RSK-ը տարբեր է բարձր զգայունությունև կոնկրետություն և օգտագործվում է հետևյալի համար.

1) վարակիչ հիվանդությունների սերոլոգիական ախտորոշում (Վասերման գետ - սիֆիլիսի համար, Բորդետ-Ժանգու գետ - քրոնիկ գոնորեայի համար և այլն);

2) բակտերիաների և այլ մանրէների նույնականացում.

RSC-ն վերաբերում է բարդ շճաբանական ռեակցիաներին, որոնցում, բացի AG-ից և AT-ից, մասնակցում է նաև հեմոլիտիկ համակարգը (հեմոլիզի համակարգը), որը բացահայտում է ռեակցիայի արդյունքը։

RSK-ն իրականացվում է երկու փուլով՝ երկու համակարգերի մասնակցությամբ.

1) առաջին համակարգը՝ AG + AT + լրացում, առաջացնում է լրացման կապ, եթե AT-ը համապատասխանում է AG-ին: AT-ի և AG-ի միջև անհամապատասխանության դեպքում լրացումը մնում է անվճար.

երկրորդ համակարգ (ցուցանիշ) - հեմոլիտիկ շիճուկ (հեմոլիզիններ) + արյան կարմիր բջիջներ - ցույց է տալիս ռեակցիայի արդյունքը առաջին համակարգում. դրական արդյունքռեակցիա առաջին համակարգում (AG+AT+կոմպլեմենտ համալիրի ձևավորում), երկրորդում հեմոլիզ չի առաջանա կոմպլեմենտի բացակայության պատճառով (էրիթրոցիտները նստում են խողովակի հատակին)։ Երբ բացասական արդյունքառաջին համակարգում երկրորդն ուղեկցվում է հեմոլիզով, քանի որ ձևավորվում է արյան կարմիր բջիջների + հեմոլիզինների + կոմպլեմենտի համալիր (տես Հավելված 3, Նկար 7 և 8):

Ռեակցիայի բաղադրիչներ.

1) թեստային շիճուկ (նախապես ապաակտիվացված 56 0 C ջերմաստիճանում 30 րոպե տաքացնելով);

2) հակագեն (պատրաստված է սպանված մանրէների կասեցումներից, մանրէաբանական լիզատներից, ամբողջական անտիգեններից, հապտեններից, հյուսվածքային լիպիդային էքստրակտներից);

3) լրացնում;

4) հեմոլիտիկ շիճուկ;

5) ոչխարի էրիթրոցիտների 3% կասեցում.

6) աղի;

7) հսկիչ շիճուկ.

Լրացում. Գվինեա խոզի թարմ և չորացրած շիճուկը օգտագործվում է որպես հավելում RSC-ում, քանի որ ծովախոզուկի արյան մեջ կոմպլեմենտը պարունակվում է. ամենամեծ թիվըև մշտապես առկա է, քան մյուս կենդանիների մոտ: RSC-ն կատարելուց առաջ պետք է կատարվի հեմոլիզի ռեակցիայի մեջ կոմպլեմենտի տիտրում (ոչխարի կարմիր արյան բջիջներ, հեմոլիտիկ շիճուկ, կոմպլեմենտ, աղի լուծույթ) և աշխատանքային դոզայի որոշումը:

Լրացուցիչ տիտր- կոմպլեմենտի ամենաբարձր նոսրացումը, որը հեմոլիտիկ շիճուկի առկայության դեպքում առաջացնում է կարմիր արյան բջիջների ամբողջական լիզացիա:

Կոմպլեմենտի աշխատանքային դոզան– լրացման քանակությունը, որը 25%-ով գերազանցում է հրաձգարանին:

Հեմոլիտիկ շիճուկպատրաստվել է նապաստակների իմունիզացիայի միջոցով ոչխարի էրիթրոցիտների 50% կասեցումով: Ստացված շիճուկն ապաակտիվացվում է 56 0 C ջերմաստիճանում տաքացնելով: Որոշվում են տիտրը և աշխատանքային դոզան:

Շիճուկի տիտր- շիճուկի առավելագույն նոսրացում, որը կոմպլեմենտի առկայության դեպքում առաջացնում է կարմիր արյան բջիջների ամբողջական լիզացիա: Որպես աշխատանքային դոզան, վերցրեք հեմոլիտիկ շիճուկը եռակի տիտրով:

RSC Bordet-Gangu

Ռեակցիան իրականացվում է քրոնիկ գոնորեայի ախտորոշման համար՝ գոնոկոկի դեմ հակամարմիններ հայտնաբերելու նպատակով:

RSC-ում ներգրավված են երկու համակարգ՝ հիմնական համակարգը՝ թեստային շիճուկ, անտիգեն, կոմպլեմենտ և օժանդակ, ցուցիչ կամ հեմոլիտիկ համակարգ՝ հեմոլիտիկ շիճուկ և ոչխարի կարմիր արյան բջիջներ:

Եթե ​​առաջին համակարգում ձևավորվում է սպեցիֆիկ հակագեն + հակամարմին համալիր, ապա կոմպլեմենտը կլանվում է (համակցվում է այս համալիրի հետ), իսկ երկրորդ համակարգում հեմոլիզ չի լինում։

Ռեակցիան պահանջում է.

1. Փորձնական շիճուկ, որը ստացվում է հիվանդի ուլնար երակի պունկցիայի միջոցով վերցված արյունից: Արյան մակարդումից հետո շիճուկը ներծծվում է առանձին խողովակի մեջ և 30 րոպե անակտիվացվում է 56 0 C ջերմաստիճանում ջրային բաղնիքում:

2. Հակագեն - սպանված գոնոկոկների կասեցում:

3. Ոչխարի կարմիր արյան բջիջները ստացվում են ստերիլ կերպով հավաքված դեֆիբրինացված արյունից: Դրանք լվանում են 3 անգամ ցենտրիֆուգելով աղի լուծույթի նոր չափաբաժիններով։ Ռեակցիան օգտագործում է կարմիր արյան բջիջների 3% կասեցում:

4. Հեմոլիտիկ շիճուկը պատրաստվում է նախապես՝ ոչխարի կարմիր արյան բջիջներով ճագարներին իմունիզացնելով: Օգտագործելուց առաջ շիճուկը տիտրվում է։

5. Կոմպլեմենտ - թարմ ծովախոզուկի շիճուկ: Գվինեա խոզի սրտից ներարկիչով արյուն են ծծում, մակարդվելուց հետո առանձնացնում են շիճուկը։ Փորձարկումից առաջ կոմպլեմենտի աշխատանքային չափաբաժինը տիտրվում է։ Դրա համար վերցնում ենք կոմպլեմենտի հիմնական նոսրացումը 1:10 և լցնում փորձանոթների մեջ՝ 0,1-ից մինչև 0,5, որից հետո յուրաքանչյուր փորձանոթի ծավալը ֆիզիոլոգիական լուծույթով կարգավորվում է մինչև 1,5 մլ:

Միևնույն ժամանակ պատրաստվում է հեմոլիտիկ համակարգ՝ եռակի տիտրով նոսրացված հեմոլիտիկ շիճուկ + ոչխարի էրիթրոցիտների 3% կասեցում։ Երկու բաղադրիչներն էլ տարբեր հատորներև 30 րոպե պահել թերմոստատի մեջ (խառնուրդի զգայունացում), որից հետո խառնուրդը 1 մլ ավելացնում են փորձանոթների մեջ և 30 րոպե դնում թերմոստատի մեջ։ 3 փորձանոթները ծառայում են որպես հսկողություն.

1. 1 մլ հեմոլիտիկ համակարգ + 1,5 մլ ֆիզիոլոգիական լուծույթ;

2. 0,5 մլ կոմպլեմենտ 1:10 + 0,5 մլ կարմիր արյան բջիջների կասեցում + 1,5 մլ ֆիզիոլոգիական լուծույթ:

Կոմպլեմենտի տիտրը նվազագույն քանակն է, որով դեռ տեղի է ունենում հեմոլիզ: Ռեակցիան հաստատելու համար ընդունեք կոմպլեմենտի աշխատանքային չափաբաժինը, որը տիտրի նկատմամբ ավելացել է 20-25%-ով, այսինքն՝ սովորաբար այն քանակությունը, որը առկա է հեմոլիզով նախավերջին խողովակում: Կոմպլեմենտի չափաբաժնի ավելացումն անհրաժեշտ է, քանի որ ռեակցիայի ժամանակ կոմպլեմենտի ակտիվությունը կարող է որոշ չափով ճնշվել ռեակցիայի այլ բաղադրիչներով (հակագին, շիճուկ):

RSC Bordet-ի հիմնական փորձի ստեղծում՝ Zhangou:

Նախ, ապաակտիվացված և նոսրացված 1:5 փորձարկման շիճուկը լցվում է 2 փորձանոթի մեջ: Այնուհետև հակագենը լցվում է առաջին խողովակի մեջ, իսկ ֆիզիոլոգիական լուծույթը՝ երկրորդի մեջ։ Դրանից հետո բոլոր խողովակներին ավելացվում է կոմպլեմենտի աշխատանքային չափաբաժին:

Բաղադրիչները խառնելուց հետո փորձանոթներով դարակը դրվում է 37 0 C ջերմաստիճանի թերմոստատի մեջ 30 րոպե (տաք կապում): Սառը կապելիս փորձանոթներով դարակը տեղադրվում է սառցե տուփի մեջ 18 ժամվա ընթացքում -4 0 C ջերմաստիճանում: Թերմոստատում պահելուց հետո հեմոլիտիկ համակարգը ավելացվում է բոլոր փորձանոթներին։ Ռեակցիան տրվում է 0,5 մլ ծավալով։ Խողովակները կրկին տեղադրվում են թերմոստատում 2 ժամ, որից հետո արդյունքները նախապես գրանցվում են։ Խողովակները թողնում են սենյակային ջերմաստիճանում, իսկ վերջնական արդյունքը նշվում է հաջորդ օրը։

Ռեակցիայի ինտենսիվության աստիճանը գնահատվում է դրական: Հեմոլիզի ամբողջական ուշացում՝ չորս պլյուս (++++), թերի՝ երեք, և մեկ պլյուս։ Ամբողջական հեմոլիզը նշվում է մինուսներով (-):

RSK Wasserman

Տեղադրված է սիֆիլիսի ախտորոշման համար՝ հակամարմինները հայտնաբերելու, ինչպես նաև արդյունավետությունը որոշելու համար հատուկ թերապիա. Այն հիմնված է Բորդետ-Գենգու կոմպլեմենտի ամրագրման ռեակցիայի սկզբունքի վրա։ Wasserman ռեակցիայի միջև զգալի տարբերությունը հակագենի ոչ սպեցիֆիկությունն է՝ լիպոիդային քաղվածքներից նորմալ օրգաններկենդանիներ.

Վասերմանի ռեակցիան իրականացնելու համար անհրաժեշտ է ունենալ հիվանդի շիճուկ, թիվ 1 և թիվ 2 խաչաձև արձագանքող անտիգենների ախտորոշիչ թեստեր, կոմպլեմենտ, հեմոլիտիկ շիճուկ, ոչխարի կարմիր արյան բջիջներ և աղի լուծույթ:

Diagnosticum No 1 - կոնկրետ, treponemal.

Diagnosticum No. 2-ը կարդիոլիպինի ոչ սպեցիֆիկ հակագեն է, որը բարձր մաքրված տավարի սրտի մզվածք է՝ լիպոիդների մշտական ​​քիմիական բաղադրությամբ: Սրտից արդյունահանվող լիպոիդներ քիմիական բաղադրությունըմոտ են Treponema pallidum-ի լիպոիդներին, հետևաբար, թեև դրանք սպեցիֆիկ չեն, բայց ամրացնում են սպիրոխետի դեմ հակամարմինները: Այս անտիգենները արտադրվում են կենտրոնական և օգտագործվում են ռեակցիայի մեջ՝ նոսրացված ըստ պիտակի վրա նշված տիտրի:

Հիմնական փորձի հետ միաժամանակ տեղադրվում է 2 հսկիչ՝ ակնհայտ բացասական և դրական շիճուկներով։

Կապույտ հազի ժամանակ գրգռիչները Բորդետ-Գանգու բացիլն ու նրա տոքսիններն են, որոնք երկար ժամանակ առաջացնում են լորձաթաղանթի նյարդային ընկալիչների մշտական ​​գրգռում: շնչառական ուղիները, ինչը հանգեցնում է կենտրոնական նյարդային համակարգում (շնչառական և հազի կենտրոններում) գրգռման լճացած ֆոկուսի ստեղծմանը, որն ազդում է երեխաների շնչառության վրա:

Ըստ Ի.Ա.Արշավսկու և Վ.Դ.Սոբոլևայի (1948թ.) սպազմոդիկ շրջանում շնչառությունը պահվում է ներշնչման բարձրության վրա (ներշնչման ապնոէ): Այս պահին շնչառական մկանները մտնում են տոնիկ սպազմի վիճակ, որը հատկապես արտահայտված է դիֆրագմում։ Վերջինս այս պահին գործնականում չի մասնակցում շնչառության ակտին։

Ներշնչման սպազմի տևողությունը՝ 3 - 45 վ,որի ֆոնի վրա տեղի են ունենում ցածր ուժի կարճ արտաշնչող իմպուլսներ, որոնք իրականացվում են ափամերձ մեխանիզմի շնորհիվ: Դրանք շարունակվում են այնքան ժամանակ, մինչև երեխան արտաշնչի ամբողջ վերցրած օդը։ Դրան հաջորդում է հարկադիր աղմկոտ ինհալացիա՝ ուղեկցվող սուլոցով (ռեպրիզ): Եվ այս ամենը կրկնվում է մի քանի անգամ հարձակման ժամանակ։ I. A. Arshavsky, V. D. Soboleva (1948) կարծում են, որ ոգեշնչման ցնցումների հիմքը Traube ֆենոմենն է: Traube (1847), նյարդայնացնում է կենտրոնական հատվածը ֆարադիկ հոսանքով թափառող նյարդ, նկատվել է շնչառական կանգ ներշնչման փուլում:

Կապույտ հազի համարաճող դյուրագրգռության դեպքում շնչառությունը կարող է կանգ առնել այս կամ այն ​​փուլում (շնչառություն կամ ներշնչում), հատկապես կյանքի առաջին ամիսների երեխաների մոտ:

Կենտրոնական նյարդային համակարգում գրգռվածության լճացած ֆոկուսը ձեռք է բերում գերիշխող բոլոր նշանները, ըստ Ուխտոմսկու. նյարդային համակարգ; Գերիշխող ֆոկուսից գրգռումը տարածվում է դեպի հարևան կենտրոններ՝ անոթային (ճնշումը մեծանում է), մկանային (նկատվում են դեմքի և վերջույթների մկանների ցնցումներ), փսխում (հարձակման վերջում հայտնվում է փսխում); վնասվածքը կայուն է, երկար է տևում և թողնում է ռեակցիայի հետք:

Սա լավ հաստատված է կյանքում։ Հաճախ, 2-6 ամսականից հետո, կապույտ հազ ունեցող երեխայի մոտ շնչառական ուղիների այլ հիվանդությունների (գրիպ, վերին շնչուղիների վիրուսային կաթար, թոքաբորբ և այլն) առաջանում է պարոքսիզմալ հազ.

«Օդային վարակների ուղեցույց», Ի.Կ

Հակագեն, կոմպլեմենտ և օժանդակ, ցուցիչ կամ հեմոլիտիկ համակարգ՝ հեմոլիտիկ շիճուկ և ոչխարի էրիթրոցիտներ։

Եթե ​​առաջին համակարգում ձևավորվում է սպեցիֆիկ հակագեն + հակամարմին համալիր, ապա կոմպլեմենտը կլանվում է (համակցվում է այս համալիրի հետ), իսկ երկրորդ համակարգում հեմոլիզ չի լինում։

Ռեակցիան պահանջում է.

1. Փորձնական շիճուկ, որը ստացվում է հիվանդի ուլնար երակի պունկցիայի միջոցով վերցված արյունից: Արյան մակարդումից հետո շիճուկը ներծծվում է առանձին խողովակի մեջ և 30 րոպե անակտիվացվում է 56 °C ջերմաստիճանում ջրային բաղնիքում:

2. Հակագեն - սպանված գոնոկոկների կասեցում:

3. Ոչխարի կարմիր արյան բջիջները ստացվում են ստերիլ կերպով հավաքված դեֆիբրինացված արյունից: Դրանք լվանում են 3 անգամ ցենտրիֆուգելով աղի լուծույթի նոր չափաբաժիններով։ Ռեակցիայի մեջ օգտագործվում է կարմիր արյան բջիջների 3% կասեցում:

4. Հեմոլիտիկ շիճուկը պատրաստվում է նախապես՝ ոչխարի կարմիր արյան բջիջներով ճագարներին իմունիզացնելով: Օգտագործելուց առաջ շիճուկը տիտրվում է։

5. Կոմպլեմենտ - թարմ ծովախոզուկի շիճուկ: Գվինեա խոզի սրտից ներարկիչով արյուն են ծծում, մակարդվելուց հետո առանձնացնում են շիճուկը։ Փորձից առաջ կոմպլեմենտի աշխատանքային չափաբաժինը տիտրվում է։ Դրա համար վերցնում ենք կոմպլեմենտի հիմնական նոսրացումը 1:10 և լցնում փորձանոթների մեջ 0,1-ից մինչև 0,5, որից հետո յուրաքանչյուր փորձանոթի ծավալը ֆիզիոլոգիական լուծույթով կարգավորվում է մինչև 1,5 մլ:

Միաժամանակ պատրաստվում է հեմոլիտիկ համակարգ՝ նոսրացված եռակի տիտրով, հեմոլիտիկ շիճուկ + ոչխարի էրիթրոցիտների 3% կասեցում։ Երկու բաղադրիչներն էլ տարբեր ծավալներով են և 30 րոպե պահվում են թերմոստատի մեջ (խառնուրդի զգայունացում), որից հետո խառնուրդը 1 մլ ավելացնում են փորձանոթների մեջ և 30 րոպե դնում թերմոստատի մեջ։ 2 փորձանոթները ծառայում են որպես հսկողություն.

1. 1 մլ հեմոլիտիկ համակարգ + 1,5 մլ ֆիզիոլոգիական լուծույթ;

2. 0,5 մլ կոմպլեմենտ 1:10 + 0,5 մլ կարմիր արյան բջիջների կասեցում + 1,5 մլ ֆիզիոլոգիական լուծույթ:

Կոմպլեմենտի տիտրը նվազագույն քանակն է, որով դեռ տեղի է ունենում հեմոլիզ: Ռեակցիան կարգավորելու համար վերցրեք կոմպլեմենտի աշխատանքային չափաբաժինը, որը տիտրի նկատմամբ ավելացել է 20-25%-ով, այսինքն՝ սովորաբար այն քանակությունը, որը առկա է հեմոլիզով նախավերջին փորձանոթում: Կոմպլեմենտի չափաբաժնի ավելացումն անհրաժեշտ է, քանի որ ռեակցիայի ժամանակ կոմպլեմենտի ակտիվությունը կարող է որոշ չափով ճնշվել ռեակցիայի այլ բաղադրիչներով (հակագին, շիճուկ):
43) ՌՍԿ Վասերման

Տեղադրված է սիֆիլիսի ախտորոշման համար հակամարմիններ հայտնաբերելու, ինչպես նաև հատուկ թերապիայի արդյունավետությունը որոշելու համար: Այն հիմնված է Բորդետ-Գենգու կոմպլեմենտի ամրագրման ռեակցիայի սկզբունքի վրա։ Wasserman ռեակցիայի միջև էական տարբերությունը հակագենի ոչ սպեցիֆիկությունն է. կենդանիների նորմալ օրգաններից լիպոիդային քաղվածքները օգտագործվում են որպես հակագեն:

Վասերմանի ռեակցիան իրականացնելու համար անհրաժեշտ է ունենալ հիվանդի շիճուկ, ախտորոշիչ միջոցներ, խաչաձև արձագանքող անտիգեններ թիվ 1, թիվ 2, կոմպլեմենտ, հեմոլիտիկ շիճուկ, ոչխարի կարմիր արյան բջիջներ և ֆիզիոլոգիական լուծույթ։

Diagnosticum No 1 - կոնկրետ, treponemal.

Diagnosticum No. 2-ը ոչ սպեցիֆիկ, կարդիոլիպինային հակագեն է, որը խոշոր եղջերավոր անասունի սրտի քաղվածքներ է լիպոիդների մշտական ​​քիմիական բաղադրությամբ: Լիպոիդները քիմիական բաղադրությամբ մոտ են treponema pallidum-ի լիպոիդներին, հետևաբար, թեև դրանք սպեցիֆիկ չեն, բայց ամրացնում են հակամարմինները սպիրոխետի դեմ։

Այս անտիգենները արտադրվում են կենտրոնական մասում և օգտագործվում են նոսրացված ռեակցիայի մեջ՝ ըստ պիտակի վրա նշված տիտրի:

Հիմնական փորձի հետ միաժամանակ տեղադրվում է 2 հսկիչ՝ ակնհայտ բացասական և ակնհայտ դրական շիճուկներով։

Հիմնական փորձի կարգավորում

Նախ, ապաակտիվացված և նոսրացված 1:5 թեստային շիճուկը լցվում է 4 փորձանոթների մեջ: Այնուհետեւ անտիգենները լցնում են 2 փորձանոթի մեջ (թիվ 1, թիվ 2), իսկ ֆիզիոլոգիական լուծույթը լցնում են 3-րդ փորձանոթի մեջ։ Դրանից հետո բոլոր խողովակներին ավելացվում է կոմպլեմենտի աշխատանքային չափաբաժին: Բաղադրիչները խառնելուց հետո փորձանոթներով դարակը 30 րոպե տեղադրվում է 37 °C ջերմաստիճանի թերմոստատի մեջ։ Թերմոստատում պահելուց հետո հեմոլիտիկ համակարգը ավելացվում է բոլոր փորձանոթներին։ Խողովակները կրկին տեղադրվում են թերմոստատի մեջ 2 ժամով, ապա թողնում սենյակային ջերմաստիճանում: Հաջորդ օրը նշվում է ռեակցիայի ինտենսիվության աստիճանը, չորս պլյուս (+++), երեք (+++), երկու (++) և մեկ (+)՝ կախված ինտենսիվությունից։ հեղուկի գույնի և ներքևում գտնվող կարմիր արյան բջիջների նստվածքի չափի մասին: Ամբողջական հեմոլիզը նշվում է (-) մինուսով: Եթե ​​տարբեր անտիգենների հետ արդյունքների միջև կտրուկ անհամապատասխանություն կա, փորձը կրկնվում է արյան նոր չափաբաժնի հետ:
44) ՌԻՏ-ր. Treponema pallidum-ի անշարժացում:

Այս ռեակցիան օգտագործվում է որպես ախտորոշիչ նպատակներ, և ճանաչման համար կեղծ դրական արդյունքներստանդարտ շճաբանական ռեակցիաներ, հատկապես թաքնված սիֆիլիսի դեպքում:

RIBT-ն այն է, որ սիֆիլիսով և ակտիվ կոմպլեմենտով հիվանդների շիճուկում իմոբիլիսինների առկայության դեպքում գունատ տրեպոնեմա կորցնում է շարժունակությունը:

RIBT-ը տեղադրվում է ստերիլ տուփերում: Ռեակցիան ներառում է թեստային շիճուկ, կոմպլեմենտ և հակագեն:

RIBT-ում անտիգենը նապաստակի ամորձիից գունատ տրեպոնեմայի կասեցումն է վաղ ժամկետներ(վարակումից 7-8 օր հետո) սիֆիլիտիկ օրխիտ. Հատուկ կախոցային միջավայրը պահպանում է Treponema pallidum-ի կենսունակությունը առնվազն մեկ օր: Կոմպլեմենտն օգտագործվում է RIBT-ում ծովախոզուկներ. RIBT-ն առաջանում է անաէրոբ պայմաններում: Բաղադրիչներով փորձանոթները տեղադրվում են միկրոանաէրոստատի մեջ, որից մթնոլորտային օդըև գազային խառնուրդ է ներարկվում (95 մաս ազոտ և 5 մաս ածխաթթու գազ) Փորձանոթներով միկրոանաէրոստատը տեղադրվում է թերմոստատի մեջ (35°C) 18-20 ժամ:

Ռեակցիայի ձևավորմանը զուգահեռ անցկացվում են հսկիչ հետազոտություններ՝ նախորդ փորձից վերցված դրական և բացասական արյան շիճուկով։

RIBT-ի արդյունքները գնահատվում են թերմոստատից խողովակները հեռացնելուց հետո (այսինքն՝ փորձից 18-20 ժամ հետո): Pasteur pipette-ի միջոցով փորձանոթի պարունակության մի կաթիլը դրվում է ապակե սլայդի վրա, որը ծածկված է կափարիչով ապակիով և հետազոտվում է մուգ դաշտային մանրադիտակով (նպատակ 40, ակնաբույժ 10): Երբ Treponema pallidum-ի մինչև 20%-ը անշարժացված է, ռեակցիան համարվում է բացասական, 21-ից 30%-ը՝ կասկածելի, 31-ից 50%-ը թույլ դրական, 51-ից 100%-ը՝ դրական: Treponema pallidum-ի անշարժացման տոկոսը որոշվում է հատուկ աղյուսակի միջոցով:

45) Օփսոն-ֆագոցիտային ռեակցիա

Մեխանիզմ՝ ֆագոցիտոզի ավելացում մանրէաբանական բջիջներհակամարմինների, իմունային շիճուկի և կոմպլեմենտի ուղեկցող ազդեցության ազդեցության տակ։

Ռեակցիայի բաղադրիչներ.

1) հակագեն - ամենօրյա մանրէաբանական մշակույթ;

3) լրացում - թարմ ծովախոզուկի շիճուկ;

4) ֆագոցիտներ - լեյկոցիտների կասեցում.

Օպսոնինները հակամարմիններ են, որոնք հայտնաբերված են նորմալ և իմունային շիճուկներում և մանրէներ են պատրաստում ֆագոցիտոզին:

Ռեակցիան իրականացվում է հատուկ փորձանոթներում t = 37° րոպեում: Այնուհետև յուրաքանչյուր փորձանոթից քսուկներ են պատրաստում, հաշվում են 100 ֆագոցիտ և որոշում ֆագոցիտացված միկրոկոնտրոլների քանակը։

Opsonic ինդեքս = phagocytic ինդեքս: նորմալ շիճուկի շիճուկ/ֆագոցիտային ինդեքս

Որքան բարձր է փորձարկվող շիճուկի օպսոնիկ ինդեքսը (պետք է լինի >1), և, հետևաբար, այնքան բարձր է այն: բրուցելոզ):

Այն օգտագործվում է օպսոնինների որոշման համար՝ հակամարմիններ, որոնք խթանում են լեյկոցիտների ֆագոցիտային ակտիվությունը, այսինքն. վարակների սերոախտորոշում, ինչպիսին է բրուցելոզը:

Ֆագոցիտոզի ուժեղացումն առաջանում է ակտիվ կենտրոններով օպսոնինների (Rav բեկոր) բակտերիաների որոշիչներին կցելու պատճառով, իսկ այնուհետև Pc բեկորների օգնությամբ ֆագոցիտների Pc ընկալիչներին։ Սովորական շիճուկը պարունակում է փոքր քանակությամբ օպսոնիններ, որոնք իրենց ազդեցությունն են թողնում կոմպլեմենտի առկայության դեպքում: Իմունային շիճուկում կան ավելի շատ օպսոնիններ, և դրանց ակտիվությունը ավելի քիչ կախված է կոմպլեմենտից:

Բաղադրիչներ:

Փորձարկման շիճուկ

Նորմալ շիճուկ

Ամենօրյա մանրէաբանական կուլտուրա (օրինակ՝ ստաֆիլոկոկային)

Ֆագոցիտներ - նեյտրոֆիլների կասեցում

Ինկուբացնել 37°C ջերմաստիճանում 30 րոպե։ Յուրաքանչյուր փորձանոթից պատրաստվում են քսուքներ, ներկված ըստ Ռոմանովսկի-Գիմսայի, և մանրադիտակի տակ հաշվում են 100 և ավելի նեյգրոֆիլների մեջ մանրէների քանակը, այսինքն. որոշել ֆագոցիտիկ ցուցանիշը.

Ֆագոցիտային ցուցիչ - մեկ նեյտրոֆիլով կլանված մանրէների քանակը:

Opsonic ինդեքս - իմունային (թեստային) շիճուկի ֆագոցիտային ցուցիչ / նորմալ շիճուկի ֆագոցիտային ցուցիչ:

Որքան բարձր է օպսոնիկ ինդեքսը (պետք է լինի > 1), այնքան բարձր է իմունիտետը:

Օփսոն-ֆագոցիտային ինդեքսը թվային ցուցիչ է = ֆագոցիտների քանակը x ֆագոցիտոզի գնահատումը (կախված ներծծվող միկրոբների քանակից): Առավելագույն արժեքը -75 է:

46) RN մկների վրա էկզոտոքսին հաստատելու համար

Այս ռեակցիան հիմնված է էկզոտոքսինը չեզոքացնելու հատուկ հակատոքսիկ շիճուկի ունակության վրա:

Իմունային շիճուկի հակամարմինները կարող են չեզոքացնել միկրոբների կամ դրանց տոքսինների վնասակար ազդեցությունը զգայուն բջիջների և հյուսվածքների վրա, ինչը կապված է հակամարմինների կողմից մանրէաբանական անտիգենների արգելափակման հետ, այսինքն՝ դրանց չեզոքացման հետ:

Չեզոքացման ռեակցիան (RN) իրականացվում է կենդանիների կամ զգայուն փորձարկման առարկաների (բջջային կուլտուրա, սաղմերի) մեջ հակագեն-հակամարմին խառնուրդ ներմուծելով: Կենդանիների և փորձարկման առարկաների միկրոօրգանիզմների կամ դրանց անտիգենների կամ տոքսինների վնասակար ազդեցության բացակայության դեպքում նրանք խոսում են իմունային շիճուկի չեզոքացնող ազդեցության և, հետևաբար, հակագեն-հակամարմին համալիրի փոխազդեցության յուրահատկության մասին:

Ռեակցիան իրականացնելու համար փորձարկման նյութը, որը պետք է պարունակի էկզոտոքսին, խառնում են հակատոքսիկ շիճուկի հետ, պահում թերմոստատում և տալիս կենդանիներին (գվինեա խոզեր, մկներ): Վերահսկիչ կենդանիներին ներարկվում է փորձարկման նյութի ֆիլտրատ, այլ ոչ թե շիճուկով բուժում: Եթե ​​էկզոտոքսինը չեզոքացվի հակատոքսիկ շիճուկով, ապա փորձարարական խմբի կենդանիները կենդանի կմնան։ Վերահսկիչ կենդանիները կսատկեն էկզոտոքսինի արդյունքում։

Էկզոտոքսինի չեզոքացման ռեակցիան տեղի է ունենում, երբ այն փոխազդում է հակատոքսիկ շիճուկի հետ (հակատոքսինային հակամարմիններ): Հակագեն-հակամարմին համալիրի առաջացման արդյունքում թույնը կորցնում է իր թունավոր հատկությունները։

Չեզոքացման ռեակցիան իրականացվում է տոքսինների, տոքսոիդների կամ հակատոքսինների հայտնաբերման և տիտրման համար:

Տոքսինները ստացվում են հեղուկի զտման միջոցով սնուցող միջավայրկամ փորձարկման նյութ, որտեղ աճել են թունավոր բակտերիաները: 30-45 օր ֆորմալդեհիդով 37°C ջերմաստիճանում բուժվելիս թույնը վերածվում է թոքսիդի, որն օգտագործվում է կենդանիների իմունիզացիայի համար՝ հակատոքսիկ շիճուկ ստանալու համար։

In vivo չեզոքացման ռեակցիա. Տոքսինի տեսակը որոշելու համար այն խառնում են ախտորոշիչ հակատոքսիկ շիճուկի հետ և այս խառնուրդը ներարկում են սպիտակ մկների մեջ։ Թույնը հակատոքսիկ շիճուկով չեզոքացնելիս մկները չեն մահանում։

Չեզոքացման ռեակցիան օգտագործվում է դիֆթերիայով (Schick test) և կարմիր տենդով (Dick test) ունեցող երեխաների հակատոքսիկ իմունիտետը որոշելու համար: Դրա համար համապատասխան թույնի որոշակի քանակություն (1/40 DLM) ներմաշկային եղանակով ներարկվում է նախաբազուկի տարածք: Եթե ​​օրգանիզմում կան հակատոքսիններ, ապա թույնը կչեզոքացվի, իսկ ռեակցիան բացասական կլինի։ Օրգանիզմում հակատոքսինների բացակայության դեպքում. բորբոքային ռեակցիատոքսինի ներարկման տեղում.
47) RN (չեզոքացման ռեակցիա) մկների մեջ՝ վիրուսը բացահայտելու համար տիզային էնցեֆալիտ

TBE վիրուսը պաթոգեն է մի շարք լաբորատոր և վայրի կենդանիների համար: Առավել զգայուն են նորածին և երիտասարդ սպիտակ մկները: Ուղեղում վարակվելուց հետո, ներերակային, միջմկանային, այս կենդանիների մոտ առաջանում է էնցեֆալիտ, որն ավարտվում է կենդանիների մահով։ Գյուղատնտեսական կենդանիների շրջանում TBE վիրուսի նկատմամբ առավել ընկալունակ են այծերը, ոչխարներն ու կովերը՝ ավելի քիչ, իսկ ձիերը՝ մի փոքր։ TBE վիրուսը ունի ցիտոպաթոգեն ազդեցություն (CPE)՝ առաջացնելով ցիտոպատիկ փոփոխություններ խոզի սաղմնային երիկամների բջիջների առաջնային և շարունակական կուլտուրաներում (PEB և PES) և բազմանում է առանց ընդգծված CPE-ի շատ այլ դեպքերում: բջջային կուլտուրաներ. Վարակված մկների ուղեղում և վարակված մշակույթների կուլտուրական հեղուկում տեղի է ունենում TBE վիրուսի և հատուկ վիրուսային անտիգենների կուտակում.

TBE վիրուս երկար ժամանակպահվում է ցածր ջերմաստիճաններ(օպտիմալ ռեժիմ -60 աստիճան C և ցածր), լավ է հանդուրժում լիոֆիլացումը, կարող է երկար տարիներ պահպանվել չոր վիճակում, բայց արագորեն անջատվում է սենյակային ջերմաստիճանում: Եռացնելը սպանում է 2 րոպեում, իսկ տաք կաթում 60 աստիճանում։ C-ն մահանում է 20 րոպեում։

Ֆորմալինը, ֆենոլը, ալկոհոլը և այլն նույնպես ունեն ապաակտիվացնող ազդեցություն։ ախտահանիչներ, ուլտրամանուշակագույն ճառագայթում.

Չեզոքացման ռեակցիան հիմնված է վիրուսների վարակիչ ազդեցությունը մարելու հատուկ իմունային շիճուկների ունակության վրա։ Կիրառելի է երկու ուղղությամբ.

1) մեկուսացված վիրուսների մուտքագրման համար.

2) ապաքինված հիվանդների շիճուկներում հակամարմինների տիտրման համար.

Ռեակցիայի կարգավորում.

1. Լաբորատոր կենդանիների վրա. Վիրուսի առկայության չափանիշներ

սպասարկում է լաբորատոր կենդանիների մահը. LD50 հաշվարկված է

Վիրուսային կասեցման առավելագույն նոսրացումը, որը

առաջացրել է վարակված կենդանիների 50%-ի մահը: Համար

Կատարվում է տիզ փոխանցվող էնցեֆալիտի վիրուսի նույնականացում

սպիտակ մկների ներուղեղային վարակ.

2. Հյուսվածքային կուլտուրաներում. Արդյունքները հաշվի են առնվում

Ըստ ցիտոպատիկ ազդեցության (CPE)

Գույնի փոփոխության վրա հիմնված գունային փորձարկման մեթոդի համաձայն

Հեմադսորբցիայով.

3. Հավի սաղմի մեջ։ Արդյունքները գրանցվում են ըստ

քորիոալլանտոիկ մեմբրանի երկայնքով քերծվածքների տեսքը:

48) RTGA

Այս ռեակցիան օգտագործվում է վիրուսաբանական պրակտիկայում.

Որոշելու վիրուսի տեսակը (ապակու վրա);

Հիվանդների շիճուկում հայտնաբերման համար (ընդլայնված):

Հեմագլյուտինացիայի արգելակման ինդիկատիվ ռեակցիա ստեղծելիս ապակու վրա կիրառվում է տիպային հատուկ իմունային շիճուկի 1 կաթիլ, այնուհետև ավելացվում է փորձարկման նյութի 1 կաթիլ և կարմիր արյան բջիջների 5% կասեցման 1 կաթիլ:

Արդյունքների հաշվառում. վիրուսի տեսակը որոշվում է այն շիճուկով, որի հետ ռեակցիան տեղի չի ունեցել, քանի որ մեկուսացված վիրուսի համար հատուկ իմունային շիճուկը ճնշում է նրա հեմագլյուտինացնող ակտիվությունը, իսկ կարմիր արյան բջիջները չեն ագլյուտինացվում:
49) RIF

Որպես պիտակներ օգտագործվում են լուսավոր ֆտորոքրոմ ներկանյութեր (ֆտորիսցեին իզոթիոցիանատ և այլն)։

RIF-ի տարբեր փոփոխություններ կան: Վարակիչ հիվանդությունների էքսպրես ախտորոշման համար Koons RIF-ն օգտագործվում է փորձարկման նյութում միկրոբների կամ դրանց անտիգենների նույնականացման համար:

Կունսի համաձայն RIF-ի երկու եղանակ կա՝ ուղղակի և անուղղակի:

Ուղղակի RIF բաղադրիչներ.

1) հետազոտվող նյութը (կղանքը, որը արտանետվում է քիթ-կոկորդից և այլն).

2) պիտակավորված հատուկ իմունային շիճուկ, որը պարունակում է AT-la ցանկալի հակագենին.

3) նատրիումի քլորիդի իզոտոնիկ լուծույթ.

Փորձարկման նյութից ստացված քսուքը մշակվում է պիտակավորված հակաշիճուկով:

AG-AT ռեակցիան տեղի է ունենում: Լյումինեսցենտով մանրադիտակային հետազոտությունայն տարածքում, որտեղ տեղայնացված են AG-AT համալիրները, հայտնաբերվում է ֆլյուորեսցենտ - փայլ:

Անուղղակի RIF-ի բաղադրիչները.

1) ուսումնասիրվող նյութը.

2) սպեցիֆիկ հակաշիճուկ;

3) հակագլոբուլինային շիճուկ (AT-la ընդդեմ իմունոգոլոբուլինի), պիտակավորված ֆտորիխրոմով.

4) իզոտոնիկ նատրիումի քլորիդի լուծույթ.

Փորձարկման նյութից ստացված քսուքը նախ մշակվում է իմունային շիճուկով մինչև ցանկալի հակագենը, այնուհետև պիտակավորված հակագլոբուլինային շիճուկով:

Լյումինեսցենտ AG-AT համալիրներ - պիտակավորված AT հայտնաբերվում են լյումինեսցենտային մանրադիտակի միջոցով:

Անուղղակի մեթոդի առավելությունն այն է, որ կարիք չկա պատրաստել լյումինեսցենտային հատուկ շիճուկների լայն տեսականի, այլ օգտագործվում է միայն մեկ լյումինեսցենտ հակագլոբուլինային շիճուկ:

Գոյություն ունի նաև անուղղակի RIF-ի 4 բաղադրիչ տեսակ, երբ լրացուցիչ ներմուծվում է կոմպլեմենտ (գվինեա խոզի շիճուկ): Դրական ռեակցիայի դեպքում ձևավորվում է AG-AT - պիտակավորված - AT-կոմպլեմենտի համալիր:

Ռեակցիան վերաբերում է սերոլոգիական ռեակցիաներին, որոնք ներառում են պիտակավորված անտիգեններ կամ հակամարմիններ:

Այն իրականացվում է ուղղակի և անուղղակի մեթոդներով։

ժամը ուղղակի մեթոդհայտնաբերել անտիգենը հիվանդի նյութում: Օգտագործվում է ախտորոշիչ լյումինեսցենտային շիճուկ, որը պարունակում է իմունային շիճուկներից մեկուսացված և ֆտորոքրոմներով պիտակավորված իմունոգոլոբուլիններ։

Հատուկ անտիգենը հայտնաբերվում է վառ կանաչ լյումինեսցենտ կոնգլոմերատների տեսքով, իսկ պատրաստման ֆոնը գունավոր նարնջագույն-կարմիր է։

Ուղղակի իմունոֆլյորեսցենտային ռեակցիայի բաղադրիչները.

1) ուսումնասիրվող նյութը.

2) սպեցիֆիկ լյումինեսցենտային շիճուկ.

3) լյումինեսցենտային մանրադիտակ.

Գրիպի ախտորոշման ժամանակ տարանջատվում են պարագրիպի և ադենովիրուսային վարակի պաթոգեններից: Քթի խոռոչի շվաբրը մշակվում է գրիպի լյումինեսցենտային շիճուկով կամ գրիպի իմունոգոլոբուլինով:

«+» արդյունքը կանաչ փայլի տեսքով ստացվում է 3 ժամ հետո։

Անուղղակի մեթոդով հայտնաբերվում և տիտրվում են հատուկ հակամարմիններ։ Շիճուկի տիտրը նրա առավելագույն նոսրացումն է, որի ժամանակ նշվում է «+ +» ֆլյուորեսցենցիան:

Անուղղակի իմունֆլյուորեսցենտային ռեակցիայի բաղադրիչները

Արագ ախտորոշման ժամանակ անտիգեն որոնելու համար.

1) փորձարկման նյութ (անտիգեն);

2) կոնկրետ շիճուկ;

3) հակագլոբուլինային լյումինեսցենտային շիճուկ

4) լյումինեսցենտային մանրադիտակ.

/ փուլ կոնկրետ

Շիճուկի հակամարմինները ներծծվում են հակագենին:

// ոչ սպեցիֆիկ փուլ

Օգտագործվում է հակագլոբուլինային շիճուկ՝ ֆտորոքրոմներով պիտակավորված հակամարմիններով։ Ստեղծվում է բարդ հակագեն + հակամարմին (I) + հակագլոբուլինային շիճուկ (II), որը փայլում է։

borde - jangu ռեակցիա