Шиитаке Отдельные исследования Влияние бад «Шиитаке серия фунго-ши. Применение экстракта весёлки

Описание:

Компоненты:
древесный японский гриб шиитаке(Lentinus edodes), древесный гриб трутовик лиственничный(Fomitopsis officinalis) и гриб Лисички (Cantharellus cibarius).
Наша печень-это мощный фильтр, который препятствует попаданию в организм вредных ядов, токсинов и чужеродных белков. Кроме этого, печень является огромной "фабрикой" по производству гормонов, биологически активных веществ, витаминов и...холестерина. Да, именно в печени образуется холестерин. Сам по себе холестерин - очень важное вещество. На его основе организм создает гормоны, желчные кислоты и многие другие полезные вещества. Если печень страдает, а это происходит в последнее время у все большего и большего количества людей, то она использует меньше холестерина для создания желчных кислот. Образуется избыток холестерина в крови и в желчи. Это приводит к развитию атеросклероза и к образованию камней желчного пузыря. Нужно помочь печени заработать в полную силу, очиститься и тогда лишний холестерин будет использован по назначению.
У людей со здоровой печенью, камни желчного пузыря не образуются, и атеросклероз развивается гораздо реже!
Поэтому вопрос о здоровой печени, это не просто забота о конкретном органе, а обо всем организме в целом.
Ведь причина многих заболеваний - недостаточная функциональность печени. Практически у всех к тридцати-сорока годам печень увеличена, то есть она уже не справляется с нагрузкой. Да и как справиться, если организм буквально атакован канцерогенами, красителями, синтетическими витаминами, которыми активно "оздоровляют" пищевые продукты.
Существующие методики очищения печени действенны (я имею в виду, например, популярный метод очищения при помощи оливкового масла и лимонного сока). Но их недостаток в том, что, во-первых, это достаточно сложная и изнуряющая процедура, а во-вторых, это мощный удар по печени, и в особенности по желчному пузырю. "Грибное очищение" печени на сегодняшний день самое эффективное и безопасное. Эта безопасность достигается за счет минимальных доз приема препаратов (6 капсул в день), которые действуют методом" зубной щетки", а не "бульдозера", не травмируя ни саму печень, ни желчные протоки.
Результаты видны через неделю: билирубин, приходит в норму, кроме того, процедура самая щадящая, и на нее не надо тратить много времени. К тому же, лисички уничтожат любые яйца гельминтов и самих гельминтов, а шиитаке проведут атаку на мутированные онкологические клетки, что обезопасит организм от онкологии!
Итак, методика очищения печени грибными препаратами совсем не сложная и ее вполне абсолютно безбоязненно можно провести в домашних условиях.
Требуется одна упаковка грибов: шиитаке, трутовика лиственничного, лисичек.
В настоящее время в целях удобства для потребителей в приобретении и применении фунгопрепаратов входящих в предлагаемую систему грибного очищения печени, ООО "Шиитаке", разработало и выпускает систему очищения печени "АКУРА" в состав которой входят следующие препараты из лекарственных грибов:
Упаковка:
1 бп "Фунго-Ши Шиитаке" - 60 капсул по 75 мг.;
1 бп "Фунго-Ши Лисички" - 60 капсул по 110 мг.;
1 бп "Фунго-Ши Трутовик" - 60 капсул по 30 мг.
Состав:
«Фунго-Ши Шиитаке» - концентр. вытяжка гриба Шиитаке (Lentinus edodes)
«Фунго-Ши Трутовик» - концентр. вытяжка гриба Трутовик лиственничный (Fomitopsis)
«Фунго-Ши Лисички» - концентрированная вытяжка гриба Лисички (Cantharellus cibarius)
Методика очищения печени грибными препаратами совсем не сложная и ее вполне, абсолютно безбоязненно, можно провести в домашних условиях. Методика рассчитана на 30 дней, рекомендуется диета, примерное меню которой мы приводим ниже.
Препарат "Фунго-Ши Шиитаке" - по 2 капсулы утром за 15-30 мин до завтрака. Завтрак: апельсиновый или грейпфрутовый сок, тертая морковка или свекла (можно с чесноком), любой овощной салат.
Препарат "Фунго-Ши Лисички" - по 2 капсулы за 15 минут до обеда. Обед: любой овощной суп, тушенные овощи, яйцо вкрутую.
Препарат "Фунго-Ши Трутовик - по 2 капсулы перед сном (интервал после последнего приема пищи желательно мин 1 час). Ужин: фрукты, кусочек сыра.
Противопоказания: беременность, лактация (не проводились клинические исследования в этих группах), индивидуальная непереносимость компонентов, дети до 3 лет. Назначения детям с 3 до 12 лет - половина от взрослой дозы. С 12 лет взрослая доза.
Условия хранения: хранить в сухом, защищенном от света месте при комнотной температуре, в недоступном для детей месте.
Срок годности 2 года.

Товар есть в наличии

Не является медикаментом
Результат зависит от индивидуальных
особенностей организма.

Цена: 2 250 руб.

В корзине 0 ед.

Применение экстракта весёлки

В комплексной терапии экстракт весёлки применяют:

• злокачественных опухолях (саркома, меланома, лейкоз и другие онкологические заболевания)– входит в состав т.н. "грибной тройчатки";
• доброкачественных опухолях (полипы, кисты, аденомы гипофиза, аденомы простаты и др.);
• гипертония (в сочетании с шиитаке);
• заживление язв при наружном применении.

• Профилактический курс применения экстракта весёлки взрослым– по 2-е капсулы 3 раза в день во время еды. Продолжительность профилактического курса: 3-4 недели.
• При лечении, дозировки экстракта весёлки каждый раз назначаются индивидуально, с учётом конкретного заболевания!
• Минимальный курс - 2 упаковки. , терапевтический курс 3-4 месяца

Как купить

Чтобы купить экстракт весёлки Фунго-Ши в аптеке трав Лето-шоп, позвоните по телефону 8 929 929 03 03 или оформите заказ на сайте самостоятельно. Приезжайте к нам в магазин или закажите доставку по Москве или любой город России.

Как сэкономить деньги при лечении экстрактом весёлки?

Мы понимаем, что эффективное лечение может быть очень затратным. Поэтому делаем Вам выгодное предложение: купите 5 упаковок экстракта весёлки и получите еще одну упаковку В ПОДАРОК!

Наша компания - прямой дистрибьютор. С производителем лекарственных сборов мы работаем без посредников. Поэтому у нас более низкие цены по сравнению с другими продавцами – аптеками или магазинами!

Когда вы поборете свой недуг с помощью купленных у нас средств, напишите нам об этом, поделитесь своим опытом с другими. Возможно, именно ваш рассказ поможет кому-то принять правильное решение. А в качестве благодарности за отзыв мы гарантируем 10%-ую скидку на следующий заказ!

У вас есть возможность получить свой заказ на дом БЕСПЛАТНО. Если сумма вашей единовременной покупки превысит 3000 рублей, мы доставим заказанные вами товары совершенно бесплатно!

Мы бережем Ваше здоровье. Поэтому предлагаем Вам только те природные средства, которые проверены и сертифицированы на территории Российской Федерации. Наши производители ведут строгий радиационный и токсикологический контроль всех собранных трав.

Метки

Весёлка экстракт Фунго-Ши инструкция от производителя:

• Производитель: Фунго Ши (Ирина Филиппова) Россия
• Состав: содержит концентрированную вытяжку из Весёлки обыкновенной (Phallus impudicus), приготовленный по методике, исключающей разрушение полисахаридов и фитонцидов и полностью усваиваемый организмом.
• Масса: 60 капсул по 275.0 мг.
• Цена: 2250 р

Противопоказания:

индивидуальная непереносимость компонентов, беременность, период лактации (не проводились клинические исследования в этих группах), нежелательно применение детям до 5 лет. Не является лекарственным средством.

Наша печень-это мощный фильтр, который препятствует попаданию в организм вредных ядов, токсинов и чужеродных белков. Кроме этого, печень является огромной "фабрикой" по производству гормонов, биологически активных веществ, витаминов и...холестерина. Да, именно в печени образуется холестерин. Сам по себе холестерин - очень важное вещество. На его основе организм создает гормоны, желчные кислоты и многие другие полезные вещества. Если печень страдает, а это происходит в последнее время у все большего и большего количества людей, то она использует меньше холестерина для создания желчных кислот. Образуется избыток холестерина в крови и в желчи. Это приводит к развитию атеросклероза и к образованию камней желчного пузыря. Нужно помочь печени заработать в полную силу, очиститься и тогда лишний холестерин будет использован по назначению.

У людей со здоровой печенью, камни желчного пузыря не образуются, и атеросклероз развивается гораздо реже!

Поэтому вопрос о здоровой печени, это не просто забота о конкретном органе, а обо всем организме в целом.

Ведь причина многих заболеваний - недостаточная функциональность печени. Практически у всех к тридцати-сорока годам печень увеличена, то есть она уже не справляется с нагрузкой. Да и как справиться, если организм буквально атакован канцерогенами, красителями, синтетическими витаминами, которыми активно "оздоровляют" пищевые продукты.

Существующие методики очищения печени действенны (я имею в виду, например, популярный метод очищения при помощи оливкового масла и лимонного сока). Но их недостаток в том, что, во-первых, это достаточно сложная и изнуряющая процедура, а во-вторых, это мощный удар по печени, и в особенности по желчному пузырю. "Грибное очищение" печени на сегодняшний день самое эффективное и безопасное. Эта безопасность достигается за счет минимальных доз приема препаратов (6 капсул в день), которые действуют методом" зубной щетки", а не "бульдозера", не травмируя ни саму печень, ни желчные протоки.

Результаты видны через неделю: билирубин, приходит в норму, кроме того, процедура самая щадящая, и на нее не надо тратить много времени. К тому же, лисички уничтожат любые яйца гельминтов и самих гельминтов, а шиитаке проведут атаку на мутированные онкологические клетки, что обезопасит организм от онкологии!

Итак, методика очищения печени грибными препаратами совсем не сложная и ее вполне абсолютно безбоязненно можно провести в домашних условиях.

Требуется одна упаковка грибов: шиитаке, трутовика лиственничного, лисичек.

В настоящее время в целях удобства для потребителей в приобретении и применении фунгопрепаратов входящих в предлагаемую систему грибного очищения печени, ООО "Шиитаке", разработало и выпускает систему очищения печени "АКУРА" в состав которой входят следующие препараты из лекарственных грибов:

Методика очищения печени грибными препаратами совсем не сложная и ее вполне, абсолютно безбоязненно, можно провести в домашних условиях. Методика рассчитана на 30 дней, рекомендуется диета, примерное меню которой мы приводим ниже.

Препарат "Фунго-Ши Шиитаке" - по 2 капсулы утром за 15-30 мин до завтрака. Завтрак: апельсиновый или грейпфрутовый сок, тертая морковка или свекла (можно с чесноком), любой овощной салат.

Препарат "Фунго-Ши Лисички" - по 2 капсулы за 15 минут до обеда. Обед: любой овощной суп, тушенные овощи, яйцо вкрутую.

Препарат "Фунго-Ши Трутовик - по 2 капсулы перед сном (интервал после последнего приема пищи желательно мин 1 час). Ужин: фрукты, кусочек сыра.

Противопоказания: беременность, лактация (не проводились клинические исследования в этих группах), индивидуальная непереносимость компонентов, дети до 3 лет. Назначения детям с 3 до 12 лет - половина от взрослой дозы. С 12 лет взрослая доза.

Условия хранения: хранить в сухом, защищенном от света месте при комнотной температуре, в недоступном для детей месте.

Срок годности 2 года.

Шиитаке

Отдельные исследования
Влияние бад « Ш иитаке серия фунго-ши» на метаболизм ксенобиотиков и антиоксидантную активность печени и ее антирадикальная и иммуномодулирующая активность в системах in vitro и in vivo

A. H. Разин, И.А. Филиппова ООО «Шиитаке»

М.Ю. Волков Управление начальника войск радиационной, химической и биологической за­щиты

В.П. Дерягина, Н.И. Рыжова Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина, РАМН

Биологически активная добавка (БАД) «Шиитаке серии Фунго-Ши», разра­ботанная на основе японского гриба Lentinus edodes (шиитаке), характеризуется сложным составом, включающим полисахариды, простые сахара, аминокисло­ты, липиды, алкалоиды, фенолы, витамины группы В, С, эргостеролы, мине­ральные вещества и др. соединения. Его биорегулирующие эффекты связыва­ют, прежде всего, с полисахаридом лентинаном, обладающим иммуномодули­рующим действием. Антирадикальные свойства гриба мало изучены; основыва­ясь лишь на свойствах входящих в него соединений, можно ожидать преобла­дания антиоксидантной активности (АОА), в то же время не исключается и на­личие прооксидантных свойств у экстракта из этого вида гриба.

Для оценки АОА БАД (водрастворимый порошок «Шиитаке серии Фунго- Ши») использовали тест-систему, предложенную Ю.О. Теселкиным и соавт. (1997). Метод основан на способности антиоксидантов продукта перехватывать свободнорадикальные соединения (супероксидный анион-радикал, гидрок­сильный радикал, феррил-радикалы), образующиеся в системе гемоглобин – пероксид водорода – люминол и подавлять люминолзависимую хемилюминес­ценцию (ХЛ). Оценку АОА БАД проводили по двум параметрам – по времен­ному интервалу задержки (латентному периоду) развития ХЛ и по максималь­ной интенсивности ХЛ. Водный экстракт из грибов (экстрагирование в течение 15 мин) вносили в реакционную смесь в растворе Хенкса перед инициировани­ем свободнорадикального окисления до достижения концентраций 50, 100, 200, 300, 500, 700 мкг/мл (в расчете на исходный продукт). В диапазоне исследуе­мых концентраций (но не 50 мкг/мл) регистрируется задержка развития и од­новременное снижение максимума ХЛ, при этом выявляется дозозависимое ан­тирадикальное действие экстракта, определяемое как по первому, так и по вто­рому параметрам (табл. 1).

Изучение действия БАД на клеточный состав крови, прежде всего, за счет нейтрофилов, доля которых возрастает до 63,5-81 %, БАД не влияет на спон­танную ХЛ и умеренно усиливает (в 1,2-1,5 раза) фагоцитозависимую хемилю­минесцентную активность нейтрофилов, определяемую по образованию актив­ных форм кислорода.

Действие экстракта вызывает реакцию, сходную с реакцией ранней фазы вос­паления, когда в очаге инфекции больше всего активированных нейтрофилов.

В микросомах и фракции цитозоля, выделенных из печени, определяли ак­тивность ключевых ферментов II фазы метаболизма ксенобиотиков – хинон­редуктазы (Benson А, Hunkeler M, Talalay P., 1980), глутатионтран-феразы (Habig W.H., Pabst M, Jocoby W., 1974),UDP – глюкуронозилтран-сферазы с р-нитрофенилом в качестве акцептора (Burchell В., Weatherill Р., 1981). Счита­ют, что основной механизм, регулирующий неоплазию, заключается в балансе между активностью ферментов фазы I (активирующими канцерогены) и фер­ментов фазы II (детоксицирующими их). Эти ферменты вносят значительный вклад в обеспечение антиоксидантного потенциала клетки, осуществляя деток­сикацию высокореактивных эпоксидов, органических перекисей, электрофиль­ных соединений. Глутатионтрансфераза и хинонредуктаза эффективно восста­навливают липидные гидропероксиды.

Активность макрофагов и нейтрофилов перитонеального содержимого у мы­шей F, (С57В1хСВА), которым вводили экстракт внутрибрюшинно, показыва­ет значимое повышение общего количества клеток в перитонеальной жидко­сти и, в отличие от пероксидазы, они способны восстанавливать гидропероксиды фосфолипидов в мембранах. Как видно из представленных данных, введе­ние здоровым мышам БАД существенно не влияло на активность локализован­ной в цитозоле лутатионтрансферазы, но достоверно повышало (на 47,8 %) ак­тивность хинонредуктазы (табл. 2). В то же время активность микросомальной UDP-глюкуронозил-трансферазы оставалась на уровне контроля.

Измерение активности антиоксидантных ферментов в печени мышей с АКЭ не выявило потенцирующего действия грибов на активность хинонредуктазы, глутатионтрансферазы, глюкуронозилтрансферазы и антиоксидантную актив­ность (FRAP).

Выявлено наличие умеренного антирадикально­го и иммуномодулирующего действия, проявляющегося в способности БАД «Шиитаке серии Фунго-Ши» усиливать активность клеток неспецифического иммунитета. БАД «Шиитаке Фунго-Ши» улучшала метаболизм ксенобиотиков и антиоксидантную активность печени на фоне достоверного повышения ак­тивности хинонредуктазы..

Действие водорастворимого препарата «Шиитаке» (швр), произведенного ооо «Шиитаке» и нпо «Биолюкс», на рост подкожно перевитой аденокарциномы эрлиха у подопытных мышей

Дерягина В.П., Рыжова Н.И., Разин А.Н., Киселева Т.В., Филиппова И.А.

Российский онкологический научный центр РАМН им.Н.Н.Блохина; Москва; ГУ НИИ питания РАМН, Москва;

ООО «Шиитаке», Санкт-Петербург

Продолжающийся рост заболеваемости злокачественными новообразовани­ями в мире, в частности в России, ставит все более актуальной задачу ее про­филактики. С этой целью ведутся исследования на выявление антиканцеро­генной активности химических препаратов, отдельных природных соединений или продуктов, которые могут использоваться человеком в качестве эффектив­ных онкопрофилактических средств. Известно, что многие соединения, входя­щие в состав грибов, обладают иммуномодулирующим действием, активирую­щим звеном неспецифической противоопухолевой защиты.

Биорегулирующие эффекты японского гриба Lentinus edodes (Шиитаке) свя­зывают, прежде всего, с полисахаридом лентинаном, способным усиливать сла­бую, ослаблять сильную или оставлять без изменения нормальную реакцию иммунной системы. Исследование противоопухолевых свойств препарата Ши­итаке (БАД) производства НПО «Биолюкс» и ООО «Шиитаке» проведено на 82 мышах-гибридах F1 (C57BlxCBA) с подкожно перевитой аденокарциномой Эр­лиха (АКЭ). Животные получали за месяц до перевивки и в течение роста опу­холи перорально водную суспензию «Шиитаке» в разовой дозе 188 и 376 мг/ кг или смесь препарата «Шиитаке» (120 мг/кг) и «Дождевика» (Langermannia gigantea ) – (30 мг/кг). Наиболее выраженное достоверное торможение роста АКЭ к объему опухоли (ТРО) отмечено к 12 дню эксперимента у мышей при введении максимальной дозы вещества (52,5 %). К этому же сроку, при введе­нии грибов из расчета 188 мг/кг или смеси препаратов «Шиитаке» с «Дождевиком» ТРО было менее выражено и составило 41,7 и 44 % соответственно. У жи­вотных с опухолями, получавшими грибы, отмечается нормализация в перито­альной жидкости общего количества иммунологических клеток (но не видового состава), которое было превышено в 4,7 раз у животных с опухолями. Введение грибов животным с опухолями стимулировало в 40 (!) раз функциональную ак­тивность макрофагов, определяемую по выделению активных форм кислорода и коррегировало пониженную активность макрофагов по показателю образова­ния оксида азота до уровня активности клеток у здоровых мышей.

Результаты исследования свидетельствуют о способности препарата (БАД) «Шиитаке» влиять на процессы опухолевого роста. Можно предположить, что свойство грибов модулировать активность макрофагов имеет прямое отноше­ние к механизму, объясняющему ингибирующее действие грибов на опухоле­вый рост.

Применение препарата (бад) « Ш иитаке» ( lentinus edodes ) производства нпо « Б иолюкс» и ооо « Ш иитаке» в комплексном лечении запущенных форм рака ободочной и прямой кишки.

Проф. Яновой В.В., Мартынов А.С., Разин А.Н., Филиппова И. А. Амурская Государственная медицинская академия, Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина, РАМН.

Актуальность проблемы

Рак ободочной кишки – одно из наиболее распространенных онкологиче­ских заболеваний. За последние годы в структуре заболеваемости и по темпам роста он вышел на 2-3 место среди злокачественных новообразований. Пробле­ма лечения запущенных форм рака ободочной и прямой кишки до настоящего времени остается далеко не решенной. Недостаточно эффективные методы вы­явления колоректального рака, поздняя обращаемость населения являются ве­дущими причинами того, что больные поступают с запущенными и осложнен­ными формами этого заболевания. При этом ведущее место среди осложнений занимает обтурационная непроходимость, развивающаяся более чем у 30-80 % больных опухолями левой половины ободочной и прямой кишок. Перед хирур­гом всегда стоит вопрос не только выбора способа лечения, но и обеспечения дальнейшего комплекса местного воздействия на опухоль, а также коррегиро­вания важных элементов противоопухолевой защиты организма: функциональ­ной активности нейтрофилов крови, макрофагов перитонеального содержимо­го и активности NO-синтазы.

Применение лапароскопически ассистированной декомпрессионной коло­стомии (ЛЛДК) в сочетании с дальнейшим комплексом местного воздействия на опухоль у больных с запущенным колоректальным раком, осложненным кишечной непроходимостью, позволяет с новых позиций подойти к этой пробле­ме. К настоящему времени накопились сведения о том, что многие соедине­ния, входящие в состав грибов, обладают иммуномодулирующим действием, актиирующим звено неспецифической противоопухолевой защиты и повыша­ющим продукцию интерферона в крови. Японский гриб Lentinus edodes (Ши­итаке) характеризуется сложным составом, включающим полисахариды, про­стые сахара, аминокислоты, липиды, алкалоиды, фенолы, витамины группы В, С, эргостеролы, минеральные вещества и другие соединения. Его биорегу­лирующие эффекты связывают, прежде всего, с полисахаридом лентинаном, проявляющим модифицирующее действие на активность клеток врожденного иммунитета. Высказывается мнение, что лентинан так же, как и классические иммуномодуляторы – тимозин, Т-активин, левамизол, обладают биорегулиру­ющим разнонаправленным эффектом, способным усиливать слабую, ослаблять сильную или оставлять без изменения нормальную реакцию иммунной систе­мы. Показано, что лентинан, входящий в состав грибов Ganoderma L, вызывал у больных меланомой усиление Т-киллерной активности и нормализовал дру­гие показатели клеточного иммунитета.

В системе противоопухолевой защиты важная роль принадлежит неспеци­фической противоопухолевой резистентности, составляющими элементами ко­торой являются макрофаги, нейтрофилы и NК (natural killer) клетки. Макро­фаги и нейтрофилы распознают и эффективно элиминируют трансформиро­ванные и опухолевые клетки независимо от того, экспрессируют ли последние специфические опухолевые антигены. Помимо этого, макрофаги и нейтрофи­лы играют инструктивную и контролирующую роль в индукции специфическо­го (адаптивного) иммунитета. Один из путей реализации их эффекторных и ре­гуляторных функций состоит в активации NADPH-зависимой оксидазы, что приводит к образованию ряда высокоактивных форм кислорода (супероксид анион-радикал пероксид водорода, гидроксильный радикал, синглетный кис­лород). Все эти соединения обладают мощным окислительным и антимикроб­ным потенциалом и в значительной мере определяют цитостатическое и цито­токсическое действие макрофагов и нейтрофилов, в том числе и по отношению к опухолевым клеткам.

Материалы и методы

В Амурском колопроктологическом центре за последние три года находились на лечении 624 больных первичным колоректальным раком. Из них у 270 па­циентов (43.3 %) опухоль локализовалась в левых отделах ободочной и прямой кишок. Различной степени обтурационная непроходимость толстой кишки от­мечена в 169 наблюдениях, что составило 59,3 %.

Лапароскопическая колостомия выполнена 46 пациентам в качестве паллиа­тивного оперативного вмешательства по поводу инкурабельного рака левой по­ловины ободочной и прямой кишок. В послеоперационном периоде, пользуясь данными лабораторных и клинических испытаний Российского онкологиче­ского научного центра им. Н.Н. Блохина РАМН 6 пациентов получали водные суспензии грибов Lentinus edodes (водорастворимый порошок «Шиитаке серии Фунго-Ши) в максимальной дозе – 360 мг/кг в течение 12 дней.

Для оценки антиоксидантной активности (АОА) БАД (порошок Шиита­ке, Фунго-Ши) использовали тест-систему, предложенную Ю.О. Теселкиным и соавт.(1997). Метод основан на способности антиоксидантов продукта пере­хватывать свободнорадикальные соединения (супероксидный анион-радикал, гидроксильный радикал, феррил-радикалы Нb), образовывать в системе гемо­глобин – пероксид водорода – люминол и подавлять люминол-зависимую хе­милюминесценцию (ХЛ). Оценку АОА БАД проводили по двум параметрам – по временному интервалу задержки (латентному периоду) развития ХЛ и по максимальной интенсивности ХЛ. Водный экстракт из грибов вносили в реак­ционную смесь в растворе Хенкса перед инициированием свободнорадикаль­ного окисления до достижения концентрации 50, 100, 200, 300, 500, 700 мкг/мл (в расчете на исходный продукт).

Применение препарата (БАД) «Шиитаке» в комплексном лечении запущен­ных форм рака ободочной и прямой кишки.

Результаты

В диапазоне исследуемых концентраций (но не 50 мкг/мл) регистрирует­ся снижение максимума ХЛ, при этом выявляется дозозависимое антиради­кальное действие экстракта, определяемое как по первому, так и по второму параметрам (таб.1). Антирадикальная активность экстракта грибов в пересче­те на эквивалентный раствор аскорбиновой кислоты составила с нарастанием дозы от 0,16 до 0,26 мкг/мл.

Изучение действия БАД на клеточный состав, функциональную активность макрофагов и нейтрофилов показало повышение общего количества клеток, прежде всего, за счет нейтрофилов, доля которых возрастает до 63,5-81 %. БАД не влияет на спонтанную ХЛ и умеренно усиливает (в 1,2 –1,5 раза) фагоци­тозависимую активность нейтрофилов, определяемую по образованию актив­ных форм кислорода.

Выводы

Проведенное исследование оценки комплексного лечения запущенных форм рака ободочной и прямой кишок, осложненного кишечной непроходимо­стью, с использованием в послеоперационном периоде БАД «Шиитаке» серии «Фунго-Ши» выявило его иммуномодулирующее действие, способное усили­вать активность клеток неспецифического иммунитета.

Действие экстракта вызывает реакцию, сходную с реакцией ранней фазы вос­паления, когда в очаге инфекции больше всего активированных нейтрофилов.

(Журнал «КОЛОПРОКТОЛОГИЯ», 2006, № 1 (15)
Действие бад «Шиитаке» (lentinus edodes – водорастворимая форма) на рост подкожно перевитой аденокарциномы эрлиха

А.Н. Разин, М.Ю. Волков

Продолжающийся рост заболеваемости злокачественными новообразова­ниями в России делает все более актуальной задачу ее профилактики. Наря­ду с другими направлениями она включает исследования на антиканцероген­ную активность отдельных природных соединений, химических препаратов или продуктов с целью включения в рацион человека для предупреждения или сни­жения возможности развития у него заболевания. К настоящему времени накопились сведения о том, что многие соединения, входящие в состав грибов, обладают иммуномодулирующим действием, акти­вирующим звено неспецифической противоопухолевой защиты, и повышают продукцию интерферона в крови. Японский гриб Lentinus edodes (Шиитаке) ха­рактеризуется сложным составом, включающим полисахариды, простые сахара, аминокислоты, липиды, алкалоиды, фенолы, витамины группы В, С, эргосте­ролы, минеральные вещества и др. соединения. Его биорегулирующие эффек­ты связывают, прежде всего, с полисахаридом лентинаном, проявляющим мо­дифицирующее действие на активность клеток врожденного иммунитета.

Высказывается мнение, что лентинан так же, как и классические иммуномодуляторы – тимозин, Т-активин, левамизол – обладает биорегулирующим раз­нонаправленным эффектом, способным усиливать слабую, ослаблять сильную или оставлять без изменения нормальную реакцию иммунной системы. Пока­зано, что лентинан, входящий в состав грибов Ganoderma L, вызывал у больных меланомой усиление Т-киллерной активности и нормализовывал другие пока­затели клеточного иммунитета.

В системе противоопухолевой защиты важная роль принадлежит неспеци­фической противоопухолевой резистентности, составляющими элементами ко­торой являются макрофаги, нейтрофилы и НК natural killer-клетки. Макрофа­ги и нейтрофилы распознают и эффективно элиминируют трансформирован­ные и опухолевые клетки независимо от того, экспрессируют ли последние специфические опухолевые антигены. Помимо этого, макрофаги и нейтрофи­лы играют инструктивную и контролирующие роли в индукции специфическо­го (адаптивного) иммунитета. Один из путей реализации их эффекторных и ре­гуляторных функций состоит в активации NADPH-зависимой оксидазы, что приводит к образованию ряда высокоактивных форм кислорода (супероксид анион-радикал, пероксид водорода, гидроксильный радикал, синглетный кис­лород). Все эти соединения обладают мощным окислительным и антимикроб­ным потенциалом и в значительной мере определяют цитостатическое и цито­токсическое действия макрофагов и нейтрофилов, в том числе и по отноше­нию к опухолевым клеткам.

Задачей настоящего исследования является экспериментальное изучение про­тивоопухолевых свойств грибов Lentinus edodes (БАД «Шиитаке серии Фунго- Ши») на модели перевивной аденокарциномы Эрлиха (АКЭ) и возможного мо­дулирования под влиянием грибов важных элементов противоопухолевой за­щиты: функциональной активности нейтрофилов крови, макрофагов перито­неального содержимого и активности NO-синтазы.

Результаты действия БАД «Шиитаке серии Фунго-Ши» на рост АКЭ в тече­ние 33 дней наблюдения после индукции опухоли.

Как видно из приведенных данных, клетки АКЭ были чувствительны к мак­симальной дозе (376 мг/кг) при пероральном введении суспензии грибов мы­шам. При этой дозе уже на ранних сроках наблюдения отмечается незначитель­ная задержка роста опухоли (20,7-18,2 % по объему), наиболее выраженное до­стоверное ТРО регистрируется к 12 суткам и составляет 52,5 %. В этот пери­од у некоторых мышей этой группы отмечали замедление формирования опу­холевого узла. При введении мышам меньшей дозы (188 мг/кг) эффект дей­ствия грибов был менее выражен, достоверное снижение роста опухоли соста­вило 41,6 % и проявлялось на тех же сроках, что и в первом случае. В дальней­шем среднее арифметическое значение объема опухоли у мышей, потребляв­ших суспензию грибов, было на 20-30 % меньше, чем у контрольных животных, и такое различие регистрировали до конца наблюдения. Случаи гибели мышей с АКЭ, потреблявших грибы, имели место на более поздних сроках (после 28 суток), чем в контроле.

Результаты взвешивания опухолей, выделенных после декапитации мышей, на 37 сутки после индукции АКЭ показывают, что среднеарифметическое зна­чение массы опухоли у мышей, которым вводили грибы, хотя и незначимо, но было меньшим на 20,2 и 22,9 % соответственно, в прямой зависимости от дозы.

Анализ данных лейкоцитарного состава клеток крови у мышей в конце экс­перимента показывает, что мыши с АКЭ характеризуются более высоким уров­нем количества лейкоцитов по сравнению с мышами интактной группы, при­чем у мышей, потреблявших грибы, отмечается рост этого показателя. На­ряду с этим в крови животных с опухолью наблюдается увеличение относи­тельного количества нейтрофилов, а введение грибов несколько усиливает эту тенденцию.

Данные определения функциональной активности нейтрофилов в крови по выделению активных форм кислорода в хемилюминесцентном тесте пока­зывают снижение активности нейтрофилов в спонтанном состоянии у мышей с АКЭ. Показатель ФЗХ крови мышей с АКЭ при стимулировании фагоцитар­ного процесса Candida albicane был близким к значениям интактной группы. Значение коэффициента стимуляции фагоцитоза, рассчитанного по отноше­нию величины ФЗХ к СХЛ, было максимальным у здоровых мышей, которым вводили грибы в дозе 188 мг/кг. Такое стимулирующее действие грибов не сохранялось у мышей с опухолью.

Определение клеточного состава перитонеального содержимого мышей по­казывает, что введение здоровым мышам грибов (188 мг/кг) приводит к досто­верному (в 4,9 раза) повышению общего количества клеток. Увеличение коли­чества клеток в перитонеальной жидкости здоровых мышей при введении гри­бов (188 мг/кг) происходило в основном за счет возрастания доли и абсолют­ного количества лимфоцитов. Увеличение общего количества клеток в 4,7 раза, по сравнению с животными интактной группы, присуще и для мышей с АКЭ, не потреблявших грибы. В то же время у мышей с АКЭ, которым регуляр­но вводили БАД «Шиитаке Фунго-Ши», наблюдали нормализацию этого им­мунологического показателя, сравнимого с уровнем здоровых мышей. У жи­вотных с АКЭ видовой состав клеток в перитонеальном содержимом (соот­ношение макрофагов, нейтрофилов, тучных клеток, лимфоцитов) отличается существенным возрастанием относительного количества нейтрофилов в 6,1 – 6,9 раза и одновременным снижением доли макрофагов в 2,2 – 2,4 раза. Вве­дение грибов практически не сказалось на видовом соотношении клеток у мы­шей с опухолью.

Измерение ХЛ макрофагов перитонеального содержимого у мышей с АКЭ, потреблявших грибы, выявило высокозначимое повышение активности этих клеток, как в спонтанном состоянии, так и при их активации Candida albicans . Особенно наглядно это проявляется у мышей, получавших грибы в дозе 188 мг/ кг, активность макрофагов у которых в спонтанном состоянии возросла в 36,8, а при их активации – в 58,2 раза по сравнению с таким же показателем для мы­шей с АКЭ. Более высокая доза вводимых грибов – (376 мг/кг) также вызы­вала хотя и значимую активацию макрофагов, но в существенно меньшей сте­пени. Наряду с этим еще один показатель – коэффициент усиления активно­сти макрофагов при их инкубации с Candida albicans , по сравнению с показате­лем СХЛ, отражающий скрытый потенциал клеток, указывает на рост функци­ональной активности макрофагов перитонеального содержимого мышей, полу­чавших грибы.

Суммируя полученные результаты, можно заключить: регулярное перораль­ное применение БАД «Шиитаке серии Фунго-Ши» до индукции опухоли и в течение ее роста вызывает умеренное торможение роста АКЭ у мышей С57В1 и этот эффект более отчетливо проявляется при максимальной дозе 376 мг/кг. Можно предположить, что способность модулировать количественный и каче­ственный состав перитонеальных клеток, активируя макрофаги – клетки не­специфической противоопухолевой резистентности – имеет прямое отношение к механизму, объясняющему ингибирование опухолевого роста.

Изучение потенциальных противоопухолевых свойств биологически активных добавок lentinus edodes (шиитаке), fomitopsis officinalis (трутовика лиственничного) и phallus impudicus (веселка)

Филиппова И.А., Разин А.Н., Волков М.Ю., Дерягина В.П., Рыжова Н.И.

Задачей настоящего исследования является:

1) изучение противоопухолевых свойств грибов Lentinus edodes (Шиитаке), Fomitopsis officinalis (Трутовика лиственничного) и Phallus impudicus (Веселка) на модели перевивной аденокарциномы Эрлиха (АКЭ) у мышей;

2) исследование возможных механизмов ингибирующего действия грибов: определение функциональной активности нейтрофилов крови и перитонеаль­ных моноцитов и макрофагов, определение видового клеточного состава этих биологических жидкостей;

3) выявление возможной связи между объемом растущей опухоли и активно­стью одного из важных медиаторов роста опухоли – оксида азота.

Методика исследования. Работа проведена на 129 мышах-гибридах F1(С57ВlxCBA) и Balb/c разводки питомника «Столбовая» РАМН. Мыши F1(С57ВlxCBA) в количестве 89 особей были разделены на 6 групп: 1 гр. – ин­тактная группа (здоровые мыши), n=15; 2 гр. – здоровые мыши, получавшие перорально водную суспензию грибов Lentinus edodes –Шиитаке (188 мг/кг), n=15. Контролем служили мыши с подкожно перевитой аденокарциномой Эр­лиха (106 клеток в 0,5 мл Хенкса), n=15 – 3-я гр. Остальные три опытные груп­пы по 14 и15 мышей в каждой (4, 5 и 6 гр.) включали мышей с перевитой АКЭ. Мыши этих групп получали 5 раз в неделю в течение двух недель до перевивки и на протяжении всего эксперимента водную суспензию грибов в разовой дозе 15 мг/кг Трутовика или Веселки (табл. 1), или 188 мг/кг Шиитаке. Следует под­черкнуть, что мышам 4 и 5 групп первые два дня эксперимента вводили макси­мально переносимую разовую дозу грибов Трутовика лиственничного и Весел­ки, которая составляла 188 мг/кг.

Действие грибов на рост перевитой опухоли по другой схеме введения дей­ствующего продукта исследовали на примере Трутовика (табл. 1а). Опыт прово­дили на мышах Balb/c, с общим количеством 20 животных. Контролем служи­ли мыши с перевитой АКЭ, n=10. Мышам опытной группы, численностью 10 животных, вводили перорально водную суспензию Трутовика в дозе 18,3 мг / кг, начиная со второго дня после перевивки АКЭ и в течение всего последующе­го периода.

Наличие возможной связи между размером опухоли в процессе ее роста и образованием нитросоединений в организме проводили также на мышах Balb/c, с общим количеством 20 животных (табл.6).

Ингибирующее рост опухоли действие грибов оценивали по торможению ро­ста опухоли (ТРО) у животных опытных групп в сравнение с контрольной груп­пой: ТРО = [(Vк-Voп)/Vк] x 100 %; где Vк – средний объем опухоли в кон­трольной группе, Voп – средний объем опухоли в опытной группе (мм3). При­нимая во внимание, что форма опухоли представляет собой не чисто сфериче­скую форму и более напоминает элипсоид, объем опухоли определяли по фор­муле для расчета объема элипсоида: V= AxBxCx p /6, где А, В, С – длины боль­шой, средней и малой оси.

Выделение активных форм кислорода фагоцитами крови и перитонеальной жидкости (нейтрофилами, моноцитами и макрофагами) определяли по люми­нолзависимой хемилюминесценции (ХЛ), регистрируемой прибором Биолю­мат, модель 9500 («Berthoold, Германия). Резидентные клетки перитонеальной жидкости получали промыванием брюшной полости раствором Хенкса в объе­ме 2 мл. Перитонеальные клетки осаждались на предметном стекле в термоста­те при температуре 37°С в течение 20 мин. После фиксации в метаноле и окра­шивания их по Романовскому-Гимза определяли клеточный состав перитоне­альной жидкости по морфологическим критериям. Для постановки реакции определения спонтанной (СХЛ) и фагоцитозависимой хемилюминесценции (ФЗХ) крови и клеток перитонеального содержимого смешивали 0,2 мл Хенк­са + 0,1 мл люминола (0,56 мМ) + 0,1 мл крови (предварительно разведенной в 4 раза р-ром Хенкса) или 0,1 мл перитонеальной жидкости. В качестве акти­ватора фагоцитоза использовали зимозан (0,05 мл), опсонизированный сыво­роткой 10-12 здоровых доноров. ХЛ измеряли в течение 30 мин, с интервалом в 5 мин. Известно, что хемилюминесцентный ответ крови и перитонеальной жидкости определяется, в основном, фагоцитирующими клетками: нейтрофилами, моноцитами и макрофагами, способными продуцировать активные фор­мы кислорода. Учитывая это, а также исходя из клеточного состава изучаемого объекта, можно принять, что в крови уровень АФК определяется, в основном, нейтрофилами. Моноциты, присутствующие в крови в меньшем количестве и проявляющие более низкую хемилюминесцентную активность (до 10 раз), вносят меньший вклад в общий хемилюминесцентный отклик крови. Прини­мая это соотношение, приходим к выводу, что хемилюминесцентная актив­ность перитонеальной жидкости, содержащей m макрофагов и n нейтрофилов эквивалентна активности m + 10 n макрофагов. Отсюда активность одного ма­крофага a может быть оценена (по хемилюминесцентному отклику) как част­ное от деления величины ХЛ/ m + 10 n.

Содержание нитритов (НИ) в моче определяли методом Грисса. Нитра­ты (НА), при их определении, предварительно восстанавливали до НИ пори­стым кадмием и анализировали тем же методом. Для сбора мочи мышей по­мещали по 5 шт. в обменные клетки на сутки, лишив корма при свободном доступе к дистиллированной воде. Во избежание разрушения НИ в емкости для сбора мочи вносили 0,3 мл 30 % гидроксида натрия. Для удаления белково- углеводной составляющей в экстракте опухолевой ткани, перитонеальном со­держимом и моче использовали водные растворы калия железистосинеродисто­го и цинка сернокислого.

Статистическую обработку данных, представленных как среднее арифмети­ческое значение + стандартное отклонение, проводили, используя критерий Стьюдента.

Результаты и обсуждение.

В табл. 1 представлены результаты действия водной суспензии грибов Тру­товика, Веселки и Шиитаке на рост АКЭ в течение 31 дня наблюдения после индукции опухоли. Как видно из приведенных данных, на ранних сроках на­блюдения (6-11 сутки) клетки АКЭ были чувствительны к введению всех ви­дов грибов: Трутовика, Веселки и Шиитаке, причем Веселка вызывала наибо­лее выраженный ингибирующий эффект, который составил 71,0 %. Ингибиру­ющее действие Трутовика и Шиитаке на ранней стадии развития опухоли более умеренное, максимальное снижение объема опухоли составляет 63,2 и 50,2 % соответственно. Через две недели после индукции опухоли тормозящее дей­ствие грибов Веселки и Трутовика в значительной мере сглаживается и в тече­ние последующего периода наблюдения составляет около 10 %. В то же время, в этот период ингибирующее действие грибов Шиитаке на рост АКЭ прояв­ляется более отчетливо, объем опухоли у мышей этой группы меньше на 14,3- 17,8 %, чем в контроле. Обращает на себя внимание выраженная межиндиви­дуальная чувствительность мышей к действию всех видов грибов. Так, форми­рование опухолевого узла на ранней стадии роста опухоли у некоторой части опытных мышей было замедленным, затем скорость роста опухоли опережа­ла этот показатель, характерный для других животных и затем стабилизирова­лась на их уровне.

Результаты взвешивания опухолей у мышей F1(С57ВlxCBA), забитых на 31 сутки после индукции АКЭ, показывают, что среднеарифметическое зна­чение массы опухолей у мышей, которым вводили грибы Трутовик, Веселку, Шиитаке, было меньшим по сравнению с контролем на 14,3 %, 12,7 % и 26,2 %, соответственно (табл. 1). Но статистически достоверным снижение массы опу­холи было лишь у мышей с АКЭ, которым вводили грибы Шиитаке (р=0,02).

Анализ данных лейкоцитарного состава клеток крови у мышей в конце экс­перимента (табл.2) показывает, что мыши с АКЭ характеризуются более высо­ким уровнем количества лейкоцитов по сравнению с мышами интактной груп­пы, причем у мышей, потреблявших грибы, этот показатель близок к пока­зателю интактной группы. Наряду с этим, в крови животных с опухолью на­блюдается достоверное увеличение относительного количества нейтрофилов и снижение доли лимфоцитов, а введение грибов практически не меняет эту тенденцию.

Данные определения функциональной активности нейтрофилов в крови по выделению активных форм кислорода в хемилюминесцентном тесте (табл. 3) показывают выраженное возрастание активности клеток при стимулирова­нии их зимозаном у мышей с АКЭ. Введение грибов Шиитаке мышам с АКЭ приводит к существенному достоверному снижению в 3,4 раза активности по­лиморфноядерных лимфоцитов в направлении уровня ее как у здоровых мы­шей. Введение Шиитаке здоровым мышам не изменяло активность нейтрофи­лов в спонтанном состоянии и при их стимулировании зимозаном.

Определение клеточного состава перитонеального содержимого мышей (табл. 4) показывает, что введение здоровым мышам грибов Шиитаке (188 мг/кг) на протяжении 45 дней приводит к достоверному в 2,4 раза повышению общего количества клеток. Увеличение количества клеток в перитонеальной жидкости здоровых мышей при введении грибов происходил, в основном, за счет возрас­тания доли и абсолютного количества лимфоцитов, а также моноцитов и ма­крофагов. Увеличение общего количества клеток в 2,1 раза в сравнении с жи­вотными интактной группы присуще и мышам с АКЭ, не потреблявших грибы. В то же время, у мышей с АКЭ, которым регулярно вводили суспензию гри­бов Шиитаке, наблюдали нормализацию этого иммунологического показателя до уровня как у здоровых мышей. У животных с АКЭ видовой состав клеток перитонеального содержимого (соотношение макрофагов, нейтрофилов, туч­ных клеток, лимфоцитов) отличается существенным возрастанием относитель­ного количества нейтрофилов в 26,7 раза и одновременным снижением отно­сительного количества лимфоцитов в 1,2 раза. Введение грибов снижало долю нейтрофилов и достоверно увеличивало долю моноцитов и макрофагов в пери­тонеальном содержимом мышей с АКЭ (табл. 4).

Измерение ХЛ макрофагов перитонеального содержимого у мышей (табл. 5) выявило снижение активности моноцитов и макрофагов в спонтанном со­стоянии у мышей с АКЭ (в 4 раза) и у здоровых мышей, получавших грибы (в 2,9 раза). Наряду с этим, при стимуляции клеток перитонеальной жидкости зи­мозаном у мышей с АКЭ отмечается достоверный рост активности моноцитов и макрофагов. Мыши с АКЭ, потреблявшие грибы, имели повышенную активность моноцитов и макрофагов перитонеального содержимого как в спон­танном состоянии, так и при их стимуляции, соответственно, в 5,1 и 1,7 раза по сравнению с этим показателем для мышей с АКЭ.

Результаты определения нитритов (НИ) и нитратов (НА) в моче мышей Balb/c в течение роста перевитой АКЭ (табл. 6) отражают интенсивность их эндогенного образования в организме. Источником эндогенного образования НИ и НА является оксид азота, продукт активности NO-cинтаз (конститутив­ной и индуцибельной). Оксид азота, окисляясь, образует более стабильные со­единения – НИ и НА. Полагают, что интенсивность образования оксида азота в организме может характеризовать скорость опухолевого роста.

Как видно из данных табл. 6, наблюдается прямая корреляционная зависи­мость между уровнем суточного выделения нитритов и нитратов с мочой и объ­емом АКЭ. За 28 суток наблюдения с момента появления оформленных опухо­левых узлов (4 сутки) содержание нитритов и нитратов в моче возросло, соот­ветственно, в 3,6 и 65,3 раза, а объем опухоли увеличился в 67,3 раза.

В табл. 1а приведены данные действия водной суспензии Трутовика на рост АКЭ у мышей Balb/c. Схема введения суспензии Трутовика отличалась от пред­ыдущей. Суспензию Трутовика в дозе 18,3 мг/кг м.т.ж. стали вводить на вто­рой день после перевивки АКЭ и вводили в течение всего эксперимента с ча­стотой 5 раз в неделю. Как видно, объем опухоли у мышей, получавших гри­бы Трутовик, был на уровне контроля, либо несущественно ниже его (на 5,1- 17,5 %). Следовательно, при такой схеме введения и такой дозе, грибы не ока­зывают тормозящего действия на рост опухоли.

Таким образом, результаты экспериментального исследования показывают, что гриба Веселки, Дождевик и Шиитаке, введенные до перевивки АКЭ, вызы­вают на ранней стадии развития АКЭ торможение роста опухоли и этот эффект более отчетливо проявляется при введении грибов Веселка 71 % по объему опу­холи). Следует обратить внимание на то, что доза грибов (Веселка и Трутовик), вводимых в течение первых 2 дней эксперимента, была максимально перено­симой (188 мг/кг), в дальнейшем она была снижена до 15 мг/кг. На первой ста­дии рост опухоли у мышей F1, получавших грибы, независимо от их вида, был неравномерен, отмечалась выраженная межиндивидуальная чувствительность к действию грибов. Но в дальнейшем, ингибирующий эффект действия Весел­ки и Трутовика слабел, в то время как умеренное ингибирующее действие Ши­итаке сохранилось до конца наблюдения (31 сутки) и составило 26,2 %. Рост опухоли у мышей всех групп сопровождается увеличением количества лейкоцитов в крови с одновременным увеличением относительного количества нейтрофилов. У животных с опухолями усилены свободнорадикальные процес­сы: стимулировано образование активных форм кислорода нейтрофилами кро­ви, моноцитами и макрофагами перитонеальной жидкости и нитросоединений: НИ и НА в организме.

Введение грибов Шиитаке здоровым животным приводило к увеличению об­щего количества клеток в перитонеальном содержимом, прежде всего, за счет лимфоцитов, моноцитов и макрофагов. Поступление грибов Шиитаке в о ганизм мышей с АКЭ снижает активность нейтрофилов крови, повышенный у животных с опухолью, практически до уровня активности этих клеток у здо­ровых животных. Одновременно у мышей с АКЭ действие грибов Шиитаке привело к нормализации показателя уровня общего количества иммунокомпе­тентных клеток в перитонеальном содержимом и скорректировало его видовой состав в сторону, характерную для здоровых животных. В то же время, введе­ние грибов Шиитаке мышам с АКЭ приводит к усилению активности моноци­тов и макрофагов перитонеальной жидкости.

Выводы. Результаты исследований на мышах-гибридах F1(С57ВlxCBA) по выявлению ингибирующего действия грибов Шиитаке на рост перевитой АКЭ согласуются с результатами, полученными ранее в эксперименте на мы­шах линии C57Bl (отчет №1). Полученные новые данные подтверждают на­личие умеренных ингибирующих свойств у грибов Шиитаке. Грибы Веселка и Трутовик также проявляют способность ингибировать рост АКЭ на ранних стадиях роста опухоли, однако в дальнейшем влияние грибов на рост опухоли в существенной мере убывает.

На основании проведенных исследований можно полагать, что грибы Ши­итаке обладают иммуномодулирующим действием: активируют звено неспец­ифической противоопухолевой защиты – усиливают активность моноцитов и макрофагов без стимуляции и при стимуляции этих клеток активаторами, имеющими разную природу. Наряду с этим, при опухолевом росте грибы Ши­итаке способны регулировать в сторону нормализации такие показатели, как общее количество иммунокомпетентных клеток в перитонеальном содержимом и функциональную активность полиморфноядерных лейкоцитов крови. Дан­ные экспериментов дают основание предположить, что действие грибов Ши­итаке, Веселки и Трутовика эффективно лишь при схеме, включающей обяза­тельное введении грибов в течение определенного времени до перевивки АКЭ.

Действие водорастворимого препарата « Ш иитаке» (швр) на рост подкожно перевитой аденокарциномы эрлиха

Т.В. Киселева (ГУ НИИ питания РАМН, Москва)

Продолжающийся рост заболеваемости злокачественными новообразованиями в мире, в частности в России, ставит все более актуальной задачу ее профилактики. С этой целью ведутся исследования на выявление антиканцерогенной активности химических препаратов, отдельных природных соединений или продуктов, которые могут использоваться человеком в качестве эффективных онкопрофилактических средств. Известно, что многие соединения, входящие в состав грибов, обладают иммуномодулирующим действием, активирующим звено неспецифической противоопухолевой защиты. Биорегулирующие эффекты японского гриба Lentinus edodes (Шиитаке) связывают, прежде всего, с полисахаридом лентинаном, способным усиливать слабую, ослаблять сильную или оставлять без изменения нормальную реакцию иммунной системы.

Исследование противоопухолевых свойств препарата Шиитаке (БАД) производства НПО «Биолюкс» и ООО «Шиитаке» проведено на 82 мышах-гибридах F1 (C57BlxCBA) с подкожно перевитой аденокарциномой Эрлиха (АКЭ). Животные получали за месяц до перевивки и в течение роста опухоли перорально водную суспензию «Шиитаке» в разовой дозе 188 и 376 мг/кг или смесь препарата «Шиитаке» (120 мг/кг) и «Дождевика» (Langermannia gigantean) - (30 мг/кг).

Наиболее выраженное достоверное торможение роста АКЭ объему опухоли (ТРО) отмечено к 12 дню эксперимента у мышей при введении максимальной дозы вещества (52,5%). К этому же сроку, при введении грибов из расчета 188 мг/кг или смеси препаратов «Шиитаке» с «Дождевиком» ТРО было менее выражено и составило 41,7 и 44% соответственно. У животных с опухолями, получавшими грибы, отмечается нормализация в перитониальной жидкости общего количества иммунологических клеток (но не видового состава), которое было превышено в 4,7 раз у животных с опухолями. Введение грибов животным с опухолями стимулировало в 40 раз функциональную активность макрофагов, определяемую по выделению активных форм кислорода и коррегировало пониженную активность макрофагов по показателю образования оксида азота до уровня активности клеток у здоровых мышей.

Результаты исследования свидетельствуют о способности препарата (БАД) «Шиитаке» влиять на процессы опухолевого роста. Можно предположить, что свойство грибов модулировать активность макрофагов имеет прямое отношение к механизму, объясняющему ингибирующее действие грибов на опухолевый рост.
Действие бад « Ш иитаке» на метаболизм ксенобиотиков и антиоксидантную активность в опытах in vitro и in vivo

A.H. Разин, И.А. Филиппова (ООО «Шиитаке»)

М.Ю. Волков (Управление начальника войск радиационной, химической и биологической защиты)

В.П. Дерягина, Н.И. Рыжова (Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина, РАМН)

Биологически активная добавка (БАД) «Шиитаке серии Фунго-Ши», разработанная на основе японского гриба Lentinus edodes (шиитаке), характеризуется сложным составом, включающим полисахариды, простые сахара, аминокислоты, липиды, алкалоиды, фенолы, витамины группы В, С, эргостеролы, минеральные вещества и др. соединения. Его биорегулирующие эффекты связывают, прежде всего, с полисахаридом лентинаном, обладающим иммуномодулирующим действием. Антирадикальные свойства гриба мало изучены; основываясь лишь на свойствах входящих в него соединений, можно ожидать преобладания антиоксидантной активности (АОА), в то же время не исключается и наличие прооксидантных свойств у экстракта из этого вида гриба.

Для оценки АОА БАД (водрастворимый порошок «Шиитаке серии Фунго-Ши») использовали тест-систему. Метод основан на способности антиоксидантов продукта перехватывать свободнорадикальные соединения (супероксидный анион-радикал, гидроксильный радикал, феррил-радикалы), образующиеся в системе гемоглобин - пероксид водорода - люминол и подавлять люминолзависимую хемилюминесценцию (ХЛ). Оценку АОА БАД проводили по двум параметрам- по временному интервалу задержки (латентному периоду) развития ХЛ и по максимальной интенсивности ХЛ. Водный экстракт из грибов (экстрагирование в течение 15 мин) вносили в реакционную смесь в растворе Хенкса перед инициированием свободнорадикального окисления до достижения концентраций 50, 100, 200, 300, 500, 700 мкг/мл (в расчете на исходный продукт). В диапазоне исследуемых концентраций (но не 50 мкг/мл) регистрируется задержка развития и одновременное снижение максимума ХЛ, при этом выявляется дозозависимое антирадикальное действие экстракта, определяемое как по первому, так и по второму параметрам

Антирадикальная активность БАД в пересчете на эквивалентный раствор аскорбиновой кислоты составила с нарастанием дозы от 0,16 до 0,26 мкг/мл.

Изучение действия БАД на клеточный состав, функциональности, прежде всего, за счет нейтрофилов, доля которых возрастает до 63,5-81% БАД не влияет на спонтанную ХЛ и умеренно усиливает в 1,2-1,5 раза фагоцитзависимую хемилюминесцентную активность нейтрофилов, определяемую по образованию активных форм кислорода. Действие экстракта вызывает реакцию, сходную с реакцией ранней фазы воспаления, когда в очаге инфекции больше всего активированных нейтрофилов.

В микросомах и фракции цитозоля, выделенных из печени, определяли активность ключевых ферментов II фазы метаболизма ксенобиотиков- хинонредуктазы, глутатионтрансферазы, UDP - глюкуронозилтрансферазы с р-нитрофенилом в качестве акцептора. Считают, что основной механизм, регулирующий неоплазию, заключается в балансе между активностью ферментов фазы I (активирующими канцерогены) и ферментов фазы II (детоксицирующими их). Эти ферменты вносят значительный вклад в обеспечение антиоксидантного потенциала клетки, осуществляя детоксикацию высокореактивных эпоксидов, органических перекисей, электрофильных соединений. Глутатионтрансфераза и хинонредуктаза эффективно восстанавливают липидные гидропероксиды.

Активность макрофагов и нейтрофилов перитонеального содержимого у мышей F, (С57В1хСВА), которым вводили экстракт внутрибрюшинно, показывает значимое повышение общего количества клеток в перитонеальной жидкости и, в отличие от пероксидазы, способны восстанавливать гидропероксиды фосфолипидов в мембранах. Как видно из представленных данных, введение здоровым мышам БАД существенно не влияло на активность локализованной в цитозоле глутатионтрансферазы, но достоверно повышало на 47,8% активность хинонредуктазы.В то же время активность микросомальной UDP-глюкуронозилтрансферазы оставалась на уровне контроля.

Измерение активности антиоксидантных ферментов в печени мышей с АКЭ не выявило потенцирующего действия грибов на активность хинонредуктазы, глутатионтрансферазы, глюкуронозилтрансферазы и антиоксидантную активность (FRAP).

Проведенное исследование выявило наличие умеренного антирадикального и иммуномодулирующего действия, проявляющегося в способности БАД «Шиитаке серии Фунго-Ши» усиливать активность клеток неспецифического иммунитета. БАД «Шиитаке Фунго-Ши» улучшала метаболизм ксенобиотиков и антиоксидантную активность печени на фоне достоверного повышения активность хинонредуктазы.

Высшие базидиальные грибы – продуценты антивирусных соединений

Разумов И.А., Казачинская Е.И., Пучкова Л.И., Козлова Н.С., Винокурова А.В., Горбунова И.А., Михайловская И.Н., Локтев В.Б., Теплякова Т.В.

Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Ро­спотребнадзора, п. Кольцово, Новосибирская область

Пробы, полученные из грибов некото­рых штаммов, относящихся к видам Ganoderma lucidum (рейши), Lentinus edodes (шиитаке), Inonotus obliquus (чага), роду Pleurotus (вешенка), полностью инги­бировали инфекционную активность не менее 100 ТЦД50/0,1мл 50 % ткане- цитопатических доз) ВЗН и 100 БОЕ/0,1 мл (бляшкообразующих единиц) ВПГ- 2 в культуре клеток Vero.

Наибольшей антивирусной активностью обладали экстракты, полученные из грибных культур, выращенных в жидких питательных средах в стационар­ном состоянии. Установлено, что антивирусная активность проб из грибов свя­зана с наличием полисахаридов и возрастает по мере их концентрирования. Так, в грибных препаратах, прошедших специальную механическую обработку, где содержание полисахаридов в 10-100 раз выше, чем в препаратах, получен­ных обычным путем (в результате разрушения биомассы ультразвуком или ме­тодом растирания в ступке), антивирусная активность возрастала по мере уве­личения их концентрации. Именно эти препараты вызывали не только вирули­цидный или нейтрализующий эффект при обработке вирусов, но и лечебный эффект при введении в культуру клеток после инфицирования вирусом.