь затхлого, плесневелого и гнилостного запаха.

В сене из сеяных трав и трав естественных кормовых угодий массовая доля сухого вещества должна быть не менее 83 % (влаги – не более 17 %).

Сено из сеяных трав и трав естественных угодий подразделяется на три класса в зависимости oт содержания в нем сырого протеина и обменной энергии или ОКЕ (табл. 1).

В сене, приготовленном из сеяных трав, содержание вредных и ядовитых растений не допускается. Не допускается в сене естественных кормовых угодий содержание вредных и ядовитых растений (для 1-го класса – не более 0,5 %, 2-го и 3-го классов – не более 1 %).

Т а б л и ц а 1. Требования к сену (ГОСТ 4808–87)

–  –  –

Повышение качества кормов является одним из наиболее реальных и ощутимых резервов в создании прочной кормовой базы для животноводства страны. Проблема улучшения качества кормов является комплексной и предусматривает получение сырья с высоким содержанием питательных веществ и экологически безопасного.

Полное удовлетворение потребности в кормах может быть достигнуто не только путем повышения урожайности кормовых культур, но и путем улучшения качества, снижения потерь питательных веществ кормов в процессе заготовки, переработки и хранения. Успех дела во многом зависит от выбора наиболее эффективного способа консервирования зеленых растений.

В последние годы широкое распространение получил такой способ консервирования, как сенажирование, позволяющий сохранить корма с минимальными потерями питательных веществ, особенно углеводистой части. Правильно приготовленный сенаж – это корм из растений, убранных в ранние фазы вегетации (преимущественно бобовых), провяленных до влажности 45–55 % и сохраненных в анаэробных условиях (без доступа воздуха). При соблюдении основных технологических требований при закладке и хранении сенажа, как правило, корм получается высокого качества со свойственным ему химическим составом и питательностью.

Технология приготовления сенажа состоит из следующих последовательно выполняемых операций: скашивание и плющение трав (бобовых); провяливание и сгребание в валки; подбор; измельчение и погрузка в транспортные средства; перевозка и разгрузка в хранилище;

тщательная трамбовка (в траншеях) и надежное укрытие.

Сенаж в зависимости от ботанического состава и влажности измельченных до 3 см растений подразделяют на следующие виды:

1) сенаж из бобовых и злаково-бобовых трав, провяленных до влажности 45–55 %;

2) сенаж из злаковых и злаково-бобовых трав, провяленных до влажности 40–55 %.

Сенаж подразделяют на три класса в соответствии с требованиями ГОСТ 23637–90 (табл. 2).

Растения для приготовления сенажа должны быть скошены в следующие фазы развития:

Многолетние бобовые травы – в фазе бутонизации, но не позднее фазы начала цветения;

Многолетние злаковые – в конце фазы выхода в трубку до фазы начала колошения;

Многолетние травосмеси скашивают в названные выше фазы преобладающего компонента.

–  –  –

П р и м е ч а н и е. Нормы установлены с учетом, что классы сенажа определяются не ранее чем через 30 суток после герметического укрытия массы, заложенной в траншею или башню, и не позднее чем за 15 суток до начала скармливания готового сенажа животным.

Однолетние бобовые растения, бобово-злаковые и их смеси скашивают не ранее образования бобов в двух-трех нижних ярусах. Сенаж должен иметь свойственный ему запах, без ослизлости консистенцию.

Наличие плесени не допускается. Массовая доля золы, нерастворимой в соляной кислоте, не должна превышать 3 %.

1.3. Химический состав и питательность силоса и силажа Силос – корм из свежескошенной или провяленной массы, законсервированной в анаэробных условиях образующимися при этом органическими кислотами или консервантами.

Силосование – это заквашивание сочной массы растений органическими кислотами, главным образом молочной. Влажность силоса должна составлять 65–75 %. Чтобы не происходило гниение корма, из закладываемой массы удаляют воздух путем тщательного ее уплотнения.

Не все растения одинаково хорошо силосуются.

К легкосилосующимся относятся: кукуруза, убранная в стадии молочно-восковой спелости; сорго – в период восковой спелости зерна;

подсолнечник, собранный при цветении корзинок у третьей части растении; злаковые травы, скошенные в начале колошения; бобовозлаковые смеси, капуста столовая и кормовая, рапс, свекла, тыква, морковь, кормовые арбузы, отава луговых трав; камыш и тростник, убранные до цветения; ботва свеклы и моркови.

Трудносилосующиеся растения: клевер, люцерна, донник, эспарцет, вика, осока, камыш и тростник, убранные в период цветения. Эти растения лучше закладывать в смеси с легкосилосующимися в соотношении 1:1.

Силаж – разновидность силоса из трав, провяленных до влажности 60,1–70,0 %. К силажу относится также корм, приготовленный способом равномерного смешивания и плющения измельченных свежескошенных бобовых трав со злаковыми, провяленными до влажности 40– 45 %, в соотношении 1:1–1,3:1,0. По содержанию сухого вещества (30,0–39,9 %) силаж занимает промежуточное положение между силосом из свежескошенных растений и сенажом.

Силос в зависимости от ботанического состава растений и технологии приготовления подразделяют на следующие виды: силос из кукурузы, силос из однолетних и многолетних растений и силаж.

Силос может быть приготовлен с применением обогащающих азотсодержащих веществ или без них, с применением консервантов и влагопоглощающих добавок (соломы, мякины и др.) или без них, с провяливанием зеленой массы или без него.

Кормовые культуры, предназначенные для приготовления силоса, должны убираться в следующие фазы вегетации:

Кукуруза – в фазе восковой и молочно-восковой спелости зерна;

допускается убирать кукурузу в более ранние фазы в повторных посевах и в районах, где эта культура по климатическим условиям не может достигнуть этих фаз;

Подсолнечник – в фазе начала цветения;

Люпин – в фазе блестящих бобов;

Многолетние бобовые травы – в фазе бутонизации – начала цветения;

Злаковые травы – в конце фазы выхода в трубку – начала колошения (выметывание метелок);

Травосмеси многолетних бобовых и злаковых трав – в названые выше фазы вегетации преобладающего компонента;

Однолетние бобово-злаковые травосмеси – в фазе восковой спелости семян в двух-трех нижних ярусах бобовых растений;

Однолетние злаковые и злаково-бобовые смеси – в фазе молочной спелости зерна.

Силос должен иметь приятный фруктовый запах квашеных овощей, характерный исходному сырью цвет, без ослизлости консистенцию. Не допускается наличие плесени.

Допускается предельное содержание в силосе: нитратов – 500 мг/кг, нитритов – 10 мг/кг.

Максимально допустимые уровни содержания тяжелых металлов, мг/кг: ртути – 0,06; кадмия – 0,3; свинца – 5,0; меди – 30,0; цинка – 50,0; железа – 100,0; никеля – 3,0; фтора – 20,0; кобальта – 1,0; молибдена – 2,0; йода – 2,0.

Остаточное количество пестицидов не должно превышать допустимые уровни.

Силос из кормовых растений подразделяют на четыре класса: высший, первый, второй и третий. Силос кукурузный должен соответствовать требованиям, приведенным в табл. 3.

Силос из однолетних и многолетних свежескошенных и провяленных растений должен соответствовать требованиям, указанным в табл. 4 и 5.

Оценку качества силоса из кормовых растений производят не ранее чем через 30 суток после герметичного укрытия массы, заложенной в хранилище, и не позднее чем за 15 суток до начала скармливания животным.

–  –  –

* В зоны входят области: в первую – Брестская и Гомельская; во вторую (центральную) – Гродненская, Минская и Могилевская;

в третью (северную) – Витебская.

Т а б л и ц а 4. Характеристика классов качества силоса из однолетних и многолетних свежескошенных и провяленных растений

–  –  –

П р и м е ч а н и я: 1. В силосе, консервированном пиросульфитом натрия, рН не определяют.

2. В силосе, консервированном пиросульфитом натрия, пропионовой кислотой и ее смесями с другими кислотами, массовую долю масляной кислоты не определяют.

3. Силос с соломой высшим классом не оценивают.

–  –  –

2. КРАТКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА

МИКРООРГАНИЗМОВ КОРМОВ

2.1. Эпифитная микрофлора, ее состав и особенности Эпифитная микрофлора – это микроорганизмы, встречающиеся на поверхности растущих растений. Ее количественный и качественный (видовой) состав сильно колеблется и зависит от времени года, местности, вида и стадии развития растений, степени их загрязненности и многих других условий. Так, на 1 г сырой массы приходилось следующее количество микроорганизмов: свежая лугопастбищная трава – 16 000, люцерна – 1 600 000, кукуруза – 17 260 000.

В разнообразной микрофлоре содержится лишь сравнительно небольшое количество молочнокислых бактерий (табл. 6).

Т а б л и ц а 6. Количественный и качественный состав микроорганизмов, клеток/г

–  –  –

В 1 г люцерны насчитывалось около 1,6 млн. микроорганизмов, но среди них было только 10 молочнокислых бактерий. Следовательно, на 1 желательный микроорганизм приходилось 160 000 нежелательных. Исключение составляет кукуруза. На 1 г свежей массы этого растения приходилось более 100 000 молочнокислых бактерий. Повидимому, хорошая силосуемость кукурузы объясняется как благоприятным соотношением питательных веществ, так и большей численностью молочнокислых бактерий. Этими же факторами обусловливается хорошая силосуемость также других кормов с повышенным содержанием сахаров (свекловичная ботва, просо и др.).

Таким образом, на растениях находится огромное количество разнообразных микроорганизмов, однако это количество незначительно по сравнению с плотностью микроорганизмов после закладки и при хранении в том или ином хранилище.

2.2. Микрофлора сена и влажного зерна

Важнейшей задачей кормопроизводства является сохранение доброкачественности кормов. Существует ряд причин, по которым происходят потери питательных веществ, снижение вкусовых и технологических свойств кормов.

Наиболее распространенный способ консервирования зеленой массы и других кормов – это сушка. Сушку сена проводят по-разному – в прокосах, валках, копнах, на вешалах и т. д. Даже при сухой погоде и быстро протекающей сушке некоторые потери питательных веществ в корме неизбежны, так как в растительной массе продолжают идти дыхание и другие ферментативные процессы. В случае более или менее затяжной сушки роль отмеченных процессов сильно возрастает, и это, в свою очередь, ведет к увеличению потерь, которые во многом связаны с размножающимися на влажной растительной массе микроорганизмами. Для ограничения потерь питательных веществ стремятся использовать искусственную досушку сена, применяя принудительное вентилирование атмосферным или подогретым воздухом.

При сушке кормов количество жизнедеятельных микроорганизмов в них постепенно уменьшается. Тем не менее на доброкачественном корме растительного происхождения всегда можно найти большее или меньшее количество микробных клеток, свойственных эпифитной микрофлоре, а также других микроорганизмов, попадающих сюда из почвы и воздуха. Они находятся в анабиотическом состоянии.

При увлажнении хранящегося корма в нем бурно начинают протекать микробиологические процессы и одновременно повышается температура. Это явление, получившее название саморазогревания (термогенез), связано с жизнедеятельностью микрофлоры.

Микроорганизмы используют для синтетических целей не более 5– 10 % энергии потребленных ими питательных веществ. Остальная энергия выделяется в окружающую среду главным образом в виде тепла. Таким образом, термогенез зависит в основном от неполной утилизации микроорганизмами энергии, выделяющейся при осуществлении ими биохимических процессов.

Явление термогенеза становится осязаемым лишь в условиях затрудненной теплоотдачи. В противном случае тепло рассеивается из среды, в которой размножаются микроорганизмы, без заметного разогревания субстрата. Поэтому в практике отмечается разогревание лишь значительных скоплений различных материалов, т. е. таких масс, в которых может происходить аккумуляция тепла.

При самонагревании растительной массы наблюдается четко выраженная смена микрофлоры. Сначала в разогревающейся массе размножаются мезофильные микроорганизмы. С повышением температуры на смену им приходят термофилы, которые способствуют повышению температуры органических веществ, так как обладают исключительной скоростью размножения.

Сильное разогревание достаточно сухой и пористой массы может вызвать ее обугливание и образование горючих газов, таких как метан и водород, которые адсорбируются на пористой поверхности обуглившихся растительных частиц, вследствие чего может произойти самовоспламенение. Весьма вероятно, что роль катализатора при воспламенении играют соединения железа. Воспламенение происходит лишь в присутствии воздуха и только если масса недостаточно уплотнена. В ветреную погоду случаи самовоспламенения учащаются.

Термогенез причиняет существенный вред. Он вызывает порчу сена. Однако при умеренном развитии самонагревания термогенез может быть желательным. Например, «самопрелая» солома в результате разогревания лучше поедается скотом и т. д. Явление термогенеза используют для приготовления так называемого бурого сена. Его готовят в местностях, где вследствие климатических условий затруднена сушка сена. При этом для просушивания корма используют не солнечную энергию, а тепло, выделяющееся в результате жизнедеятельности микроорганизмов, обитающих в растительной массе.

В высушенных кормах микроорганизмы находятся в анабиотическом состоянии. При увлажнении корма они начинают размножаться и вызывают его порчу.

Теоретически приготовление сена связано с высушиванием культуры с первоначальным содержанием воды 65–75 % до ее содержания 10–16 %, при котором прекращается вся биохимическая и микробиологическая деятельность. На практике сено не высушивается до такого низкого содержания воды и фактически считают безопасным хранить сено после того, как среднее содержание воды в нем снизилось до уровня 20 %. Это достаточно высокая влажность, при которой происходит плесневение, если только при хранении не происходит дальнейшей потери воды.

Во всех случаях в первые 2–3 дня хранения наблюдается первый пик температуры и за ним резко следует второй, более высокий пик.

Именно второй пик обусловлен дыханием быстро развивающихся грибов. Чем выше содержание воды уровня 20 %, тем сильнее возрастает опасность плесневения, увеличения потерь сухого вещества. Так, если рыхлые кипы сена хранятся при содержании воды 35–40 %, потери сухого вещества будут составлять около 15–20 %, а растворимых углеводов – будут полными. Микробиологический анализ выявит большую численность микроорганизмов, включающих опасные термофильные актиномицеты.

Наукой и практикой установлено, что питательность зерна от уборки до сушки, только в результате происходящих ферментативных процессов, может снизиться на 20 % и больше. Более значительными потери питательности зерна бывают при их уборке в дождливую погоду.

Сырое и влажное зерно на 2–3-и сутки начинает самонагреваться, а затем прорастать, плесневеть и портиться. Так, при температуре днем 25 °С, а ночью 16 °С в свежем зерне могут содержаться 800 плесневелых грибов, через 2 дня (в силосной башне) – 15 000, в зерне, налипшем к стенкам башни, – 7 500 000.

Кондиционной или, как иногда называют, критической влажностью зерна, закладываемого на длительное хранение, считается влажность 10–15 %. При более высокой влажности зерно быстро портится. Одной из главных причин, обусловливающих самонагревание зерна, является развитие плесневых грибков и бактерий. Если прорастание зерна начинается при поглощении 40 % влаги к его массе, то развитие бактерий происходит при 16 %, а размножение плесеней – при 15 % влажности.

Сложность хранения кормов и зернового сырья заключается в том, что получить их чистыми от микроорганизмов и бактерий не представляется возможным. Микроорганизмы и бактерии широко распространены в природе и всегда присутствуют в кормах и сырье. Неблагоприятные условия хранения кормов способствуют развитию и росту микроорганизмов, при этом значительно ухудшая питательные свойства, а иногда делая их полностью непригодными для питания. Одна из главных причин недоброкачественности кормов и сырья – это поражение их плесневыми грибами, многие из которых вырабатывают вторичные продукты своей жизнедеятельности – микотоксины.

Термин «влажное зерно», как правило, применяется к зерну с влажностью от 18 до 20 %. Влажное зерно начинает согреваться уже через несколько часов после уборки в основном за счет микроорганизмов. Если условия хранения неподходящие и не контролируются, температура зерна будет повышаться до уровня, при котором могут успешно расти очень опасные актиномицеты, которые вызывают целый ряд различных заболеваний животных и людей. Если зерно содержит более 18 % воды, имеют место вторичные изменения, которые обусловлены дрожжами, относящимся к родам Candida и Hansenula. Эти микроорганизмы способны расти при очень низком содержании кислорода, и в этих условиях может происходить слабое спиртовое брожение. Такого рода брожение приводит к снижению содержания сахарозы и увеличению содержания восстанавливающих сахаров в зерне, образованию различных привкусов, повреждению клейковины.

2.3. Микробиологические процессы, происходящие при созревании сенажа Принято считать, что основное сообщество микроорганизмов, которые выявляются в процессе созревания сенажа, представлено, так же как и в силосе, тремя основными физиологическими группами (молочнокислыми, гнилостными бактериями и дрожжами), но в меньшем количестве. Максимальное количество микроорганизмов в подвяленном материале выявляется до 15 суток (в силосе – до 7). В сенаже меньше органических кислот, больше сахара, а его кислотность, как правило, ниже кислотности силоса.

Биологической основой приготовления сенажа является ограничение остаточного дыхания растительных клеток и нежелательных микроорганизмов путем «физиологической сухости». Водоудерживающая сила в сенаже равна примерно 50 атм., а осмотическое давление у большинства бактерий составляет 50–52 атм., т. е. при влажности травы 40–55 % вода находится в малодоступной для большинства бактерий форме. Благодаря повышенному осмотическому давлению в сенажной массе маслянокислые бактерии и их споры не могут использовать влагу корма для своего развития и прорастания. Плесени могут развиваться при указанной влажности, но их существование затруднено из-за отсутствия воздуха (кислорода).

Осмотолерантные виды молочнокислых бактерий могут развиваться при такой влажности. У культур молочнокислых бактерий сенажа осмотическая активность, активность размножения, накопление молочной кислоты, а также способность сбраживать сложные углеводы (крахмал и др.) выше, чем у культур молочнокислых бактерий силоса.

Поэтому, как и при силосовании, должны создаваться оптимальные условия для развития молочнокислых бактерий (непрерывное уплотнение во время закладки и герметичное укрытие полиэтиленовой пленкой для ограничения доступа воздуха). Если же хранилище недостаточно уплотнено и негерметично, это приводит к разогреванию, плесневению корма и другим нежелательным аэробным процессам.

В таких условиях сенаж хорошего качества приготовить невозможно.

В результате процессов самосогревания резко снижаются переваримость питательных веществ, особенно протеина. Технология заготовки сенажа и силоса из трав с пониженной влажностью детально изложены во многих книгах и руководствах, мы лишь подчеркнем здесь, что при соблюдении основных технологических приемов питательность сенажа выше питательности силоса, приготовленного из корма естественной или пониженной влажности. В 1 кг натурального корма содержится 0,30–0,35 корм. ед.

2.4. Микробиологические процессы, происходящие при силосовании

Количественный и качественный (видовой) состав сообщества микроорганизмов, которые участвуют в созревании силоса, также зависит от ботанического состава зеленой массы, содержания в ней растворимых углеводов и протеина, влажности исходной массы.

Так, например, сырье, богатое белками (клевер, люцерна, донник, эспарцет и др.), в отличие от сырья, богатого углеводами (кукуруза, просо и др.), силосуется при длительном участии в процессах гнилостных бактерий и при замедленном нарастании численности молочнокислых бактерий.

Однако в любом случае после закладки растительной массы в хранилище наблюдается массовое размножение микроорганизмов. Их общее количество уже через 2–9 суток может значительно превышать количество микроорганизмов, попадающих с растительной массой (табл. 7).

–  –  –

При всех способах силосования в созревании силосов участвует сообщество микроорганизмов, состоящее из двух диаметрально противоположных групп по характеру воздействия на растительный материал: вредные (нежелательные) и полезные (желательные) группы. Характер их взаимоотношений варьирует не только от симбиотических до антагонистических, обусловливающих в конечном итоге успех или неудачу в исходе силосования, но и от природы силосуемого материала, воздушного и температурного режимов.

Таким образом, в процессе силосования происходит замена гнилостных микроорганизмов молочнокислыми, которые вследствие образования молочной и частично уксусной кислот снижают рН корма до 4,0–4,2 и тем самым создают неблагоприятные условия для развития гнилостных микроорганизмов (см. табл. 7).

Условия для существования (потребность в кислороде, отношение к температуре, активной кислотности и т. д.) для различных групп микроорганизмов неодинаковые.

С точки зрения потребности в кислороде различают условно три группы микроорганизмов:

Размножающиеся только при полном отсутствии кислорода (облигатные анаэробы);

Размножающиеся только при наличии кислорода (облигатные аэробы);

Размножающиеся как при наличии кислорода, так и без него (факультативные анаэробы).

Большинство микроорганизмов, которые вызывают порочное брожение, не выдерживает рН ниже 4,0, поэтому желательно быстро достичь этого оптимального уровня кислотности.

Чтобы ограничить деятельность вредных микроорганизмов и стимулировать размножение полезных бактерий, следует знать особенности отдельных групп микроорганизмов.

В табл. 8 схематично представлены физиолого-биохимические особенности основных представителей микроорганизмов, участвующих в процессах силосования.

Т а б л и ц а 8. Условия существования микроорганизмов в силосе

–  –  –

Для получения качественного силоса не меньшее значение имеет создание анаэробных условий – плотная трамбовка и хорошая герметизация.

В силосе, полученном в негерметичных условиях (аэробных), количество молочнокислых бактерий после начального увеличения быстро падает, в герметичных (анаэробных) – оно остается высоким. На 7-е сутки брожения при анаэробных условиях наблюдается высокий процент гомоферментативных бактерий, в аэробных – педиококков.

Хотя позднее в этом силосе и появляется достаточное количество молочнокислых палочек, но они уже не могут предотвратить размножение нежелательных микроорганизмов.

Таким образом, молочнокислые бактерии отличаются следующими особенностями, важными для силосования:

1) нуждаются для обмена веществ, главным образом, в углеводах (сахар, реже крахмал);

2) белок не разлагают (некоторые виды в ничтожном количестве);

3) они факультативные анаэробы, т. е. развиваются без кислорода и при наличии кислорода;

4) температурный оптимум чаще всего составляет 30 °С (мезофильные молочнокислые бактерии), но у некоторых форм он достигает 60 °С (термофильные молочнокислые бактерии);

5) выдерживают кислотность до рН 3,0;

6) могут размножаться в силосе с очень высоким содержанием сухого вещества;

7) легко переносят высокие концентрации NаCl и обладают устойчивостью к некоторым другим химическим препаратам;

8) помимо молочной кислоты, которая играет решающую роль в подавлении нежелательных типов брожения, молочнокислые бактерии выделяют биологически активные вещества (витамины группы В и др.). Они обладают профилактическими (или лечебными) свойствами, стимулируют рост и развитие сельскохозяйственных животных.

При благоприятных условиях (достаточное содержание в исходном растительном материале водорастворимых углеводов, анаробиоз) молочнокислое брожение заканчивается всего за несколько дней и рН достигает оптимального значения – 4,0–4,2.

2.4.1. Кукурузный силос

Применяемые в настоящее время в производственных условиях способы заготовки и хранения кукурузного силоса не обеспечивают получение высокоэнергетического корма. Нередко даже раннеспелые гибриды не успевают достичь оптимальных стадий развития (молочновосковая, восковая спелость зерна) из-за климатических условий, особенно в северной части Беларуси. Высокая влажность исходной зеленой массы и относительно большое содержание сахара приводят, как показывает практика, к получению перекисленного корма (рН 3,3–3,7) с низкой питательностью (0,12–0,14 корм. ед. в 1 кг корма).

Кроме того, вызывает озабоченность ухудшение аэробной стабильности кукурузного силоса (зерна) хорошего качества.

В некоторых случаях наблюдаются значительные потери в процессе выемки кукурузного силоса из хранилища и его скармливания, несмотря на строгое соблюдение основных технологических приемов при закладке (снижение влажности, своевременная закладка, надежное уплотнение и укрытие). Это происходит в результате активности аэробной микрофлоры, которая использует как источник энергии в основном водорастворимые углеводы и молочную кислоту. На практике это сопровождается термическим процессом, в конечном счете «аэробным размножением» силоса, от которого отказываются животные.

2.4.2. Микрофлора зеленой массы кукурузы

Исследования микрофлоры свежей зеленой массы кукурузы и початков во время заготовки силоса показали, что ее представители, участвующие в процессах созревания силосованных кормов, выявляются примерно в таком же численном соотношении, как и на других видах свежего сырья для силосования. При анализе количественного и качественного состава микрофлоры кукурузы установлено преобладающее количество гнилостных бактерий – Bacillus megaterium, Bacterium levans, Pseudomonas herbicola levans (табл. 9).

Выявляется большое количество дрожжей – Hansenula anomala, Candida krusei, Pichia membranae faciens, Saecharomyces exiguus, а также плесневых грибов Aspergillus fumigatus, Fusarium sporotrichiella, Geotrichum candidum и др.

Основными представителями молочнокислых бактерий кукурузы явились палочковидные формы типа Lactobacillus plantarum.

Т а б л и ц а 9. Количество микроорганизмов в свежей зеленой массе кукурузы во время загрузки в хранилище, млн.

клеток/г силосуемой массы

–  –  –

Микрофлора свежесобранных початков значительно беднее микрофлоры зеленой массы, снятой в тот же срок и в том же поле. Это указывает на то, что обертка является защитным укрытием початка в отношении микрофлоры. Так, в 1 г обертки содержатся единицы и десятки миллионов гнилостных бактерий, в самом початке гнилостные бактерии были обнаружены в количестве десятков тысяч, а молочнокислые – сотен и тысяч клеток.

2.4.3. Микрофлора силосованной кукурузы

Кукуруза богата углеводами, поэтому при создании анаэробных условий в процессе силосования молочнокислые бактерии довольно быстро приобретают численный перевес над гнилостными. Если на 2-е сутки в кукурузном силосе молочнокислых бактерий насчитывали 430 млн., гнилостных – 425 млн. в 1 г силосной массы, то через 15 суток, когда численность молочнокислых бактерий возросла до 900 млн., гнилостные бактерии выделялись в очень малом количестве. Маслянокислые бактерии при оптимальных условиях силосования не развиваются.

Наблюдение за динамикой процессов созревания силоса из кукурузы показало, что в первой фазе участвуют не только гнилостные и молочнокислые бактерии, но и дрожжи. Их количество значительно возрастает на 2-е сутки.

Активность дрожжей в силосе считается нежелательной по двум причинам.

Во-первых, они конкурируют с молочнокислыми бактериями за сахара, которые сбраживают в основном до этилового спирта, не представляющего значительной консервирующей ценности. В ходе образования этилового спирта из глюкозы сначала образуется пируват, который затем декарбоксилируется до ацетальдегида, восстанавливаемого до этилового спирта. Помимо этилового спирта, дрожжи в анаэробных условиях образуют также и другие продукты (уксусную, пропионовую, масляную, изомасляную кислоты, n-пропанол, изобутанол, изопентанол). В дополнение к гексозным сахарам некоторые дрожжи используют пентозы (D-ксилозу, D-рибозу), полисахариды (крахмал), спирты (маннит, сорбит).

Во-вторых, дрожжи являются основными возбудителями аэробного разложения силоса, используют органические кислоты (молочную, уксусную, лимонную).

Таким образом, в кукурузе, богатой углеводами, при оптимальном режиме силосования, в начальный период созревания процесс брожения обусловлен преимущественным участием сообщества микроорганизмов, сбраживающих углеводы: гнилостных, молочнокислых и дрожжей. Гнилостные бактерии доминируют не более первых 2–5 суток, а затем под воздействием нарастающего количества молочнокислых бактерий, прекращают свое развитие в условиях низкого уровня рН.

Молочнокислые бактерии, достигнув доминирующего положения, почти полностью заменяют гнилостных бактерий. Затем, по мере дальнейшего снижения уровня рН, их количество снижается.

Аэробные условия в силосохранилище являются неблагоприятными для роста плесеней. Они, как правило, развиваются лишь на отдельных участках, у краев и на поверхности, которые соприкасаются с воздухом.

При нарушении технологического режима силосования в кукурузной массе в наибольшей степени сказывается деятельность дрожжей и маслянокислых бактерий, т. е. микроорганизмов, разрушающих углеводы. Такой силос характеризуется большим содержанием уксусной и даже масляной кислоты. Наличие большого количества уксусной кислоты всегда указывает на пониженное качество силоса.

2.4.4. Микрофлора кукурузы, подмороженной заморозками В условиях северных районов Республики Беларусь бывают случаи, когда силосуют подмороженную кукурузу. При правильной технологии силосования подмороженной кукурузы уже через 3–5 суток молочнокислые бактерии приобретают доминирующее положение, их численность почти в 10 раз превышает количество гнилостных бактерий, а дрожжи на этом материале выявляются даже в большем количестве, чем в созревших силосах из неповрежденной заморозком кукурузы.

На этом материале основное экологическое сообщество микроорганизмов представлено молочнокислыми и гнилостными бактериями, а также дрожжами. Из гнилостных бактерий выделены те же виды, которые встречаются обычно при силосовании зеленой массы разнообразных растений, в том числе и кукурузы, – Pseudomonas herbicola и Bacterium levans.

Биохимические данные свидетельствуют о том, что процессы созревания этих силосов характеризуется быстрым и очень высоким накоплением органических кислот. В то же время отмечено, что, по мере хранения, кислотность в этих силосах существенно снижается. Это может быть объяснено потреблением кислот дрожжами, поскольку последние здесь обнаруживаются даже в 9-месячном силосе, что приводит к получению готовых кормов пониженного качества.

Через 5 месяцев хранения качество силоса, взятого в середине хранилища и в более глубоких слоях, по составу органических кислот, по микрофлоре и органолептическим показателям было хорошим, в то время как в верхней части сооружения был получен силос плохого качества. Силос из верхнего слоя хранилища обладал острым запахом масляной кислоты, и в нем были выявлены гнилостные бактерии в доминирующем над молочнокислыми количестве: соответственно 30 и 23 млн. бактерий на 1 г силосной массы. Здесь же были выявлены в значительно большем количестве маслянокислые бактерии по сравнению с силосом, залегающим на середине сооружения.

Таким образом, микробиологические процессы созревания силоса из кукурузы, поврежденной заморозком, протекают более интенсивно, чем при силосовании кукурузы, не поврежденной им; при большем участии нежелательной микрофлоры в верхних слоях. Задержка с уборкой подмороженной кукурузы недопустима, так как это способствует быстрому развитию на подмороженных растениях нежелательной микрофлоры и существенно снижает качество готового силоса.

Поэтому кукурузу, поврежденную заморозками, необходимо быстро убрать и сразу же засилосовать с соблюдением всех технологических приемов.

2.4.5. Влияние кукурузного силоса на обмен веществ в организме животных За сутки в организм животного с силосом вводится 0,7–0,9 кг органических кислот, которые оказывают существенное влияние на процессы пищеварения и обмен веществ. Но если силос перекислен, то количество кислот существенно возрастает. Такой силос оказывает отрицательное влияние не только на обменные процессы, но и на вкусовые и технологические качества молока, а также на продукты его переработки (сыры, масло).

Длительное скармливание кукурузного силоса спонтанного брожения в чистом виде (без других кормов) тормозит процессы брожения в рубце жвачных животных, угнетает развитие микрофлоры и вызывает снижение переваримости питательных веществ рациона, а также среднесуточных приростов живой массы. Животные отказываются от корма из кукурузы, в котором прошли процессы вторичного брожения.

Установлено снижение щелочного резерва и сахара в крови у коров, обильно поедавших силос спонтанного брожения.

Скармливание лактирующим коровам по 20–25 кг кукурузного силоса, содержащего масляную кислоту, вызывало тяжелую форму ацидоза и значительно повышало кислотность молока.

Силосный тип кормления коров с недостатком в рационе легкопереваримых углеводов снижает амилолитическую активность содержимого рубца и химуса слепой кишки. Длительное скармливание коровам по 25–30 кг в сутки перекисшего кукурузного силоса спонтанного брожения отрицательно отражается на воспроизводительной способности коров, на биологической полноценности молозива и молока, что ведет к снижению роста телят и их сопротивляемости к желудочнокишечным заболеваниям. Научные выводы подтверждались в практических условиях кормления коров кукурузным силосом.

Следует отметить, что кетонемия в организме высокопродуктивных коров развивается быстрее, чем низкопродуктивных. Нарушение соотношения углеводного и жирового метаболитов в организме приводит к появлению в крови и тканях значительного количества недоокисленных продуктов обмена в виде кетоновых (ацетоновых) тел и развитию кетоза.

Явления кетозов в организме обычно связывают с нарушением углеводно-жирового обмена веществ при одновременном снижении количества сахара в крови и резком повышении кетоновых тел. Основная причина кетозов – поступление в организм кислых продуктов обмена в периоды необычных состояний к усвоению питательных веществ рациона, т. е. беременности, лактации, стрессов и т. д. Отсюда и наибольшая предрасположенность к кетозам самок сельскохозяйственных животных, потребляющих повышенное количество силоса.

Кетонемия, независимо от причины, ее вызвавшей, характеризуется накоплением в крови и тканях кетоновых тел под влиянием активированных уксусной и ацетоуксусной кислот. Ацетоуксусная кислота превращается в оксимасляную благодаря ферменту дегидрогеназа, причем реакция эта обратима. В рубце жвачных животных обнаружена ацетоацетатдекарбоксилаза, которая позволяет тканям рубца использовать ацетоуксусную кислоту с выделением ацетона и углекислого газа. Эти метаболиты удаляются из организма с мочой и выдыхаемым воздухом.

Если, например, с выдыхаемым жвачными животными воздухом ощущается характерный запах ацетона, то это показатель заболевания кетозом.

К предшественникам кетоновых тел относятся тирозин, лейцин, изолейцин и фенилаланин, синтезируемые в рубце и поступающие с кормом. За сутки в организме коровы может образоваться до 300 г кетоновых тел. Основной же источник кетообразования в организме – это масляная кислота. Удаление ее из организма прекращает кетонемию. Местом образования кетоновых тел считают ткани рубца, печени, а иногда молочную железу. Утилизируются кетоновые тела почти всеми тканями организма.

Главным условием для окончательного распада кетоновых тел до углекислого газа и воды в организме является присутствие достаточного количества глюкозы в тканях и крови. Максимальная утилизация кетоновых тел тканями организма возможна при концентрации их в крови на уровне 20 мг%, превышение этого предела ведет к кетонемии. Выведение кетоновых тел из организма с мочой, молоком и выдыхаемым воздухом сопровождается выделением равного количества ионов натрия и калия, что является причиной снижения щелочного резерва крови.

Для профилактики кетонемии у жвачных животных обычно рекомендуют гормональные препараты типа инсулина, АКТГ, тироксина, а также глицерин, глюкозу, пропионовую кислоту и ее соли. Введение их в организм считается необходимым для увеличения в рубце пропионовой кислоты и уменьшения масляной. Этому способствуют также балансирование рационов по протеину и углеводам, скармливание животным крахмалистых и сахаристых кормов.

Скармливание коровам силоса с пропионовокислой закваской активизирует деятельность целлюлозолитических бактерий в пищеварительном тракте, в результате чего усиливаются разложение клетчатки, стимулируется развитие пропионовокислых бактерий в рубце, лучше усваиваются питательные вещества рациона. Так, коэффициент переваримости основных компонентов рациона с таким силосом выше, чем рациона с силосом спонтанного брожения: по сырому протеину – на 4 %, сырому жиру – на 8,4 %, сырой клетчатке – на 2,1 % и безазотистым экстрактивным веществам – на 3 %. Силос с закваской у лактирующих коров вызывает увеличение концентрации сахара на 10–15 %, резервной щелочности – на 20–40 мг%, снижает концентрацию кетоновых тел на 5–7 мг% и тем самым профилактирует ацидоз. У стельных сухостойных коров активизируется пищеварение, улучшается физиологическое состояние. Об этом свидетельствуют увеличение в крови щелочного резерва в среднем на 10 мг%, концентрации сахара – на 20 мг%, снижение в ней уровня кетоновых тел на 4,6 мг% и рождение здоровых, жизнеспособных телят. У лактирующих коров повышается жирность молока на 0,20–0,25 %, содержание белка – на 0,20–0,30 % и лактозы – на 0,10–0,20 %.

Использование углеаммонийных солей (УАС) в количестве 10 кг/т корма дает положительные результаты при раскислении кукурузного силоса. Кроме того, силос одновременно обогащается протеином.

2.4.6. Аэробное разложение кукурузного силоса

Силос хорошего и самого высокого качества иногда подвергается быстрому согреванию при выемке из хранилища или при доступе воздуха в хранилище.

В кукурузном силосе аэробные потери, в некоторых случаях, достигали 32 % в течение 15 дней.

В силосах, в которых происходит аэробная порча, зона повышенной температуры распространялась сначала на поверхности силоса в хранилище (бурте), а со временем углублялась на 20–40 см. В дальнейшем поверхностный слой (0–15 см) охлаждался, рН в нем повышался до 8,5–10,0 и начиналось развитие плесневых грибов. Таким образом, на первой стадии порчи происходит разогревание и увеличение рН, а на второй стадии порчи – плесневение. Результатом этих негативных явлений является разрушение молочной кислоты, углеводов и других ценных веществ с образованием опасных для здоровья животных микотоксинов.

2.4.7. Причины аэробного разложения корма

Под «вторичным» брожением подразумевают окисление органических кислот (главным образом молочной кислоты), образовавшихся в процессе силосования, при доступе воздуха уже после законченного брожения. Этот термин, часто употребляющийся в последние несколько лет, не совсем точен в научном смысле. Если брожение – это процесс анаэробного расщепления углеводов, то «вторичное» брожение – противоположный процесс ферментативного разложения при доступе кислорода.

Проникновение воздуха приводит к быстрому распаду углеводов, молочной кислоты и в дальнейшем к распаду белка с повышением уровня рН. На практике это сопровождается термическим процессом, неприятным запахом, нарушением структуры корма (мажущаяся, разрушенная). Даже при слабом самосогревании до температуры 40 °С животные отказываются от такого корма.

Медленное заполнение, задержка герметизации – все это процедуры, способствующие увеличению популяции аэробных микроорганизмов, которые начнут активно развиваться, как только будет вскрыто силосохранилище.

2.4.8. Микрофлора аэробного разложения корма

Установлено, что первичными возбудителями вторичной ферментации являются дрожжи, которые обладают способностью к ассимиляции (расщеплению) молочной кислоты.

Впервые присутствие дрожжей в силосе установлено в 1932 г., но их значение недооценивалось до 1964 г., когда выяснилось, что дрожжи играют главную роль в разложении силоса при доступе к нему воздуха. Отсутствие интереса к этим микроорганизмам объяснялось тем, что их количество в силосе незначительно. Однако силос из кукурузы нередко характеризуется высокой численностью этих микроорганизмов, особенно когда аэробная фаза в силосохранилище была продолжительной.

Основные дрожжи, встречающиеся в силосе, разделены на две группы:

1) дрожжи «низового» брожения, или осадочные, которые предпочтительно сбраживают сахара (Torulopsis sp.);

2) дрожжи «верхового» брожения, или пленчатые, имеющие слабую способность к сбраживанию, но эффективно использующие молочную кислоту в качестве субстрата (Candida sp., Hansnula sp.).

Изучение динамики брожения показало, что содержание дрожжей в самосогревающемся кукурузном силосе первоначально составляло 105–107 дрожжей в 1 г сразу после выемки, а затем постепенно снижалось. Большинство выделенных штаммов дрожжей из таких силосов относится к Candida sp., Hansnula sp. Такие наиболее распространенные возбудители нестабильности, как Candida krusei, Candida lamlica, Pichia strasburgensia, Hansenula anomala, устойчивы к очень низким уровням рН.

После 5-дневного аэробного хранения нестабильный кукурузный силос имеет астрономически высокое число не только дрожжей, но и других микроорганизмов (табл. 10).

–  –  –

Особенно поразительно присутствие в силосе обитателей нейтральных или слабощелочных почв – стрептомицетов. Их наличие, как и «истинных» силосных плесеней, является одной из причин непригодности для скармливания такого силоса. Но как при наличии «истинных» плесневых грибов, так и чуждых для силоса стрептомицетов речь идет не о первичных возбудителях вторичной ферментации, а уже о вторичной флоре при аэробной нестабильности.

В конце спонтанного брожения силосной массы из кукурузы количество дрожжей составляет не менее 104 клеток в 1 г корма (табл. 11).

Т а б л и ц а 11. Кукурузный силос (конечная оценка после 173 дней)

–  –  –

Плесневые грибы, как и дрожжи, играют негативную роль в разложении силосов при доступе к ним воздуха, так как образуют токсичные вещества – микотоксины. В изученных образцах, отобранных из силосохранилищ перед началом кормления, были выделены и определены следующие плесени: Aspergillus sp., Fusarium sp., Penicillium sp.

и др. У животных, получавших заплесневевший кукурузный силос, содержащий A. fumigatus, наблюдались воспаление тонких кишок, изменения в промежуточных тканях легких, потеря аппетита, диарея.

Нарушение сердечной деятельности (пульс учащен, аритмичный) и дыхания, расстройство пищеварения (атония рубца или усиленная перистальтика кишечника), угнетение, отказ от корма вызваны микотоксинами Fusarium sporotrichiella, Geotrichum candidum. Эти микотоксины придают силосу прогорклый запах и вызывает микозы у сельскохозяйственных животных.

2.4.9. Способы повышения аэробной стабильности силоса

Правильное вскрытие силосного хранилища, микробиологический анализ закладываемой зеленой массы в силосохранилище, применение химических консервантов, обладающих фунгицидными (фунгистатическими) свойствами – основные меры для ограничения микробиологической порчи при длительном скармливании или аэробном хранении кукурузного силоса (влажного зерна).

Наиболее очевидным и эффективным способом предотвращения аэробного разложения является скармливание силоса животным в день извлечения его из силосохранилища. Частое изъятие корма также усиливает разложение на вскрытой поверхности силосохранилища. Выгрузка должна производиться без перемещения слоев, нарушения монолитности силоса, оставшегося в силосохранилище.

Одной из возможных мер улучшения аэробной стабильности кукурузного силоса является обработка зеленой массы химическими веществами, подавляющими аэробную микрофлору корма.

В табл. 12 представлены наиболее часто используемые консервирующие препараты, оказывающие фунгистатическое (фунгицидное) действие на возбудителей вторичного брожения.

–  –  –

Практически тормозящего действия на дрожжи не оказывают формиат кальция и уксусная кислота, если применяемая концентрация ниже 0,5 %. Несмотря на быстрый распад нитрита натрия, гексаметилентетрамина, их рекомендуют для ограничения процессов вторичного брожения, так как они «освобождают» силос от дрожжей к началу брожения. Самыми эффективными в качестве консервантов фунгистатического (фунгицидного) действия на вторичные процессы брожения являются пропионовая и уксусная кислоты, бензоат натрия, поскольку они при выемке силоса из хранилища сохраняются в значительной степени.

Сравнительноное изучение фунгистатических (фунгицидных) свойств пропионовой, муравьиной, бензойной кислот, бензоата натрия, нитрита натрия, консерванта-обогатителя (в состав которого входит пропионовая кислота и мочевина), финских консервантов (типа Viher) показало, что наибольшей активностью обладали нитрит натрия и бензойная кислота, которые ингибировали рост дрожжей до 98 %. Сила воздействия химических консервантов зависела от их дозы, концентрации водородных ионов и количества дрожжевых клеток.

Использование препаратов, созданных на основе комбинированных гомоферментативных и гетероферментативных штаммов молочнокислых бактерий, также способствует повышению сохранности силоса в процессе выемки из силосохранилища и скармливания животным. Хотя включение гетероферментативных бактерий приводит к некоторому увеличению потерь питательных веществ в процессе силосования, оно способствует увеличению в корме уксусной кислоты и, следовательно, повышению его аэробной стабильности.

Таким образом, применяемая в производственных условиях технология заготовки кукурузного силоса не всегда обеспечивает получение высокопитательного корма. Силос бывает перекисленным, и поедаемость его животными невысока. Отсюда низкая эффективность использования энергоресурсов. Обильное кормление животных перекисленным силосом приводит к нарушению уровня сахара, щелочного резерва в крови, к развитию кетозов и т. д.

В практике известны случаи, когда кукурузный силос хорошего качества быстро «согревается» и очень быстро плесневеет при выемке его из хранилища или в самом хранилище при доступе воздуха. Причиной аэробной нестабильности является наличие дрожжей (Candida sp., Hansenula sp.), которые могут ассимилировать молочную кислоту.

Использование последней приводит к тому, что кислая среда сменяется на щелочную (рН 8,5–10,0), создаются благоприятные условия для развития плесневой, маслянокислой, гнилостной микрофлоры.

В том случае, когда в 1 г исходной силосуемой массы содержится более 4 105 грибов, нельзя получить из нее аэробно стабильный силос и необходимы дополнительные меры для ограничения потерь.

Для подавления возбудителей вторичной ферментации существуют препараты с фунгицидной (фунгистатической) активностью. Наилучшую активность против дрожжей показала бензойная кислота, нитрит натрия, которые почти полностью (98 %) ингибировали дрожжи.

Для улучшения аэробной стабильности кукурузного силоса предлагаются комплексные биопрепараты на основе гомо- и гетероферментативных молочнокислых бактерий.

2.5. Влияние основных факторов внешней среды на жизнедеятельность молочнокислых бактерий 2.5.1. Влияние химического состава исходной растительной зеленой массы на ферментативную активность молочнокислых бактерий Интенсивность образования молочной кислоты, образуемой молочнокислыми бактериями, зависит от количественного соотношения микроорганизмов и химического состава растительной массы.

В большинстве случаев естественного наличия молочнокислых бактерий недостаточно для достижения быстрого повышения кислотности силосуемой массы. Исключением является кукуруза и другое исходное сырье, богатое свободными сахарами. Особенностью брожения при силосовании такой зеленой массы является то, что уже на 2–3-и сутки наблюдается численный перевес молочнокислых бактерий, которые к 12-му дню составляют всю массу существующих в силосе бактерий. Это обусловлено обеспеченностью этих культур монои дисахаридами, которые в наибольшей степени подходят для питания и существования молочнокислых бактерий. При соблюдении всех технологических приемов в результате быстрых биохимических превращений в начальный период хранения силос из кукурузы (как в чистом виде, так и с добавлением соломы) полностью созревает на 15-е сутки с момента закладки.

Многие моносахариды (глюкоза, левулеза, галактоза, манноза) сбраживаются, как правило, всеми молочнокислыми бактериями.

Общее уравнение молочнокислого брожения С6Н12О6 = 2СН3СНОН · СООН глюкоза молочная кислота является суммарным, подытоживающим ряд сложных превращений углеводов и продуктов их распада, поэтапно совершающихся в микробной клетке.

Определенные виды молочнокислых бактерий обладают способностью использовать пентозы (ксилозу, арабинозу) и, в частности, рамнозу (метилпентозу).

Дисахариды (сахароза, мальтоза, лактоза) ассимилируются обычно избирательно. Некоторые виды молочнокислых бактерий сбраживают одни углеводы, а другие – иные. В природе встречаются, впрочем, молочнокислые бактерии, могущие усваивать и сбраживать довольно широкий набор дисахаридов.

Полисахариды (декстрины, крахмал, инулин) могут сбраживаться лишь единичными, недавно описанными формами молочнокислых бактерий. В растительной массе имеются полисахариды левулезаны, играющие роль резервных веществ. Они относительно легко гидролизуются и, по имеющимся предварительным данным, по всей видимости, сбраживаются некоторыми молочнокислыми бактериями.

Клетчатка молочнокислыми бактериями не используется. Ее запас в силосуемой массе остается неизменным.

Достаточно сильно меняется состав конечных продуктов брожения в том случае, если сбраживается не гексоза, а пентоза, т. е. сахар с пятью атомами углерода: образуются продукты брожения с двумя и тремя атомами углерода (молочная и уксусная кислоты).

В таком случае процесс брожения может быть выражен следующим примерным уравнением:

6С5Н10О5 = 8С3Н6О3 + 3С2Н4О2.

пентоза молочная уксусная кислота кислота В растительном сырье содержатся пентозаны, дающие при гидролизе пентозы. Поэтому неудивительно, что даже при нормально идущем созревании силоса в нем обычно накапливается некоторое количество уксусной кислоты.

По составу продуктов брожения молочнокислые бактерии в настоящее время делят на две основные группы:

1) гомоферментативные – образующие из сахаров, кроме молочной кислоты, лишь следы побочных продуктов;

2) гетероферментативные – образующие из сахаров, помимо молочной кислоты, заметные количества углекислого газа и других продуктов.

Известная биохимическая характеристика вышеуказанных групп молочнокислых бактерий приведена в табл. 13, в которой указаны накапливающиеся основные продукты их жизнедеятельности.

Т а б л и ц а 13. Продукты брожения молочнокислых бактерий, образуемые из углеводов

–  –  –

Как видно из таблицы, гомоферментативные молочнокислые бактерии, в отличие от гетероферментативных, образуют весьма небольшие количества летучей кислоты (уксусной), спирта и углекислого газа.

Потери энергии при сбраживании глюкозы гомоферментативными молочнокислыми бактериями составляют 2–3 %, а выход молочной кислоты – 95–97 %.

На интенсивность образования молочной кислоты, образуемой молочнокислыми бактериями, заметное влияние может оказывать не только состав среды (химический состав растительной массы, закладываемой на силос, сенаж), но и другие условия (кислотность среды, температура, аэрация и т. д.).

2.5.2. Влияние кислотности среды на скорость кислотонакопления

При разных значениях pH промежуточные реакции, имеющие место при брожении, получают разное направление. Если образующаяся молочная кислота будет нейтрализоваться, то при развитии гомоферментативных молочнокислых бактерий на гексозах будут накапливаться значительные количества уксусной кислоты и других побочных продуктов (до 40 % от сброженного сахара).

Результаты многих исследователей показали снижение молочной кислоты в силосе с увеличением pH. Так, в группе образцов, имевших pH выше 5,0, наблюдалось низкое содержание молочной кислоты, а ее соотношение с уксусной составляло 1:1.

В силу того, что молочнокислые бактерии вырабатывают в результате своей жизнедеятельности значительное количество кислот, они развиваются при довольно низком значении рН.

В группу молочнокислых бактерий входят как кокковидные, так и палочковидные формы.

Палочковидные формы переносят более низкую кислотность.

Этим свойством молочнокислых палочек объясняется факт их накопления к концу силосования, когда корм в значительной степени подкисляется.

Сопоставление материалов различных исследователей показывает, что для одних и тех же форм молочнокислых бактерий указываются не тождественные величины критического значения рН. В этом нет ничего удивительного, так как на положении кардинальных точек рН сказываются состав кислот, определяющих реакцию среды, а также компоненты того субстрата, в котором развиваются бактерии. Поэтому, например, минимальные точки рН для какой-нибудь бактерии будут неодинаковы в двух различных средах. Так, менее диссоциированная, но более вредная для микроорганизмов уксусная кислота приостанавливает развитие молочнокислых бактерий при более высоком значении рН, чем молочная.

2.5.3. Влияние температуры на энергию кислотообразования молочнокислых бактерий Жизнедеятельность молочнокислых бактерий может успешно протекать как в относительно холодных, так и в самосогревающихся силосах.

Отдельные виды и расы молочнокислых бактерий могут развиваться при довольно различных температурных условиях. Наиболее обычные представители их живут в пределах от 7–10 до 10–42 °С, имея оптимум около 25–30 °С.

На рис. 1 приводится показатель жизнедеятельности одной из рас молочнокислых бактерий, довольно часто встречающихся в силосуемых кормах, – энергия кислотообразования при различных температурах.

Рис. 1. Влияние температуры на энергию кислотообразования молочнокислой бактерии В природе, однако, нередки формы молочнокислых бактерий, способных размножаться как в зоне более высоких, так и низких температур.

Например, в силосах, созревших зимой при весьма низкой плюсовой температуре, встречаются стрептококки с минимальной температурной точкой ниже 5 °С. Их оптимум лежит около 25 °С, а максимум – около 47 °С. При температуре 5 °С эти бактерии еще довольно энергично накапливают в корме молочную кислоту.

При пониженных температурах могут развиваться не только кокковидные, но и палочковидные формы молочнокислых бактерий.

В самосогревающихся силосах также удавалось находить, наряду с молочнокислыми палочками, и кокки. Минимальная температурная точка кокков, способных развиваться при повышенных температурах, составляет около 12 °С, палочек – около 27 °С. Температурный максимум этих форм приближался к 55 °С, а оптимум лежит в интервале 40– 43 °С.

Молочнокислые бактерии развиваются плохо в экстремальных условиях – при температуре выше 55 °С, а при дальнейшем повышении температуры погибают, как формы, не образующие спор. Характер влияния разных температур на накопление молочной кислоты в силосе из злаковых тpав показан на рис. 2.

Рис. 2. Влияние температуры на накопление кислоты в силосе из трав Как видно, при температуре 60 °С накопление молочной кислоты сильно подавляется.

Отдельные исследователи отмечают, что молочная кислота накапливается в силосах при их разогревании даже выше температуры 60– 65 °С. В связи с этим следует иметь в виду, что она может продуцироваться не только молочнокислыми бактериями.

Молочную кислоту в некотором количестве вырабатывают и другие бактерии. В частности, она образуется в среде при развитии некоторых спороносных палочек, принадлежащих к группе Вас. subtilis и размножающихся при повышенной температуре.

Подобные формы всегда бывают богато представлены в самосогревающихся силосах.

2.5.4. Влияние аэрации на активность молочнокислых бактерий

Молочнокислые бактерии являются условными факультативными анаэробами, т. е. могут жить как в присутствии кислорода, так и в анаэробных условиях. Степень обеспеченности среды кислородом может быть охарактеризована величиной окислительно-восстановительного (ОВ) потенциала (Eh). Иногда ОВ-потенциал выражается величиной rН2, вычисляемой по формуле Eh (в милливольтах) rН2 = + 2pH.

Величина rН2 показывает отрицательный логарифм концентрации молекул водорода, выраженный в атмосферах. Coвершенно очевидно, что степень обеспеченности кислородом непосредственно связана с концентрацией в среде молекул водорода, показывающих степень ее восстановленности.

В кислородной среде, при нейтральной ее реакции, величина Eh равна 810, а rН2 = 41. В атмосфере водорода соответственно Eh = –421, а rН2 = 0. Колебания отмеченных величин характеризуют ту или иную степень аэробности. В среде, где развиваются молочнокислые бактерии, потенциал может снижаться довольно низко, до значения rН2 5,0–6,0.

Таким образом, молочнокислые бактерии не нуждаются в кислороде. Они настолько приспособились к получению необходимой энергии с помощью бродильного процесса, что даже при доступе воздуха не переходят на дыхание и продолжают вызывать бродильный процесс.

Это объясняется отсутствием у молочнокислых бактерий системы ферментов, обеспечивающей дыхание (гемин-фермент, каталаза и т. д.).

Правда, имеются отдельные факты, свидетельствующие о способности некоторых возбудителей молочнокислого процесса существовать в аэробных условиях за счет дыхания.

Возможно, что подобные формы бактерий встречаются, но они представляют исключение.

В литературе имеются данные об окислении отдельными молочнокислыми бактериями молочной кислоты в аэробных условиях. Благодаря этому в культурах подобных микроорганизмов кислотность со временем падает. Соображения такого рода вряд ли основательны.

В плотно заложенном силосуемом корме молочнокислые бактерии могут интенсивно размножаться, в то время как подавляющее большинство гнилостных бактерий и плесени испытывает явную депрессию.

Если к силосуемой массе имеется доступ кислорода, то молочная кислота разрушается дрожжами, плесенями и другими аэробными бактериями.

В таком случае кислотность силоса падает, в нем начинают развиваться гнилостные процессы и корм портится (рис. 3).

–  –  –

На рис. 3 видно, что аэробные условия способствовали разложению молочной кислоты в силосе из кормовой капусты. Этот корм был испорчен, так как консервирующий фактор – молочная кислота – перестал действовать на нежелательную микрофлору, которая сохранялись в пассивном состоянии в кормовой массе.

2.5.5. Влияние повышенного осмотического давления среды на развитие молочнокислых бактерий Информация относительно устойчивости молочнокислых бактерий к повышенному осмотическому давлению среды ограничена. Из имеющихся сведений следует, что различные виды этих микроорганизмов по-разному относятся к присутствию хлористого натрия в среде, в том числе иногда наблюдается адаптация к высоким концентрациям соли.

Детальные исследования физиологии молочнокислых бактерий, выполненные под руководством Е. Н. Мишустина, убедительно показали слабую приспособленность эпифитных молочнокислых бактерий к брожению на среде с высоким осмотическим давлением в растительных клетках. Более поздними исследованиями установлено, что культуры молочнокислых бактерий сенажа более осмофильны, чем культуры, выделенные из силоса. Они выдерживали концентрацию хлористого натрия от 7 до 10 %, в то время как силосные молочнокислые бактерии – до 7 %. При этом уже при 6 % содержания соли в среде начинает изменяться морфология клеток: удлиняется форма, наблюдается вздутие на концах клетки, искривления по центру и по периферии, нарушаются некоторые их жизненно важные функции. Это происходит изза обезвоживания и затруднения потребления питательных веществ клетками из окружающей среды.

Примерно в такие же условия микроорганизмы попадают в процессе заготовки сенажа. Культуры молочнокислых бактерий сенажа, приспособившись к высокой осмотической активности клеточного сока (50 атм. при 40–45 % влажности травы), обладают более высокой способностью к выживанию, чем молочнокислые бактерии силоса, гнилостные микроорганизмы, дрожжи.

Таким образом, осмотическая активность культур молочнокислых бактерий сенажа является фактором, обеспечивающим доминирующее положение их при приготовлении и дальнейшем хранении кормов с пониженной влажностью. Если влажность консервированной массы будет ниже 50–60 %, то она хорошо сохранится даже при дефиците водорастворимых углеводов.

У культур молочнокислых бактерий сенажа и силоса различается не только осмотическая активность, но активность размножения и накопление молочной кислоты, а также способность сбраживать крахмал, арабинозу, ксилозу. Максимальное количество микроорганизмов в вариантах с подвяленной массой выявилось на 15-е сутки, в то время как в вариантах силоса из свежескошенных растений – на 7-е сутки.

Однако в производственных условиях непросто достичь высокого содержания сухого вещества в скошенной траве из-за погодных условий. Поэтому в течение ряда лет учеными велись поиски биопрепаратов, которые могли бы положительно повлиять на качество консервируемых кормов из свежескошенных и провяленных трав. При силосовании провяленных трав должны применяться только особые осмотолерантные молочнокислые бактерии.

2.6. Маслянокислые бактерии

Маслянокислые бактерии (Clostridium sp.) – это спорообразующие, подвижные, палочковидные анаэробные маслянокислые бактерии (клостридии), широко распространенные в почве. Присутствие клостридий в силосе является результатом загрязнения почвой, поскольку их численность на зеленой массе кормовых культур, как правило, очень низка. Почти сразу же после заполнения хранилища зеленой массой маслянокислые бактерии начинают интенсивно размножаться вместе с молочнокислыми в первые несколько дней.

Высокая влажность растений, обусловливающаяся наличием в измельченной силосной массе клеточного сока растений, и анаэробные условия в силосохранилище – идеальные условия для роста клостридий. Поэтому уже к концу первых суток их численность возрастает и в дальнейшем зависит от интенсивности молочнокислого брожения.

В случае слабого накопления молочной кислоты и снижения уровня рН маслянокислые бактерии энергично размножаются и число их достигает максимума (103–107 клеток/г) за несколько суток.

По мере увеличения влажности (при содержании в силосной массе 15 % сухого вещества) чувствительность клостридий к кислотности среды снижается даже при рН 4,0.

Трудно указать точное критическое значение рН силоса, при котором начинается ингибирование клостридий, так как оно зависит не только от количества образованной молочной кислоты, но также от воды в корме и температуры среды.

Клостридии чувствительны к недостатку воды. Доказано, что с увеличением свободной воды чувствительность этих бактерий к кислотности среды снижается.

Температура корма оказывает заметное влияние на рост клостридий. Оптимальная температура для роста большинства этих бактерий составляет около 37 °С.

Высокой термоустойчивостью характеризуются споры клостридий.

Поэтому маслянокислые бактерии могут долгое время сохраняться в силосе в виде спор и при попадании в благоприятные для их развития условия начинают размножаться. Этим объясняется расхождение в биохимических и микробиологических показателях силоса: масляная кислота отсутствует, а титр маслянокислых бактерий в этих же образцах корма высокий.

Изучение продуктов маслянокислого брожения в силосе показало, что встречаются две физиологические группы: сахаролитические и протеолитические клостридии.

Сахаролитические клостридии (Cl. butyricum, Cl. pasteurianum) сбраживают главным образом моно- и дисахариды. Количество образовавшихся продуктов разнообразно (масляная, уксусная и муравьиная кислоты, бутиловый, этиловый, амиловый и пропиловый спирты, ацетон, водород и углекислота) и сильно колеблется. Это обусловлено видовой принадлежностью микроорганизмов, субстратом, уровнем рН, температурой. Соотношение углекислоты и водорода составляет обычно 1:1. Предполагается, что масляная кислота возникает в результате конденсации двух молекул уксусной кислоты. Непосредственное образование масляной кислоты не может служить источником энергии для клостридий. Для поддержания их жизнедеятельности необходима уксусная кислота, которая образуется при окислении уксусного альдегида в результате декарбоксилирования пировиноградной или молочной кислоты.

К сахаролитическим клостридиям, сбраживающим молочную кислоту и сахар, относят Cl. butyricum, Cl. tyrobutyricum, Cl. Papaputrificum. В силосе с преобладанием этих клостридий обычно почти не обнаруживают молочную кислоту и сахар. В основном присутствует масляная, хотя нередко может быть много уксусной кислоты.

С6Н12О6 = С4Н8О2 + 2СО2 + 2Н2.

сахар масляная углекис- водород кислота лый газ 2С3Н6О3 = С4Н8О2 + 2СО2 + 2Н2.

молочная масляная углекис- водород кислота кислота лый газ Протеолитические клостридии сбраживают, главным образом, белки, а также аминокислоты и амиды. В результате катаболизма аминокислот образуются летучие жирные кислоты, среди которых преобладает уксусная кислота. Выявлено значительное участие протеолитических клостридий в разложении и углеводов. В силосах встречаются протеолитические клостридии видов Cl. sporogenes, Cl. acetobutyricum, Cl. Subterminale, Cl. bifermentas. Количество масляной кислоты в силосе является надежным показателем масштабов деятельности клостридий.

Маслянокислое брожение приводит к высоким потерям питательных веществ в результате катаболизма белков, углеводов и энергии.

Энергии теряется в 7–8 раз больше, чем при молочнокислом брожении. Кроме того, происходит смещение реакции силоса в нейтральную сторону из-за образования щелочных соединений при расщеплении белка и молочной кислоты. Органолептические показатели корма ухудшаются вследствие накопления масляной кислоты, аммиака и сероводорода. При кормлении коров таким силосом споры клостридий с молоком попадают в сыр и, прорастая в нем при определенных условиях, могут быть причиной его «вспучивания» и прогоркания.

Таким образом, для возбудителей маслянокислого брожения характерны следующие основные физиолого-биохимические особенности:

1) маслянокислые бактерии, являясь облигатными анаэробами, начинают развиваться в условиях сильного уплотнения силосной массы;

2) разлагая сахар, они конкурируют с молочнокислыми бактериями, а используя белки и молочную кислоту, приводят к образованию сильнощелочных продуктов распада белка (аммиака) и токсичных аминов;

3) маслянокислые бактерии нуждаются для своего развития во влажном растительном сырье и при высокой влажности исходной массы имеют наибольшие шансы подавить все остальные типы брожения;

4) оптимальные температуры для маслянокислых бактерий колеблются в пределах 35–40 °С, но их споры переносят более высокие температуры;

5) маслянокислые бактерии чувствительны к кислотности и прекращают свою деятельность при рН ниже 4,2.

Эффективными мерами против возбудителей маслянокислого брожения являются быстрое подкисление растительной массы, подвяливание влажных растений. Существуют биологические препараты на основе молочнокислых бактерий для активации молочнокислого брожения в силосе. Кроме того, разработаны химические вещества, которые оказывают бактерицидное (подавляющее) и бактериостатическое (тормозящее) действие на маслянокислые бактерии.

2.7. Гнилостные бактерии (Bacillus, Pseudomona)

Представители рода бацилл (Bac. mesentericus, Вac. megatherium) сходны по своим физиолого-биохимическим особенностям с представителями клостридий, но, в отличие от них, способны развиваться в аэробных условиях. Поэтому они одними из первых включаются в процесс ферментации и чаще всего встречаются в количестве 104–106, но в некоторых случаях (например, при нарушении технологии) – до 108–109. Эти микроорганизмы являются активными продуцентами разнообразных гидролитических ферментов. Они используют в качестве питательных веществ различные белки, углеводы (глюкозу, сахарозу, мальтозу и др.) и органические кислоты.

Значительная часть белкового азота (до 40 % и более) под действием бацилл может быть переведена в аминную и аммиачную формы, а часть аминокислот – в моно- и диамины, особенно в условиях медленного подкисления массы. Декарбоксилирование имеет свой максимум в кислой среде, тогда как дезаминирование происходит в нейтральной и щелочной. При декарбоксилировании могут возникать амины. Некоторые из них обладают токсическими свойствами (индол, скатол, метилмеркаптан и др.), и при скармливании силоса эти вещества, поступая в кровь, вызывают различные заболевания и отравления сельскохозяйственных животных. Некоторые виды бацилл сбраживают глюкозу, образуя 2,3-бутилен-гликоль, уксусную кислоту, этиловый спирт, глицерин, углекислоту и в следовых количествах муравьиную и янтарную кислоты.

Важным свойством гнилостных бактерий, которое имеет значение для протекающих в кормовой массе процессов, является их способность к спорообразованию. В некоторых разложившихся силосах, особенно кукурузном, были обнаружены бактерии, относящиеся к видам Bacillus. Они, видимо, свойственны силосу, а не привнесены извне (с воздухом). Из многих силосов после их длительного хранения выделяются бациллы, хотя в исходной траве они почти не обнаруживаются.

Исходя из этого, было высказано предположение, что некоторые гнилостные бактерии могут в анаэробных условиях развиваться из спор.

Таким образом, исходя из вышесказанного, основными особенностями для возбудителей гнилостного брожения являются следующие:

1) гнилостные бактерии не могут существовать без кислорода, поэтому в герметичном хранилище гниение невозможно;

2) они разлагают прежде всего белок (до аммиака и токсичных аминов), а также углеводы и молочную кислоту (до газообразных продуктов);

3) гнилостные бактерии размножаются при рН выше 5,5. При медленном подкислении корма значительная часть белкового азота переходит в аминную и аммиачную формы;

4) важным свойством гнилостных бактерий является их способность к спорообразованию. В случае длительного хранения и скармливания силоса, в котором дрожжи и маслянокислые бактерии разложат большую часть молочной кислоты или она будет нейтрализована продуктами разложения белка, гнилостные бактерии, развиваясь из спор, могут начать свою разрушительную деятельность.

Главным условием ограничения существования гнилостных бактерий является быстрое заполнение, хорошая трамбовка, надежная герметизация силосохранилища. Потери, вызываемые возбудителями гнилостного брожения, можно снизить при помощи химических консервантов и биопрепаратов.

2.8. Плесневые грибы и дрожжи

Оба эти типа микроорганизмов относятся к грибам и являются весьма нежелательными представителями микрофлоры силоса, они легко переносят кислую реакцию среды (рН 3,2 и ниже). Поскольку плесневые грибы (Penicillium, Aspergillus и др.) являются облигатными аэробами, то они начинают развиваться сразу после заполнения хранилища, но с исчезновением кислорода развитие их прекращается.

В правильно заполненном силосохранилище с достаточной степенью уплотнения и герметизацией это происходит уже через несколько часов. Если в силосе имеются очаги плесени, значит, вытеснение воздуха было недостаточным или герметизация была неполной. Опасность плесневения особенно велика в силосе из подвяленного растительного материала, так как такой корм, особенно его верхние слои, очень трудно уплотнить. В наземных буртах надежная герметизация практически недостижима. Почти 40 % силоса заплесневает; корм имеет разложившуюся, мажущуюся структуру и становится непригодным к скармливанию животным.

Дрожжи (Hansenula, Pichia, Candida, Saccharomyces, Тorulopsis) развиваются непосредственно после заполнения хранилищ, так как они являются факультативными анаэробами и могут развиваться при незначительных количествах кислорода в силосе. Кроме того, они обладают высокой устойчивостью к температурному фактору и низкому уровню рН.

Дрожжевые грибы прекращают свое развитие только при полном отсутствии кислорода в силосохранилище, но небольшие их количества обнаруживаются в поверхностных слоях силоса.

В анаэробных условиях они используют простые сахара (глюкозу, фруктозу, маннозу, сахарозу, галактозу, рафинозу, мальтозу, декстрины) по гликолитическому пути и развиваются за счет окисления сахаров и органических кислот:

С6Н12О6 = 2С2Н5ОН + 2СО2 + 0,12 МДж.

сахар спирт углекислый газ Полное использование сахаров и органических кислот приводит к тому, что кислая среда силоса сменяется щелочной, создаются благоприятные условия для развития маслянокислой и гнилостной микрофлоры.

При спиртовом брожении наблюдаются большие потери энергии.

Если при молочнокислом брожении теряется 3 % энергии сахара, то при спиртовом – более половины. В аэробных условиях окисление углеводов дрожжами приводит к получению воды и СО2. Некоторые дрожжи используют пентозы (Д-ксилозу, Д-рибозу), полисахариды (крахмал).

Негативное действие дрожжей в процессах вторичного брожения состоит в том, что они развиваются за счет окисления органических кислот, наступающего после законченного брожения при доступе воздуха. В результате окисления молочной и других органических кислот кислая реакция среды сменяется на щелочную – до рН 10,0.

В результате этого снижается качество силоса из кукурузы, а также из «глубоко» провяленных трав, т. е. кормов с наилучшими показателями по продуктам брожения.

На основании вышеизложенного, плесневые грибы и дрожжи можно охарактеризовать следующим образом:

1) плесневые грибы и дрожжи относятся к нежелательным представителям аэробной микрофлоры;

2) негативное действие плесневых грибов и дрожжей состоит в том, что они вызывают окислительный распад углеводов, белков и органических кислот (в том числе молочной);

3) плесневые грибы и дрожжи легко переносят кислую реакцию среды (рН ниже 3,0 и даже 1,2);

4) плесневые грибы выделяют опасные для здоровья животных и людей токсины;

5) дрожжи, являясь возбудителями вторичных процессов брожения, приводят к аэробной нестабильности силосов.

Ограничение доступа воздуха путем быстрой закладки, трамбовки и герметизации, правильная выемка и скармливание – вот решающие факторы, ограничивающие развитие плесневых грибов и дрожжей. Для подавления развития возбудителей вторичного брожения рекомендованы препараты с фунгистатической (фунгицидной) активностью.

Обобщая вышеизложенное, микроорганизмы в силосе можно разделить на полезные (молочнокислые бактерии) и вредные (маслянокислые, гнилостные бактерии, дрожжи и плесневые грибы).

Исходя из физиолого-биохимических особенностей микроорганизмов, встречающихся в силосе, быстрое снижение рН (до 4,0 и менее) тормозит размножение многих нежелательных микроорганизмов.

В таком интервале рН наряду с молочнокислыми бактериями могут существовать только плесневые грибы и дрожжи. Но для них требуется кислород. Поэтому для успешного силосования необходимо как можно быстрее удалить воздух из хранилища за счет надежной трамбовки и быстрого заполнения хранилища, надлежащего укрытия. Тем самым обеспечиваются благоприятные условия для молочнокислых бактерий (анаэробов).

В идеальном случае, а именно, при достаточном содержании в исходном растительном материале водорастворимых углеводов и анаэробных условиях, молочнокислое брожение занимает доминирующее положение. Всего за несколько дней рН достигает своего оптимального уровня, при котором прекращаются нежелательные типы брожения.

При силосовании богатых протеином кормовых растений необходимо их провяливать или использовать химические и биологические консерванты, которые подавляют (ингибируют) развитие нежелательных микроорганизмов и позволяют получить доброкачественный корм независимо от силосуемости и влажности исходного растительного сырья.

Кормовое сырье и корма при хранении являются благоприятной питательной средой для быстрого роста плесени. Из-за перепадов температуры днем и ночью происходит миграция влаги в хранилищах, что способствует ускоренному росту плесени и размножению насекомых.

Корма, пораженные плесенью и насекомыми, плохо поедаются сельскохозяйственными животными и птицей, вызывают угнетение кровеносной и иммунной систем, нарушают работу почек. В конечном итоге ухудшается состояние здоровья и продуктивность животных и птицы, увеличиваются расходы на их содержание и лечение, снижается экономическая эффективность животноводства. Известно, что животные поедают плесневое сено крайне неохотно или вовсе не едят его. Непригоден в качестве корма также плесневелый силос и сенаж. Ядовитые токсины, выделяемые некоторыми культурами грибов, обнаруживаются в силосе из наземных буртов и земляных силосохранилищах или в верхних слоях кормовой массы крупных силосных траншей при плохом уплотнении и негерметичном укрытии свежескошенной и особенно подвяленной массы.

Грибки используют много питательных веществ для своего собственного роста. Содержание питательных веществ в корме в результате жизнедеятельности колонии из 40 000 грибков за одну неделю уменьшается на 1,5–1,8 %; происходит ухудшение вкусовых качеств, так как заражение зерна некоторыми видами грибков приводит к появлению характерного отталкивающего запаха плесени и неприятного вкуса.

Изменяются физические свойства кормового сырья, что проявляется в образовании плотных комков, затрудняющих его транспортировку и приводящих к закисанию зерна в силосах; в наличии микотоксинов, приводящем к ухудшению здоровья, задержке роста животных и снижению их продуктивности.

Разные плесневые грибки продуцируют разные микотоксины, при этом некоторые из них продуцируют несколько микотоксинов: Penicillium – охратоксины; Fusarium – Т-2 токсин, зеараленон, ДОН; Aspergillus – афлатоксины, охратоксины. В этом случае их негативное действие многократно усиливается.

Микотоксины не разрушаются при термической обработке кормов и, попадая с кормами в организм животных, накапливаются в мясе, яйцах, молоке. Поэтому их наличие в кормах представляет большую опасность не только для животных, но и для здоровья человека, так как некоторые из микотоксинов, в частности афлатоксины, являются канцерогенами и их попадание в пищу должно быть абсолютно исключено.

Для роста плесневых грибков необходим ряд условий:

1) температура. Оптимальная температура для роста плесневых грибков находится в интервале 18–30 °С. Тем не менее некоторые их виды интенсивно растут и размножаются при температуре 4–8 °С;

2) влажность.

Для уменьшения содержания влаги в зерне производители вынуждены его досушивать до указанных значений. Это сопряжено с большими затратами энергии и трудовых ресурсов в течение крайне ограниченного периода времени. Однако даже при закладке на хранение зерна с нормативной влажностью такой фактор, как миграция влаги, оказывает отрицательное влияние на качество зерна при хранении.

Так, при хранении зерна, имеющего начальную влажность около 13 %, происходит миграция влаги, вызванная разницей температур вверху (35 °С) и внизу (25 °С) хранилища. Через месяц влажность зерна, находящегося внизу, составила 11,8 %, а вверху – 15,5 %. В процессе хранения зерна нормальной влажности на некоторых участках часто формируются оптимальные условия для быстрого роста плесени.

Имеются весомые медицинские свидетельства о легочных заболеваниях животных и работников, имеющих дело с плесневелым сеном и зерном. И у людей, и у животных они вызываются вдыханием термофильных микроорганизмов (Micropolispora, Тhermo-actinomyces, Aspergillus).

По данным Всемирной организации здравоохранения, около 25 % мировых поставок зерна заражены микотоксинами, поэтому важно бороться именно с их источником – плесенью.

Имеются многие другие потенциально опасные плесени, способные вызывать целый ряд микотоксикозов, в том числе снижение плодовитости, абортирование и общее ухудшение здоровья. Все эти заболевания вызываются микотоксинами, вырабатываемыми следующими грибами: Aspergillus, Fusarium, Penicillium (афлатоксины, цераленон, охратоксин).

Основной причиной снижения качества комбикормов является поражение их плесневыми грибками и впоследствии зараженность микотоксинами.

В комбикорм грибки попадают в основном с зерном и продуктами его переработки, частично он дополнительно обсеменяется в процессе изготовления, транспортировки и хранения. Являясь мертвым субстратом, весьма доступным для микроорганизмов, комбикорм скорее, чем зерно, подвергается воздействию грибков. Этому способствует его высокая гигроскопичность, а также богатый запас питательных веществ, особенно в связи с обогащением его витаминами, микроэлементами и другими добавками.

Вследствие роста и размножения плесневых грибков в комбикорме происходит:

Снижение энергетической и питательной ценности его, так как для своей жизнедеятельности грибки используют питательные вещества пораженного ими корма;

Ухудшение вкусовых качеств, так как даже небольшое количество плесени в корме создает пыль, неприятный запах и вкус, что является причиной плохой поедаемости корма животными;

Изменение физических показателей комбикорма, проявляющееся в выделении грибками дополнительного количества воды и в слеживании корма в результате роста мицелия грибков;

Заражение корма микотоксинами, продуцируемое грибками, что ведет к задержке роста животных, снижению их продуктивности, конверсии корма и вызывает постоянное отравление всего поголовья скота.

Комбикорм, состоящий из дробленого зерна, отрубей, является благодатной почвой для прорастания плесени. Чем дольше срок хранения сырья, готового комбикорма, тем больше риск поражения его плесенью. При благоприятных условиях значительное размножение грибков может произойти за очень короткое время, грибницы грибков вырастают за 1 час на 1 мм, поэтому необходимо проводить профилактическую обработку противогрибковыми препаратами, что экономически более оправдано, чем бороться с грибками и микотоксинами в уже заплесневелых кормах.

Наиболее практичным и надежным способом защиты кормов от плесени является применение препаратов на основе органических кислот и их солей. Они ингибируют рост микроорганизмов путем закисления цитоплазмы клетки, что приводит к гибели клетки. Общепризнанным ингибитором плесени является пропионовая кислота. Однако применение пропионовой кислоты в чистом виде связано с рядом трудностей: кислота сильно разъедает металлические детали машин и механизмов, обладает резким едким запахом, летучестью и может привести к серьезным ожогам работающего с ней персонала и к коррозии металлических частей транспортеров и смесителей. В ингибиторе плесени микокорме жидком пропионовая кислота находится в составе специально разработанного компанией «Франклин» (Голландия) буферного комплекса, который позволяет использовать препарат без ущерба для оборудования и персонала. Входящие в состав микокорма жидкого пропионовая и фосфорная кислоты обладают определенным уровнем активности по отношению к плесневым грибкам, дрожжам и бактериям. Каждая из упомянутых кислот имеет свои преимущества и недостатки в отношении спектра ингибируемых микроорганизмов, удобства в обращении и стоимости. Используемые вместе в оптимально подобранных соотношениях, эти органические кислоты сохраняют свои преимущества и компенсируют индивидуальные недостатки.

3. МАСШТАБЫ ПОТЕРЬ В КОНСЕРВИРОВАННЫХ КОРМАХ,

ВЫЗВАННЫХ ДЕЯТЕЛЬНОСТЬЮ МИКРООРГАНИЗМОВ

При составлении баланса кормов необходимо учитывать потери при заготовке и хранении консервированных кормов. Существует много схем, показывающих, что общие потери складываются из потерь в поле, хранилищах и происходят еще во время уборки зеленой массы.

В данной лекции рассматривается величина потерь, вызванных деятельностью микроорганизмов, которые зачастую недооцениваются и при неквалифицированной работе могут достигать огромных размеров.

3.1. Потери при брожении

После отмирания растительных клеток в заполненном и хорошо уплотненном хранилище начинается интенсивное разложение и преобразование питательных веществ размножающимися микроорганизмами. Происходят потери в результате образования бродильных газов («угар»), потери в верхних и боковых слоях, потери из-за вторичных процессов брожения.

Непрерывное заполнение хранилищ (силосного, сенажного) позволяет значительно снизить образование газов. При быстром заполнении хранилища потери сухого вещества вследствие «угара» могут составлять 5–9 %. При растянутом заполнении соответствующие показатели могут достигать 10–13 % и более. Следовательно, путем непрерывного заполнения можно сократить потери от «угара» примерно на 4–5 %.

Следует учитывать, что в плохо уплотненном сенаже в результате процессов самосогревания происходит снижение переваримости протеина в два раза.

Интенсивное разложение питательных веществ происходит в верхних и боковых слоях в неукрытой силосной (сенажной) массы. При укрытии одной мякиной или без укрытия потери могут быть гораздо больше. Плесневые грибы, развиваясь, кладут начало сильному разложению белка. Продукты распада белка имеют щелочную реакцию и связывают молочную кислоту. Происходит также прямое разложение молочной кислоты. Перечисленные процессы ведут к повышению уровня рН и ухудшению качества корма. Даже если в момент открытия хранилища толщина испорченного слоя не превышает 10 см, следует иметь в виду, что этот слой первоначально имел толщину 20–50 см, а силос, находящийся под испорченным слоем, характеризуется высоким уровнем рН, содержит ядовитые токсины и непригоден для скармливания животным.

Потери, вызванные вторичными процессами брожения, могут достигать 20–25 %. Установлено, что первую стадию порчи силоса вызывают именно дрожжи совместно с аэробными бактериями, она связана с его разогреванием, снижением кислотности. При второй стадии порчи силоса происходит последующее заражение плесенью. Такой корм считается непригодным в том случае, если в нем содержится более 5 · 105 грибов. Уже после 5-дневного аэробного хранения в случае длительного скармливания или неправильной выемки из хранилища кукурузный силос даже с хорошим начальным рН 4,1, но уже имеющий 3 · 107 дрожжей, характеризуется астрономически высоким числом дрожжей и плесеней Streptomycetcn.

3.2. Кормовые микотоксикозы

Среди многочисленных факторов окружающей среды токсические вещества – микотоксины, образуемые микроскопическими грибами, в последнее время привлекают все большее внимание.

Микотоксинами называют ядовитые продукты обмена веществ (метаболизма) плесневых грибов, образующиеся на поверхности пищевых продуктов и кормов. Токсигенные грибы чрезвычайно широко распространены в природе, и при благоприятных условиях (повышенные влажность и температура) они могут поражать различные пищевые, кормовые, производственные вещества и наносить существенный урон народному хозяйству. Потребление продуктов и кормов, контаминированных (загрязненных микроорганизмами) этими грибами и микотоксинами, может сопровождаться тяжелыми заболеваниями человека и сельскохозяйственных животных – микотоксикозами.

В последнее время проблема микотоксикозов приобретает большие масштабы. В Республике Беларусь, как и во всем мире, значительная часть производимого зерна загрязнена микотоксинами, которые не только негативно и разрушающе влияют на организм животных, существенно снижая параметры продуктивности, качество получаемой продукции, увеличивая экономические издержки, но и представляют серьезную опасность для здоровья человека.

Потребление птицей загрязненного корма приводит к возникновению хронических микотоксикозов, характеризующихся широким спектром поражения печени, почек, желудочно-кишечного тракта, органов дыхания, нервной системы, что в конечном итоге негативно отражается на продуктивности и сохранности поголовья. Широкая распространенность данного негатива требует изыскания новых путей решения этой проблемы.

Микотоксикозы – это заболевания, возникающие при поедании животными растительных кормов, пораженных токсинобразующими грибами. Микотоксикозы не являются инфекционными заболеваниями, при их возникновении в организме животных не происходит иммунологическая перестройка и не развивается иммунитет. Микотоксикозам могут подвергаться все виды животных, птиц и рыб, болеет также и человек.

Общее количество видов грибов в мировой микрофлоре колеблется в пределах от 200 до 300 тыс. видов, токсигенных – от 100 до 150 видов. Наибольшую опасность для животных и человека представляют корма и продукты питания, загрязненные метаболитами грибов, которые относятся к двум группам.

Первая группа – так называемые грибы сопрофиты (складские грибы) родов Aspergillus и Penicillium. Это в основном грибы, не способные поражать вегетирующие растения и попадающие в зерновые, грубые корма и продукты питания главным образом в период их уборки, хранения и приготовления к скармливанию.

Отмечена определенная субстратная специфичность токсикообразующих микомицетов: виды рода Fusarium в основном поражают зерно хлебных злаков; Aspergillus – зернобобовые и ингредиенты комбикормов; Stachibotrys altemans, Dendrоdоchium toxicum поражают грубые корма.

Для развития грибов, продуцирующих микотоксины, требуются определенные условия. Спорынья и головня поражают растения на стадии вегетации. Склероций в почве развивается при температуре 22– 26 °С и влажности 25–30 %. Температура и влажность являются важнейшими факторами, способствующими росту и размножению токсичных грибов. Оптимальная влажность равна 25–30 %, наиболее благоприятная температура – 25–50 °С. Грубые корма (сено при влажности 16 %, солома – 15 % при хранении) грибами не поражаются.

Грубые корма с повышенной влажностью самосогреваются (этому способствуют микроорганизмы), и в них создаются благоприятные условия для развития микомицетов.

Самосогреванию подвергаются не только грубые корма, но и зерно, а также продукты его переработки (мука, комбикорм, отруби, зерноотходы и др.).

Очень важным моментом является выделение и изучение микотоксинов. По данным многих ученых, выделены и получили название от 80 до 2 000 различных микотоксинов, из них 47 высокотоксичных и 15 с канцерогенными и мутагенными свойствами (афлатоксины В и М, охратоксин А, зеараленон, Т-2 токсин, патулин, циклопиазоновая и пеницилловая кислоты и некоторые другие). К выделяемым в естественных условиях относятся афлатоксины, охратоксин А, патулин, Т-2 токсин, пеницилловая кислота и др.

Подавляющее число микотоксинов является экзотоксинами, т. е.

выделяется в субстрат, на котором растет гриб. Микотоксины могут оставаться в корме в течение длительного времени после гибели образовавшего их гриба. Поэтому внешний вид корма не всегда может служить критерием его безопасности. Микотоксины – низкомолекулярные соединения. Они устойчивы к высоким температурам, не разрушаются при обработке горячим паром, сушке, длительном хранении, действии кислот и щелочей. Макроорганизм не вырабатывает против них антитела, т. е. животные и человек на протяжении всей жизни остаются чувствительными к микотоксинам.

Наиболее распространенными микотоксикозами среди животных являются аспергиллотоксикозы, стахиботриотоксикоз, фузариотоксикозы, дендродохиотоксикоз, миротецитоксикоз, клавиценстоксикозы, пенициллотоксикозы, ризопусотоксикоз, токсикозы, вызываемые головневыми грибами.

Определены их химические формулы, физико-химические свойства, механизм действия; в некоторых странах рассчитаны минимальные допустимые концентрации этих микотоксинов в кормах для разных видов сельскохозяйственных животных и птицы; а также разработаны количественные лабораторные методы определения этих веществ в различных субстанциях. Ведется изучение и других, менее изученных микотоксинов, таких как эрготоксины и пр., которые также наносят существенный ущерб животноводству и птицеводству.

Широко известным является факт, что микотоксины, введенные в химически чистом виде, проявляют токсические свойства в гораздо меньшей степени, чем те же количества микотоксина, но произведенного в естественных условиях. Это происходит из-за того, что микроскопические грибы в процессе жизнедеятельности продуцируют различные токсины, число которых может доходить до нескольких десятков, и эти токсины проявляют сочетанный токсический эффект.

Лаборатории могут выявить лишь малую часть из уже известных микотоксинов. Синергидное действие микотоксинов изучено пока в минимальной степени, хотя на практике оно имеет огромное значение.

Трудность заключается в неповторимости и непредсказуемости качественного и количественного состава микотоксинов, синтезируемых различными видами грибов в различных условиях.

Известно также о кумулятивных свойствах микотоксинов. При наличии в кормах микотоксинов в количествах, ниже уровня чувствительности метода определения, возникает иллюзия их отсутствия и, соответственно, безопасности корма. Однако в течение нескольких дней скармливания таких кормов в результате кумуляции доза полученных токсинов достигает критической и проявляется каким-либо образом, преимущественно снижением аппетита, общим угнетением, нарушением пищеварения и т. д. В подавляющем большинстве случаев причину этих симптомов будут искать в чем угодно, но не в действии микотоксинов.

Другое возможное развитие событий, которое может долго оставаться незамеченным: микотоксины, накапливаясь, будут постепенно разрушать иммунную систему животного или птицы. Такое действие характерно почти для всех микотоксинов, но выявление его без применения специальных методов практически невозможно. Подобная картина наблюдается при обнаружении в кормах токсинов в предельно допустимых концентрациях. Эти результаты свидетельствуют о реальной возможности наличия в кормах многих других микотоксинов, которые не в состоянии выявить лабораторные исследования.

Микотоксины обладают одним общим свойством – они являются биоцидами, разрушающими живые клетки. По другим же свойствам, в том числе физико-химическим, микотоксины различаются очень значительно, именно это делает невозможным разработать единый эффективный метод борьбы с ними.

Наиболее распространенный сегодня метод – это адсорбция микотоксинов адсорбентами органического или неорганического происхождения. Метод основан на физических свойствах молекул микотоксинов – их полярности и размере молекул. Поэтому различные по природе адсорбенты по-разному адсорбируют микотоксины.

Методом адсорбции эффективно удаляются полярные микотоксины (это в основном афлатоксины, в некоторой степени фумонизины).

В то же время неполярные токсины одними адсорбентами практически не сорбируются, а другими сорбируются недостаточно эффективно.

Степень нейтрализации микотоксинов зависит и от адсорбционной емкости адсорбента. Этот показатель и степень пораженности корма определяют норму ввода адсорбента в корма. Существенными свойствами адсорбентов являются способность работать в широком интервале рН и необратимость связывания микотоксинов. Известно, что микотоксины могут сорбироваться на адсорбент в желудке и десорбироваться при щелочной среде кишечника. В результате эффективность подобного адсорбента будет сомнительной. Некоторые адсорбенты обладают свойством адсорбировать еще и питательные вещества, витамины, микроэлементы.

Существуют трудности в оценке эффективности адсорбентов, что в значительной степени усложняет их отбор и получение объективных результатов. Большинство классических методов in vitro не может даже приблизиться к реальным условиям желудочно-кишечного тракта.

Эксперименты in vivo слишком сложны и трудно воспроизводимы.

Поэтому продолжаются поиски моделей, которые позволили бы воспроизвести условия, максимально приближенные к природе и позволяющие получить более объективные результаты.

Большинство ведущих токсикологов считает, что эффективная борьба с микотоксинами возможна при использовании лишь нескольких взаимодополняющих способов их элиминации из корма, которые имеют разные механизмы действия и направлены против различных групп токсинов. Исследования в этой области ведутся очень интенсивно. Продолжаются поиски оптимальных неорганических и органических адсорбентов.

В настоящее время созданы гидратированные натрий, кальций, алюмосиликаты, которые признаны лучшими из неорганических адсорбентов. Это доказано лабораторными и производственными исследованиями многих независимых научных центров.

Новое направление – нейтрализация микотоксинов. Нейтрализация токсического действия микотоксинов ферментами – это естественный способ борьбы микроорганизмов за существование. Как показали многочисленные исследования, он прекрасно подходит для нейтрализации микотоксинов в организме сельскохозяйственных животных и птицы.

Специально подобранные ферменты модифицируют микотоксины до безопасных веществ, воздействуя на ту часть молекулы, которая ответственна за токсическое действие. Такой подход особенно важен и, возможно, единственно эффективен для неполярных микотоксинов, которые практически не связываются адсорбентами (трихотецены, зеараленон, охратоксины).

4. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ КОРМОВ

Митрошенкова А.Е. Поволжская государственная социально-гуманитарная академия Самара, Россия ECOLOGICAL AND BIOLOGICAL CHARAC...»

«Программа дисциплины «Биология» Авторы: проф. Г.Н. Огуреева, проф. В.М. Галушин, проф. А.В. Бобров Целями освоения дисциплины являются: получение фундаментальных знаний об организации живых организмов и особенностях их функционирования; получени...»

«Аннотации к рабочим программам дисциплин основной профессиональной образовательной программы высшего образования по направлению подготовки 03.03.02 Физика с направленностью (профилем) «Физика конденсированного состояния вещества» Б1.Б.1 Иностранный язык Данная дисципл...»

«I. Аннотация Предмет «Физиология растений» относится к числу фундаментальных биологических дисциплин. Изучение физиологии растений в настоящее время приобретает все большее теоретическое и практическое значение в связи с огромными успехами молекулярно...» УДК 81`27 ПОЛИТИЧЕСКАЯ ЛИНГВИСТИКА: НАУКА – НАУЧ...» ИОНЦ « экология и природопользование » биологический факультет экологии кафедра МОРФОЛОГИЯ И АНАТОМИЯ ВЫСШИХ РАСТЕНИЙ Вопросы...» «Саратовский государственный аграрный университет имени Н. И. Вавилова» ФИЗИОЛОГИЯ краткий курс лекций для аспирантов 3 курса Направление подготовки 06.06.01. Биологические науки Пр...» современной «большой» экологии - ее теории, законы, прави...»УДК 633.491:631.535/544.43 ВЛИЯНИЕ РАСТЕНИЙ ХОЗЯЕВ ВИРУСОВ КАРТОФЕЛЯ И ЛЕТА ТЛЕЙ – ПЕРЕНОСЧИКОВ ВИРУСОВ НА ПОРАЖЕННОСТЬ КАРТОФЕЛЯ В ОРИГИНАЛЬНОМ СЕМЕНОВОДСТВЕ Рябцева Т.В., Куликова В.И. ГНУ Кемеровский НИИСХ Россельхозакадемии, г. Ке...»

«1. Пояснительная записка Программа вступительного испытания Программа вступительного испытания включает материалы для проверки знаний и компетенций поступающих в магистратуру по направлению подготовки 49.04.01 Физическая культура «Медикобиологическое сопровождение физической культур...»

«При разработке программы учебной дисциплины «Медико-биологические основы безопасности» в основу положены: ФГОС ВПО по направлению подготовки бакалавров 18.03.02 (241000.62) «Энергои ресурсосберегающие процессы в химической технологии, нефтехимии и биотехнологии», утвержденный Министерством образования и науки 24.01...»

«УДК 542. 952. 6. 691. 175. 5/8 КИНЕТИКА РЕАКЦИИ ГИДРОКАРБОМЕТОКСИЛИРОВАНИЯ ОКТЕНА-1 ПРИ КАТАЛИЗЕ СИСТЕМОЙ Pd(OAc)2 – PPh3 – p-TsOH © 2013 Н. Т. Севостьянова1, С. А. Баташев2, А. М. Демерлий3, В. А. Аверьянов...»

2017 www.сайт - «Бесплатная электронная библиотека - разные матриалы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам , мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.

КАТЕГОРИИ

ПОПУЛЯРНЫЕ СТАТЬИ

© 2024 «gcchili.ru» — Про зубы. Имплантация. Зубной камень. Горло